Method Article

Pobieranie próbek mikroekstrakcji do fazy stałej: technika ekstrakcji próbki z tkanek przeszczepu oparta na sondzie

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Źródło: Stryjak, I. et al. Użycie biopsji chemicznej do oceny jakości przeszczepu. J. Vis. Exp. (2020)

W tym filmie demonstrujemy ekstrakcję metabolitów z nerki dawcy za pomocą sondy SPME. Wyekstrahowane metabolity można wykorzystać do przeprowadzenia analizy metabolomicznej i lipidomicznej w celu oceny jakości narządu do przeszczepu.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie procedury z udziałem ludzi zostały przeprowadzone zgodnie z instytucjonalnymi, krajowymi i międzynarodowymi wytycznymi dotyczącymi dobrobytu ludzi i zostały sprawdzone przez lokalną komisję rewizyjną instytucji.

1. Przygotowanie sond

  1. Przygotować sondy ze stopu tytanu i niklu (długość 40 mm; średnica 0,2 mm) pokryte sorbentem mieszanym o średnicy 7 mm. Liczba sond zależy od punktów czasowych docelowych podczas całej procedury oraz liczby powtórzeń (zalecane jest 3 na punkt czasowy).
    nuta: Długość i rodzaj fazy ekstrakcji można dostosować w zależności od trybu badania, polarności ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Nie stwierdzono konfliktu interesów.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
kwas octowyMerck5330010050Dodatek do fazy ruchomej
AcetonitryluAlchem (Chemia)Nr kat. 696-34967-4X2,5LRozpuszczalnik HPLC
Octan amonuMerck5330040050Dodatek do fazy ruchomej
STOŁOWY MIKSER XL WIELORUROWY VORTEXERBenchmark naukowyZobacz materiał BV1010Mieszalnik wirowy
CzapkiTechnologie Perlan5183-2076Niebieski scrw tp, wstępnie nacięty PTFE/Si spta, 100PK
chloroformMerck1024441000
Nabój Discovery HS F5 Supelguard, 3 μm, L × ID 2 cm × 2,1 mmMerck567570-UKolumna ochronna HPLC
Discovery HS F5, 2,1 mm x 100 mm, 3 μmMerck567502-UKolumna HPLC
kwas mrówkowyAlchem (Chemia)497-94318-50MLDodatek do fazy ruchomej
Szklane fiolkiTechnologie Perlan5182-0714
HILIC Luna 3 μm, 200A, 100 x 2.0 mmShim-PolPHX-00D-4449-B0Kolumna HPLC
Kartridż HILIC SecurityGuard, 3 μm, 4 x 2.0 mmShim-PolPHX-AJ0-8328Kolumna ochronna HPLC
IzopropanolAlchem (Chemia)231-AL03262500Rozpuszczalnik HPLC
metanolAlchem (Chemia)Nr kat. 696-34966-4X2,5LRozpuszczalnik HPLC
Woda nano-czystaMerck1037281002Rozpuszczalnik HPLC
Q Exactive Focus hybrydowy kwadrupol-Orbitrap MSThermo ScientificQ Intensywna OstrośćSpektrometr masowy
SeQuant ZIC-cHILIC 3μm,100Å 100 x 2,1 mmMerck1506570001Kolumna HPLC
Zestaw osłon SeQuant ZIC-HILIC 20 x 2,1 mmMerck1504360001Kolumna ochronna HPLC
Sondy światłowodowe SPME LC, tryb mieszanySupelco powiedział:Włókna prototypowe
Systemy HPLC UltiMate 3000Thermo ScientificUltiMate 3000System HPLC
Wkładki do fiolek (dezaktywowane)Technologie PerlanNr kat. 5181-8872
XSelect CSH C18 3,5 μm 2,1x75mmWody186005644Kolumna HPLC
XSelect CSH C18 VanGuard Kartridż 3.5μm, 2.1x5mmWody186007811Kolumna ochronna HPLC

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Solid Phase MicroextractionSPME ProbeMetabolite ExtractionGraft Tissue SamplingOrgan Quality AssessmentHydroalcoholic CleaningActivation SolutionDesorption SolutionLC MS AnalysisSterile Processing

Related Articles