$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.
1. Dostęp wewnątrznaczyniowy
UWAGA: Dostęp wewnątrznaczyniowy należy ustanowić w prawej zewnętrznej żyle szyjnej, lewej zewnętrznej żyle szyjnej, lewej tętnicy szyjnej, lewej tętnicy udowej i prawej żyle udowej. U świni żyła szyjna zewnętrzna jest znacznie większa niż żyła szyjna wewnętrzna, a zatem łatwiej dostępna. Wszystkie materiały wymagane w tej sekcji pokazano na rysunku 1A.
- Ogolić zwierzę w miejscach nakłucia w przypadku dostępu wewnątrznaczyniowego.
- Zdezynfekuj skórę chlorheksydyną (lub jodowidonem) i wytrzyj do czysta alkoholem izopropylowym. Powtórz jeszcze dwa cykle.
- Umieść sterylną serwetkę w dezynfekowanym obszarze z centralnie umieszczonym otworem w pokrowcu.
- Użyj urządzenia ultradźwiękowego z sondą liniową. Przykryj sondę sterylną osłoną i użyj sterylnego żelu do badania naczyniowego.
- Użyj sterylnego cewnika żylnego 17 G, aby nakłuć skórę i poprowadzić igłę do umiejscowienia wewnątrznaczyniowego za pomocą ultradźwięków (ryc. 1B, C).
- Zastąp igłę prowadnikiem przy użyciu techniki Seldingera. Usuń cewnik żylny, pozostawiając tylko prowadnik w świetle wewnątrznaczyniowym. Następnie wykonaj małe nacięcie skóry (~5 mm) przylegające do prowadnika, aby ułatwić wprowadzenie osłony.
- Umieść osłonę 8 French (F) na przewodzie prowadzącym i w wybranym naczyniu (technika Seldingera). Wybierz osłonkę 8F w prawej zewnętrznej żyle szyjnej (do cewnikowania prawego serca) oraz w lewej tętnicy szyjnej (do cewnika pętlowego LV PV). Wystarczająca ilość światła jest niezbędna, aby uniknąć uszkodzenia cewników.
- Umieść osłonkę 7F w lewej zewnętrznej żyle szyjnej.
- Umieść osłonkę 7F w lewej tętnicy udowej. Dostęp służy do inwazyjnego pomiaru ciśnienia krwi i gazometrii.
- Umieść osłonkę 12F (lub 14F, jeśli jest dostępna) w prawej żyle udowej w celu wprowadzenia balonu z żyły głównej dolnej (IVC). Rozważ użycie rozszerzacza w dwóch krokach dla większych osłon.
- Potwierdź i kontroluj położenie wszystkich osłonek, pobierając krew (odpowiednio żylną lub tętniczą) i łatwo przepłukując izotoniczną solą fizjologiczną. Osłonki są prawidłowo umieszczone w naczyniu krwionośnym, jeśli można pobrać krew bez oporu.
- Przymocuj wszystkie pochewki za pomocą szwu skórnego (rozmiar 3.0), aby uniknąć przypadkowego usunięcia osłonki. Szwy skórne zostaną usunięte po zakończeniu protokołu wraz z usunięciem osłonek.
- Podłączyć dostęp do tętnicy udowej do przetwornika ciśnienia i skalibrować do ciśnienia atmosferycznego. Upewnij się, że ta konfiguracja generuje prawidłową formę krzywej ciśnienia tętniczego.
- Pobrać próbkę krwi tętniczej z osłonki tętniczej i przeanalizować ją na próbniku krwi tętniczej, aby ocenić pH, tętnicze ciśnienie parcjalne dwutlenku węgla (PaCO2) i tlenu (PaO2, w zależności od wybranego FiO2), a także poziom hemoglobiny, elektrolitów, glukozy we krwi i mleczanu.
- W razie potrzeby skoryguj elektrolity i poziom glukozy we krwi do standardowych wartości poprzez wlew potrzebnego produktu. W szczególności należy wziąć pod uwagę korektę poziomu potasu, ponieważ zaburzenia potasu mogą zwiększać ryzyko arytmogenezy wywołanej przez oprzyrządowanie.
- Jeśli świnia była na czczo przed eksperymentem, rozważ infuzję soli fizjologicznej w bolusie (10 ml/kg w infuzji przez 30-60 minut) lub podobnego krystaloidu, aby przeciwdziałać hipowolemii.
- Rozważ ciągłą infuzję izotonicznego roztworu soli fizjologicznej w ilości 4 ml/kg/h, aby przeciwdziałać poceniu się przez cały czas trwania protokołu.
UWAGA: Na tym etapie eksperyment można wstrzymać.
2. Cewnikowanie prawego serca
- Przepłucz cewnik Swan Ganz solą fizjologiczną i upewnij się, że balon jest prawidłowo napompowany.
- Podłącz porty cewnika Swan Ganz do przetworników ciśnienia. Zresetuj ciśnienie do ciśnienia atmosferycznego, utrzymując dwa porty ciśnieniowe (odpowiednio dla tętniczego ciśnienia płucnego i centralnego ciśnienia żylnego) na środkowym poziomie pachowym świni.
- Wprowadzić cewnik Swan Ganz przez osłonkę 8F w prawej żyle szyjnej.
UWAGA: Ołowiane fartuchy lub podobne środki ochronne powinny być noszone za każdym razem, gdy używasz fluoroskopii.
- Obserwuj podczas fluoroskopii, gdy dystalna część cewnika Swan Ganz znajduje się poza osłonką. Napompuj balon za pomocą dołączonej strzykawki.
UWAGA: Napompowanie balonu Swan Ganz wewnątrz pochwy spowoduje uszkodzenie balonu. Widok przednio-tylny fluoroskopii jest wystarczający dla wszystkich opisanych procedur.
- Przesuwaj cewnik Swan Ganz powoli, podążając za jego ruchami na fluoroskopii. Wolniejsze postępy pozwolą przepływowi krwi kierować cewnikiem.
- Obserwuj zmiany w sygnale ciśnienia z dystalnego portu, gdy wchodzi on do RV i krótko po tętnicy płucnej (ryc. 2). Upewnij się, że cewnik przesuwa się bez żadnego oporu.
- Upewnij się, że ciśnienie zmienia się z 5-8 mmHg w centralnym krążeniu żylnym na 20-30 mmHg w skurczu i 0-5 mmHg w rozkurczu w RV. Po przejściu przez zastawki płucne ciśnienie rozkurczowe wyniesie 10-15 mmHg (patrz rysunek 2 dla zmian kształtów sygnału ciśnienia).
UWAGA: Ciśnienie skurczowe w RV i tętnicy płucnej powyżej 40 (lub średnie ciśnienie tętnicze płucne powyżej 25) może być oznaką nadciśnienia płucnego spowodowanego infekcją płucną u zwierzęcia. Należy pamiętać, że nadciśnieniowa wentylacja mechaniczna może również zwiększać ciśnienie w tętnicach płucnych.
- Opróżnij balon i upewnij się, że dystalny port ciśnieniowy nadal znajduje się w głównej tętnicy płucnej. Do tej weryfikacji należy użyć zarówno fluoroskopii, jak i sygnału ciśnienia.