$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.
1. Przygotowanie zwierząt
- Uspokoić świnię poprzez domięśniowe wstrzyknięcie tiletaminy (3,75 mg/kg) i zolazepamu (3,75 mg/kg) oraz deksmedetomidyny (37,5 μg/kg). Poczekaj, aż straci przytomność.
- Przygotować linię dożylną, wprowadzając kaniulę 20 G do żyły usznej.
nuta: Upewnij się, że kaniula znajduje się w żyle, wstrzykując 5-10 ml soli fizjologicznej przez kaniulę. Jeśli żyła została pominięta, będzie to zauważalne przez mały obrzęk tkanki ucha.
- Zaintubuj świnię, aby upewnić się, że częstość oddechów może być regulowana przez cały czas trwania operacji.
nuta: Upewnij się, że intubacja przebiega pomyślnie, wywierając nacisk na klatkę piersiową świni i upewnij się, że z rurki intubacyjnej wydostaje się wymuszone powietrze.
- Podłączyć rurkę intubacyjną do respiratora ustawionego na częstość oddechów 14 oddechów/min.
- Podłącz pulsoksymetr i mankiet do ogona, aby monitorować tętno (HR), ciśnienie krwi (BP) i nasycenie tlenem (sats). Włóż termometr doodbytniczy, aby monitorować temperaturę rdzenia.
- Przygotować dożylną torebkę ketaminy (5 mg/kg/min), midazolamu (0,25 mg/kg/min) i fentanylu (2,5 μg/kg/min) w soli fizjologicznej i rozpocząć wlew dożylny w ilości około 2 kropli/s.
nuta: Przez cały czas trwania operacji może być konieczne zwiększenie lub zmniejszenie szybkości infuzji w zależności od parametrów życiowych zwierzęcia.
- Trzymając świnię w pozycji leżącej, obmacuj tył głowy i szyję zwierzęcia, aby zlokalizować i oznaczyć grzebień potyliczny i kręgosłup pierwszych kręgów piersiowych oraz podstawę każdego ucha.
- Narysuj linię prostą między grzbietem a kręgami wzdłuż osi podłużnej. Narysuj dwie linie od grzbietu do podstawy każdego ucha, podążając za podstawą czaszki (Rysunek 1A).
- Sprawdź, czy zwierzę jest w głębokim śnie, ostrożnie zaciskając ogon i obserwując, czy nie ma odruchu ogonowego.
nuta: Jeśli zwierzę nadal ma odruch, szybkość infuzji środka znieczulającego powinna być stopniowo zwiększana, aż zwierzę przestanie wykazywać odruch.
2. Chirurgia
UWAGA: Przez cały czas trwania operacji konieczne jest posiadanie co najmniej jednego asystenta, który odsysa lekkie krwawienie i kauteryzuje wszelkie odcięte naczynia.
- Za pomocą skalpela z ostrzem # 21 wykonaj nacięcie skórne wzdłuż linii podłużnej w dół do mięśnia.
- Przedłuż dwa prostopadłe nacięcia skóry dalej wzdłuż ramion o długości 10-15 cm.
- Od grzbietów potylicznych wykonaj nacięcia skórne wzdłuż linii w dół do podstawy każdego ucha.
- Chwytając anatomicznymi kleszczami rogi skóry utworzone na grzebieniu potylicznym, ostrożnie oddziel skórę od leżącego pod nią mięśnia, delikatnie przesuwając ostrzem skalpela po powięzi, przesuwając się od rostralnego do ogonowego. Po wycięciu skóry po każdym z pięciu nacięć powinny być widoczne części mięśni czworobocznych.
- Wykonaj podłużne nacięcie skalpelem o głębokości około 1 cm, w miejscu, w którym czworoboczny styka się w linii środkowej.
nuta: Podczas przecinania mięśni występuje zwiększona skłonność do krwawienia, więc kauteryzator powinien być gotowy. W przypadku przecięcia większego naczynia jedna osoba powinna szybko ścisnąć je gazą, podczas gdy druga osoba używa kauteryzatora.
- Używając kombinacji prostych i zakrzywionych kleszczy chirurgicznych, wykonaj rozwarstwienie, pracując wzdłuż podłużnego cięcia w mięśniach. Spowoduje to oddzielenie brzuchów mięśnia czworobocznego, a także leżącego pod nim mięśnia półkolczastego główki.
- Odetnij wszystkie utrzymujące się włókna mięśniowe skalpelem i kontynuuj rozwarstwienie, aż semispinalis capitus complexus stanie się widoczny
.
- Odetnij pochodzenie mięśni czworobocznych i półkręgosłupowych mięśni szczękowych wzdłuż tylnej części czaszki. Ostrożnie oddziel je wzdłużnie skalpelem, wykonując rozwarstwienie, aż półkręgosłup główki będzie w pełni widoczny.
- Wycofaj mięśnie czworoboczne i półkolczyste mięśnie panewkowe za pomocą samopodtrzymujących się zwijaczy.
- W miejscu, w którym brzuchy semispinalis capitus complexus spotykają się w linii środkowej, wykonaj podłużne nacięcie skalpelem o głębokości około 1 cm.
nuta: Należy pamiętać o ewentualnym dodatkowym krwawieniu w tym miejscu. Krwawienie można opanować za pomocą kombinacji wacików bawełnianych i kauteryzacji.
- Za pomocą kleszczy chirurgicznych wykonaj rozwarstwienie, pracując wzdłuż podłużnego cięcia między mięśniami brzucha, aż grzbietowa strona atlasu (CI) będzie wyczuwalna.
- Odetnij pochodzenie mięśni semispinalis capitus complexus wzdłuż tylnej części czaszki i oddziel je wzdłużnie od leżących poniżej kręgów za pomocą skalpela i rozwarstwienia.
- Wycofaj mięśnie półrdzeniowe kompleksu za pomocą innego zestawu samopodtrzymujących się retraktorów.
- Za pomocą skalpela ostrożnie usuń pozostałą tkankę pokrywającą obszar, w którym atlas styka się z podstawą czaszki.
- Umieszczając jedną rękę pod szyją zwierzęcia i jeden palec na styku atlasu i czaszki, jednocześnie unieś głowę i zegnij szyję, jednocześnie dotykając palcem, aby drugą ręką odsłonić cisterna magna.
nuta: Cisterna magna jest rozpoznawalna podczas badania palpacyjnego jako silna elastyczna struktura z niewielkim odbiciem, gdy nacisk jest zwalniany palcem.
