$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.
1. Przygotowanie do operacji
- Sterylizacja narzędzi: Przed zabiegiem wysterylizuj narzędzia chirurgiczne parą wodną w autoklawie (121 °C przez 15 min). Zapakuj narzędzia do metalowego pojemnika i przechowuj je do czasu, gdy zostaną użyte w gabinecie.
- Konfiguracja platformy chirurgicznej: Do operacji należy przydzielić powierzchnię stołu o wymiarach co najmniej 60 cm x 60 cm. Oczyść powierzchnię 75% alkoholem i przykryj jednorazowym ręcznikiem medycznym. Umieść sterylny pakiet narzędzi chirurgicznych, odczynniki, artykuły chirurgiczne na jednorazowym ręczniku medycznym w górnej 1/3 obszaru. Pozostaw pozostałe 2/3 obszaru czyste do operacji chirurgicznej. Dodaj hotpad pod podkładkę chirurgiczną, aby uzyskać wsparcie termiczne.
- Przygotowanie zwierząt
- Umieść zwierzę (myszy C57BL/6J, samiec, 8 tygodni) w komorze indukcyjnej. Włącz parownik na poziomie indukcji 4% dla izofluranu i 4 l/min dla tlenu. Po całkowitym znieczuleniu zwierzęcia należy utrzymać znieczulenie za pomocą stożka nosowego i podawanie środka znieczulającego na poziomie 1,5% dla izofluranu i 0,4 l/min dla tlenu podczas operacji. Monitoruj zwierzę pod kątem oddychania.
- Zastosuj maść do oczu z chlorowodorkiem chlorowodorku chlorowodorku, aby zapobiec wysuszeniu rogówki podczas zabiegu.
- Ogol obszar chirurgiczny na powierzchni grzbietowej od dolnej części klatki piersiowej do górnej części okolicy krzyżowej za pomocą trymera dla małych zwierząt. Usuń ogolone futro chusteczkami higienicznymi.
- Nałóż krem do depilacji na ogolone miejsce i pozostaw go tam nie dłużej niż 3 minuty. Usuń krem gazą i spłucz 2 ml 0,9% sterylnego soli fizjologicznej.
- Umieść specjalnie wykonaną cylindryczną podkładkę chirurgiczną (ryc. 1A) pod brzuchem myszy, aby podnieść kręgosłup lędźwiowy i ułatwić operację chirurgiczną.
2. Ekspozycja wyrostków kolczystych od trzeciego odcinka lędźwiowego do piątego odcinka lędźwiowego (L3–L5)
- Użyj palca wskazującego, aby dotknąć podskórnych wyrostków kolczystych kręgów lędźwiowych, które są bardziej skierowane na zewnątrz, i porównaj z kręgami piersiowymi i krzyżowymi, aby zidentyfikować odcinek lędźwiowy.
- Spłucz skórę 75% alkoholem. Wykonaj 3–4 cm nacięcie skóry w linii środkowej nad obszarem drewna od środkowej części klatki piersiowej do biodra za pomocą ostrza skalpela, aby odsłonić powięź.
- Zidentyfikuj kręgosłup lędźwiowy na podstawie morfologii powięzi tylnej umieszczonej na końcach wyrostków kolczystych. Szczegółowo, trzecia powięź lędźwiowa (L3) do pierwszej powięzi krzyżowej (S1) różni się od innych powięzi kształtem "V". Ostatnia końcówka "V" łączy się z pierwszą powięzią krzyżową (S1), a pierwsza końcówka "V" odpowiada wyrostkowi kolczystemu L3 (ryc. 1B).
- Wykonaj tylne nacięcia mięśni przykolcowych wzdłuż wyrostków kolczystych od L3 do L5 po obu stronach bocznie za pomocą ostrza skalpela (ryc. 1C). Kontroluj głębokość nacięcia w kierunku faset, aby zmniejszyć krwotok.
- Oddziel warstwy mięśni za pomocą dwóch kleszczy okulistycznych, aby odsłonić wyrostki kolczyste L3 do L5 i więzadła nadokolcowe.
3. Resekcja wyrostków kolczystych L 3–L5 wraz z więzadłami
- Oddziel poszczególne wyrostki kolczyste, odcinając więzadła międzykolcowe za pomocą nożyc Venus (ryc. 1D).
- Wytnij wyrostki kolczyste L3–L5 wraz z więzadłami międzykolcowymi za pomocą nożyc Wenus (ryc. 1E).
- Zszyj nacięcie skóry sterylnym jedwabnym plecikiem (rozmiar szwu 5,0) bez ponownego przyczepiania mięśni przykręgosłupowych.
- Nałóż maść do oczu z chlorowodorkiem chlorotetracykliny na miejsce operacji.
