Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.
1. Przygotowanie modelu
- Dorosłego samca świni o wadze 50 kg należy umieścić w placówce opieki nad zwierzętami przez 1 tydzień przed operacją, aby zaaklimatyzować zwierzę do warunków w pomieszczeniach i opiekunów. Pościć model przez co najmniej 6 godzin przed rozpoczęciem znieczulenia.
- Znieczulenie modelu za pomocą domięśniowego wstrzyknięcia ketaminy (33 mg/kg), atropiny (0,04 mg/kg) i buprenorfiny (0,05 mg/kg) oraz wziewnego izofluranu (5%)9.
- Ustaw modelkę w pozycji leżącej na plecach i spryskaj struny głosowe lidokainą (1%), aby zapobiec skurczowi krtani. Wykonaj bezpośrednią intubację dotchawiczą za pomocą rurki dotchawiczej z mankietem 6,5 Fr. Potwierdź prawidłowe położenie rurki dotchawiczej za pomocą kapnografii.
- Wprowadzić kroplówkę 18G do żyły usznej brzeżnej i rozpocząć infuzję mleczanu Ringera w ilości 200 ml/h. Nałóż mdłą maść na oczy modelki, aby zapobiec wysuszeniu w znieczuleniu ogólnym.
- Monitoruj tętno i nasycenie tlenem modelu za pomocą pulsoksymetru umieszczonego na ogonie modelki. Wentylować model w zakresie 14 - 16 oddechów/min za pomocą wentylatora mechanicznego i objętości oddechowej 5 - 10 ml/kg. Utrzymuj odpowiednie znieczulenie, celując w minimalne stężenie izofluranu w pęcherzykach płucnych (MAC) między 2 a 2,5.
- Przed rozpoczęciem operacji należy potwierdzić odpowiednią głębokość znieczulenia, testując odruchy bólowe za pomocą uszczypnięcia palca tylnej nogi. Ponownie oceniaj odruchy bólowe w regularnych odstępach czasu podczas operacji.
2. Przygotowanie urządzenia
- Przygotować zapaloną sól fizjologiczną/bipolarną radiofrekwencję (SBRF; Rysunek 1) urządzenie zgodnie ze specyfikacją producenta.
- Otwórz rękojeść (bipolarna końcówka uszczelniająca 6.0) i podłącz ją do generatora.
- Ustaw natężenie przepływu soli fizjologicznej na Niskie. Użyj 0,9% soli fizjologicznej, aby uzyskać maksymalne przewodzenie energii.
- Ustaw moc częstotliwości radiowej na 160 W.
3. Operacja: Laparotomia
- Wykonaj długie, otwarte nacięcie laparotomii w linii środkowej za pomocą skalpela #10 rozciągającego się od mieczyka mieczykowatego do łonowego i przechodzącego przez wszystkie warstwy ściany brzucha.
- Ustal odpowiednią ekspozycję narządów stałych będących przedmiotem zainteresowania (np. wątroba, śledziona, nerki), zmobilizuj inne struktury i w razie potrzeby włóż retraktor.
nuta: Dla uproszczenia, wątroba będzie określana jako stały organ zainteresowania przez pozostałą część tego protokołu. Protokół ten będzie również obejmował tworzenie urazów o podobnym stopniu w obrębie nerki i śledziony.
4. Chirurgia: symulowane uszkodzenie narządów litych
UWAGA: Obrażenia opisane poniżej reprezentują pogarszającą się hierarchię urazów. Urazy są tworzone przez doświadczonego chirurga urazowego, a hemostaza zostanie uzyskana przez innego chirurga.
- Używając ostrza skalpela #10, przyłóż siłę ścierną (do przodu iz powrotem) na torebkę wątroby, aby wywołać krwawienie z torebki. Rana powinna być powierzchowna (tj. 1 - 2 mm) i mieć rozmiar 2cm2. Rozmiar urazu może być następnie zwiększany stopniowo o 1cm2 według uznania operatora.
- Twórz rany szarpane narządów o rosnącym nasileniu za pomocą bezpośredniego zastosowania skalpela. Długość rany szarpanej może sięgać od 5 cm do całej długości narządu. Głębokość rany szarpanej powinna wynosić 1 cm, a następnie zwiększać ją w krokach co 1 cm według uznania operatora.
- Twórz rany penetrujące za pomocą urządzenia, takiego jak zacisk Kelly'ego, używając ruchu kłującego. Mogą one mieć częściową grubość (tj. 50% narządu) lub pełną grubość (tj. całkowicie przechodzące przez narząd).
5. Hemostaza
- Wciśnij przycisk rękojeści, inicjując jednoczesny przepływ soli fizjologicznej i dostarczanie bipolarnej energii o częstotliwości radiowej. Sól fizjologiczna zagotuje się w miejscu aplikacji.
- Przyłóż końcówkę urządzenia bezpośrednio do surowej powierzchni wątroby, do powierzchownych obszarów krwawienia lub w obrębie wad samej wątroby. Nie dźgaj narządu efektorem końcowym.
- W razie potrzeby zastosuj jednoczesne odsysanie ze standardowego przyssawki chirurgicznej, aby dostarczyć podgrzaną sól fizjologiczną i energię bezpośrednio do obszarów trwającego krwotoku. Pomaga to również zwizualizować dokładną lokalizację trwającego krwotoku.
- Podgrzej tkanki do około 100 °C (koagulacja termiczna bez znacznego zwęglenia), wykonując delikatne ruchy w przód iw tył. Dźwiękowy "trzask" pojawi się po 3 - 5 sekundach i oznacza, że oparzenie zostało zakończone. Użytkownik może następnie przenieść instrument w zorganizowany sposób do następnej docelowej witryny.
- W razie potrzeby należy zastosować precyzyjnie ukierunkowaną elektrokoagulację wysokonapięciową w połączeniu z zastosowaniem SBRF i urządzeń ssących w celu uzyskania hemostazy. Może to być wymagane w przypadku największego i najbardziej energicznego krwotoku.
6. Uszczelnianie małych i średnich dróg żółciowych
- Stosując tę samą metodę, jak opisano powyżej, przyłóż końcówkę instrumentu w poprzek przeciętej/uszkodzonej krawędzi miąższu wątroby, aby uszczelnić małe i średnie drogi żółciowe.
