Artykuł metodologiczny

Analiza objętości pachwinowych węzłów chłonnych myszy: technika obrazowania ultrasonograficznego o ultrawysokiej częstotliwości w celu określenia objętości pachwinowego węzła chłonnego w modelu mysim

8 lipca 2025

W tym artykule

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Źródło: Vitiello, M. et al., Analiza objętości węzłów chłonnych za pomocą ultrawysokiej częstotliwości obrazowania ultrasonograficznego w genetycznie modyfikowanym mysim modelu czerniaka Braf/Pten. J. Vis. Exp. (2021)

W tym filmie demonstrujemy technikę obrazowania pachwinowego węzła chłonnego w modelu mysim za pomocą ultrawysokiej częstotliwości obrazowania ultradźwiękowego. Ta nieinwazyjna technika obrazowania pozwala na monitorowanie zmian objętości węzłów chłonnych u zwierzęcia w czasie.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Procedura obrazowania

  1. Umieść mysz w komorze indukcyjnej do znieczulenia gazowego i dostarczaj 3% izofluranu w czystym tlenie, aż zwierzę zostanie w pełni znieczulone. Sprawdź głębokość znieczulenia przez brak reakcji na uszczypnięcie łapy.
  2. Przenieś zwierzę na podgrzewaną deskę - stanowiącą część stacji obrazowania UHFUS - trzymając zwierzę w pozycji leżącej. Użyj sondy doodbytniczej nasmarowanej wazeliną, aby zmierzyć temperaturę ciała. Dostosuj temperaturę deski, aby utrzymać temperaturę ciała myszy w fizjologicznym zakresie (36 ± 1°C).
  3. Zwilż oczy myszy maścią weterynaryjną, aby zapobiec wysuszeniu podczas znieczulenia. Dostarczyć gaz narkotyczny (1,5% izofluranu w czystym tlenie) przez maskę na nos myszy. Dostosuj zawartość procentową izofluranu, aby utrzymać prawidłową głębokość znieczulenia.
  4. Pokryj przednią i tylną łapę pastą przewodzącą i przyklej je do elektrod płytki EKG osadzonych w tablicy. Sprawdź, czy parametry fizjologiczne (tętno, sygnał oddechowy i temperatura ciała) są prawidłowo rejestrowane i wyświetlane.
  5. Usuń włosy z obu obszarów pachwinowych, nakładając środek do depilacji i pokryj je akustycznym środkiem sprzęgającym.
  6. Zamocuj sondę liniową UHFUS (częstotliwość środkowa 40 MHz) w specjalistycznym silniku 3D osadzonym w stacji obrazowania UHFUS, umożliwiając zautomatyzowany i stopniowy ruch sondy.
  7. Prawidłowo zorientuj i wyreguluj położenie sondy ultrasonograficznej, aby uzyskać obrazy pachwinowego węzła chłonnego w krótkiej osi (lewy/prawy) i umieść obszar zainteresowania w strefie ogniskowej.
  8. Zeskanuj całą objętość pachwinowego węzła chłonnego jako sekwencję obrazów 2D w trybie B, jak opisano wcześniej. Uzyskuj obrazy na wielu poziomach węzła chłonnego poprzez liniowy ruch głowicy z rozmiarami kroków w skali mikrometrycznej, aby generować dane 3D w postaci automatycznie bramkowanych pętli filmowych z oddychaniem i sercem.
  9. Ustaw zapis obrazu z następującymi parametrami: odległość skanowania w zakresie od 2 do 5 mm (w zależności od wielkości węzłów chłonnych); wielkość kroku 44 μm, z wynikiem 46-114 kroków skanowania/wycinki węzłów chłonnych i czasem akwizycji 1-3 min na zwierzę. Cyfrowe przechowywanie uzyskanych obrazów w formacie RAW (DICOM) w celu dalszych analiz offline.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Nie stwierdzono konfliktu interesów.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Klasa B6. Myszy Cg-Braftm1Mmcm Ptentm1Hwu Tg(Tyr-cre/ERT2)13Bos/BosJ (Braf/Pten)Laboratorium JacksonaNumer katalogowy: 13590
Blu żelSooft IaliaŻel do roztworu okulistycznego
IsoFlo (izofloran)Urządzenie ZoetisPłyn do znieczulenia gazowego
Żel SigmaParkerŻel do elektrod
Żel transsoniczny bezbarwnyTelic SAUŻel do ultradźwięków
Veet powiedział:Reckitt Benckiser ITKrem do depilacji
Kompaktowy system podwójnego znieczuleniaFujifilm, Visualsonics Inc.System anestezjologiczny na bazie izofluranu wyposażony w stożek nosowy i komorę indukcyjną
MX550S (Płyta MX550SFujifilm, Visualsonics Inc.Sonda liniowa UHFUS
Vevo 3100Fujifilm, Visualsonics Inc.System UHFUS
Stacja obrazowania VevoFujifilm, Visualsonics Inc.Stacja obrazowania UHFUS i Zaawansowany Zakład Monitorowania Fizjologicznego wyposażone w podgrzewaną płytę
Laboratorium Vevo Fujifilm, Visualsonics Inc.Platforma programowa do post-processingu obrazów ultrasonograficznych
) powiedział:

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Obrazowanie ultrad wi kowe 3Dobrazowanie w trybie Bskanowanie przetwornikiemmonitorowanie fizjologiczneznieczulona myszsprz ganie akustyczne

Powiązane artykuły