Izolacja monocytów z krwi pełnej za pomocą negatywnej selekcji immunomagnetycznej

Streszczenie

Źródło: Plaisance-Bonstaff, K., et al. Izolacja, transfekcja i kultura pierwotnych ludzkich monocytów. J. Vis. Exp. (2019 rok)

W tym filmie pokazujemy izolację monocytów z pełnej krwi ludzkiej za pomocą immunomagnetycznej separacji ujemnej. Wyizolowane monocyty można wykorzystać do dalszej analizy.

Protokół

Wszystkie procedury z udziałem ludzi zostały przeprowadzone zgodnie z instytucjonalnymi, krajowymi i międzynarodowymi wytycznymi dotyczącymi dobrobytu ludzi i zostały sprawdzone przez lokalną komisję rewizyjną instytucji.

1. Izolacja pierwotnych monocytów człowieka metodą negatywnej selekcji immunologicznej

1. Zbierz 40 ml świeżej, ludzkiej krwi pełnej (od pacjenta z HIV⁺ lub zdrowej grupy kontrolnej) w czterech probówkach próżniowych z kwasem etylenodiaminotetraoctowym (EDTA) o pojemności 10 ml (10 ml krwi na probówkę). Stosując sterylne techniki pod kabiną bezpieczeństwa biologicznego, przenieś wszystk....

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
0,5 mln EDTA	Invitrogen	AM9260G
BD Vacutainer Plastikowe probówki do pobierania krwi z K2EDTA	BD Nauki biologiczne	366643
Magnes Easy 50 EasySep	Technologie komórek macierzystych	Numer katalogowy 18002
Łatwy w Sep bezpośredni zestaw do izolacji ludzkich monocytów	Technologie komórek macierzystych	Rocznik 19669
Pbs	Gibco (firma Gibco)	20012027
RPMI 1640 z L-glutaminą	Corning	10040CVMP