Method Article

Technologia interferometrii biowarstw do wykrywania interakcji między ligandem a analitem

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Źródło: Desai, M., et al. Zastosowanie interferometrii biowarstwowej (BLI) do badania interakcji białko-białko w transkrypcji. J. Vis. Exp. (2019 rok)

W tym filmie demonstrujemy technologię interferometrii biowarstw (BLI) do wykrywania interakcji międzycząsteczkowych między ligandami a docelowymi analitami w czasie rzeczywistym. BLI mierzy zmiany we wzorze interferencji światła białego odbitego od warstwy unieruchomionych ligandów na powierzchni biosensora, gdy oddziałują one z analitami w roztworze.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Konfiguracja nawodnienia i testu biosensora

  1. Włącz maszynę BLItz.
  2. Upewnij się, że urządzenie jest podłączone do komputera przez port wyjściowy USB z tyłu urządzenia.
  3. Na komputerze otwórz powiązane oprogramowanie (np. BLItz Pro) i kliknij Advanced Kinetics po lewej stronie ekranu.
  4. W oprogramowaniu wpisz wszystkie odpowiednie informacje o eksperymencie (w tym nazwę eksperymentu, opis, identyfikator próbki i stężenie białka) pod każdym odpowiednim nagłówkiem.
  5. Kliknij Typ bioczujnika i wybierz Ni-NTA z menu rozwijanego.
    1. Pod nagłówkiem Ustawienia uru....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Nie stwierdzono konfliktu interesów.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Maszyna BLItzForteBio45-5000urządzenie
Zanurz i odczytaj tacę biosensora Ni-NTAForteBioNumer katalogowy: 18-5101Gotowe do użycia biosensory Ni-NTA do białek znakowanych poli-Hisem
Uchwyt na kroplęForteBioNumer telefonu 45-5004urządzenie
Probówki do PCR (0,2 ml)Thomas NaukowyCLS6571Wyroby z tworzyw sztucznych
Probówki do mikrowirówek (czarne)Thermo Fisher NaukowyNumer katalogowy: 03-391-166Wyroby z tworzyw sztucznych
Chusteczki KimwipesThermo Fisher Naukowy06-666AWyroby z tworzyw sztucznych
Naziemna telewizjaThermo Fisher NaukowyCzynnik R0861chemiczny
EdtaMiliporeSigmaE6758chemiczny
MgCl2MiliporeSigmaZobacz materiał M8266chemiczny
Zawartość NaClMiliporeSigmaNumer katalogowy S9888chemiczny
Tris-HClZłota biografiaT095100bufor
szt. cyfrowa powiedział: powiedział:

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Biolayer InterferometryLigand Analyte InteractionNi NTA BiosensorHistidine Tagged LigandWavelength Shift MeasurementAssociation Dissociation KineticsBLI Buffer SystemFiber Optic BiosensorBLItz InstrumentAdvanced Kinetics Software

Related Articles