Mysi model jednostronnej niedrożności moczowodu: zabieg chirurgiczny mający na celu zablokowanie przepływu moczu z nerki w modelach mysich

Streszczenie

Źródło: Yanai, K. et al. Ilościowa ocena ekspresji mikroRNA metodą PCR w czasie rzeczywistym w nerkach myszy z jednostronną niedrożnością moczowodu. J. Vis. Exp. (2020)

Ten film pokazuje procedurę generowania modelu myszy z jednostronną niedrożnością moczowodu. Zabieg polega na przecięciu jednego z moczowodów myszy w celu utrudnienia przepływu moczu.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Chirurgia UUO

1. Przygotuj następujące przedmioty: izofluran, arkusz korka, krem do depilacji, chusteczki laboratoryjne, szalkę Petriego z PBS, jedwab 4-0, nylon 4-0, strzykawkę 2,5 ml, waciki, pęsetę, nożyczki chirurgiczne i 8-tygodniowe samce myszy C57BL/6.
2. Znieczulij mysz 1,5% izofluranem i utrzymuj na poziomie 1,5%. Następnie nałóż krem do depilacji na brzuch myszy. Po kilku minutach zetrzyj krem do depilacji chusteczką laboratoryjną nasączoną PBS.
3. Wstrzyknij 70% etanolu w brzuch myszy i umieść mysz w pozycji leżącej na arkuszu korka.
4. Za pomocą nożyczek chirurgicznych i pęsety wykonaj nacięcie w skórze na brzuchu i przetnij mięsień i błonę otrzewnową od pęcherza moczowego do lewej dolnej krawędzi żeber.
5. Umieścić strzykawkę o pojemności 2,5 ml pod myszką. Weź dwa bawełniane waciki i zwilż je PBS. Ostrożnie odciągnij jelita na bok za pomocą pęsety i umieść zwilżone waciki w odpowiednim miejscu, aby zidentyfikować lewy moczowód. Za pomocą pęsety podnieś lewą nerkę.
6. Za pomocą jedwabiu 4-0 podwiązać lewy moczowód w dwóch miejscach oddalonych od siebie o ok. 1 cm. Przeciąć moczowód w środkowym punkcie dwóch podwiązania, a następnie użyć nylonowych szwów 4-0, aby zamknąć błonę otrzewnową i nacięcie.