Przygotowanie rusztowania nasiennego MSC: technika przygotowania rusztowania wysianego mezenchymalnymi komórkami macierzystymi do chirurgicznej implantacji do modelu mysiego

Streszczenie

Źródło: Sheets, K. T. et al. Resekcja glejaka pod kontrolą obrazu i wewnątrzczaszkowa implantacja terapeutycznych rusztowań nasionych komórkami macierzystymi. J. Vis. Exp. (2018)

Ten film opisuje technikę wysiewu mezenchymalnych komórek macierzystych (MSC) na biodegradowalnym rusztowaniu z poli(kwasu mlekowego) (PLA). Przygotowane rusztowania mogą być wszczepione do chirurgicznej jamy resekcyjnej mózgu, skąd mogą migrować w kierunku ognisk nowotworowych. Co więcej, komórki te mogą być zmodyfikowane tak, aby wyrażały białka terapeutyczne w celu stymulowania apoptozy w komórkach nowotworowych.

Protokół

1. Hodowla komórkowa i przygotowanie rusztowania

UWAGA: Rusztowania powinny być przygotowane 48 godzin przed implantacją u myszy. Poniższe woluminy są dostarczane dla każdego rusztowania. Pomnóż ilości w razie potrzeby dla dodatkowych rusztowań.

1. Pociąć rusztowania z poli(kwasu mlekowego) (PLA) na kawałki wielkości jamy resekcyjnej (około 2 mm x 2 mm). Rusztowania można ciąć ręcznie za pomocą nożyczek lub dziurkacza w celu uzyskania powtarzalności.
2. Sterylizować, zanurzając w 70% etanolu na 15 minut, a następnie zanurzając w PBS. Umieść rusztowanie w zmodyfikowanym pożywce Eagle's Medium....