Generowanie modelu raka nerkowokomórkowego: protokół rozwoju ortotopowego mysiego modelu RCC poprzez donerkową implantację komórek rakowych

Streszczenie

Źródło: Murphy, K. A. et al. Syngenetyczny mysi model przerzutowego raka nerkowokomórkowego do ilościowej i podłużnej oceny terapii przedklinicznych. J. Vis. Exp. (2017)

W tym filmie rozwijamy ortotopowy mysi model raka nerkowokomórkowego. Model ten skutkuje powtarzalnymi guzami pierwotnymi w wstrzykniętej nerce i przerzutami w płucach, co pozwala na ocenę postępu choroby i leczenia.

Protokół

1. Implantacja komórek

Aby wszczepić komórki Renca donerkowo, przygotuj komórki Renca do jednokomórkowego zawiesiny o stężeniu 2 x 10⁶ komórek/ml w Zrównoważonym Roztworze Soli Hanka (HBSS).

1. Usunąć przylegające komórki Renca z kolby do hodowli tkankowej, używając 0,25% trypsyny w HBSS. Po ~5 minutach dodaj cały RPMI do kolby, aby zneutralizować trypsynę i przenieś komórki do probówki wirówkowej w celu przemycia. Odwirować komórki przy względnej sile odśrodkowej g 300 (rcf x g) przez 5 minut w temperaturze 25 °C.
2. Zdekantować supernatant i ponownie zawiesić komórki w HBSS. P....

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Maść okulistyczna ze sztucznymi łzami	Akorn powiedział:	NDC 17478-162-35
Klej do tkanek Vetbond	3 mln	CBGBIW011019
Roztwór betadyny (powidonjodyna, 5%) NDC	Produkty Purdue, L.P.	Nr kat. 67618-155-32
0,25% Marcaine (Bupivavaine HCl do wstrzykiwań)	Hospira	0409-1587-50
Poduszka grzewcza	Sunbeam
Strzykawki BD		309659
gaza	przedsięwzięcie	908291
Ketamina	Phoenix Pharmaceuticals NDC	Nr kat. 57319-609-02
Ksylazyna	Akorn NDC	Nr kat. 59399-111
Zrównoważone sole Hanka	Sigma-Aldrich	Zobacz materiał H2387
nożyczki
Kleszcze
Renca (Renca)	Kontroler ATCC (Kontroler T	CRL-2947