Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.
1. Wstawienie tętnicy szyjnej przez pobraną żyłę szyjną
- Zacznij od znieczulonego królika. Naciąć 50–60 mm odcinka szyjki macicy skalpelem chirurgicznym wzdłużnie. Tępo wypreparuj tkanki podskórne i powięź. Odsłoń odcinek 20–30 mm tętnicy szyjnej ipsilateralnej. Ostrożnie oddziel tętnicę od żyły i nerwu w pobliżu. Podwiązać wszystkie gałęzie odsłoniętej żyły za pomocą jedwabnego szwu 4-0.
- Heparynę sodową podawać dożylnie (200 j.m./kg). Odczekaj 3–4 minuty.
- Zacisnąć proksymalne i dystalne końce tętnicy za pomocą zacisków chirurgicznych. Przetnij tętnicę pośrodku, między zaciskami. Wstrzyknąć sól fizjologiczną zwykłą do naciętej tętnicy szyjnej proksymalnie i dystalnie, aby rozciągnąć tętnicę.
nuta: Tętnica szyjna królika ma tendencję do kurczenia się. Wybierz dobrze rozdęte miejsce jako miejsce zespolenia.
- Zespolenie pobranej żyły z tętnicą w odwrócony sposób od końca do końca.
- Wprowadzić cewnik dożylny o sile 20 G do pobranej żyły od dystalnego do bliższego, aby utrzymać otwarte światło żylne podczas zespolenia dystalnego.
- Zespolenie bliższego końca żyły z dystalnym końcem tętnicy za pomocą 8-0 Szwy przerywane polipropylenowe. Umieść dwa szwy kotwiące w miejscu i w przeciwległym miejscu. Dodaj szwy w górnej części linii zespolenia między szwami kotwiczącymi.
- Odwróć tętnicę i przeszczep żyły do góry nogami. Dodaj szwy na pozostałej części linii zespolenia.
- Usunąć cewnik dożylny z żyły. Zacisnąć przeszczep żyły proksymalnie i dystalnie odkleić tętnicę szyjną. Upewnij się, że przeszczep żyły rozszerza się stopniowo.
- Zespolenie dystalnego końca żyły z bliższym końcem tętnicy za pomocą 8-0 Szwy przerywane polipropylenowe. Odkleić tętnicę, aby sprawdzić krwawienie z miejsc zespolenia. W razie potrzeby dodać szwy do hemostazy.
nuta: Delikatne uciskanie miejsca krwawienia gazą i odczekanie może wystarczyć do hemostazy. Sprawdź natychmiastowe rozszerzanie się i silne pulsowanie przeszczepu żyły po bliższym odkleszczeniu. Jeśli nie zostanie to zaobserwowane, rozważ powtórzenie kroków 1.4.2 –1.4.3
- Podwiązywać tętnicę szyjną wewnętrzną za pomocą jedwabnego szwu 4-0, aby symulować zły stan odpływu i ułatwić przerost błony wewnętrznej.
- Oczyść ranę solą fizjologiczną. Zamknąć ranę za pomocą poliglaktyny 3-0 910, warstwa po warstwie.