Synteza biofilmu in vitro przez Staphylococcus aureus

Streszczenie

Źródło: Rana, P. S. et al., Standaryzowane testy in vitro do wizualizacji i ilościowego określania interakcji między ludzkimi neutrofilami a biofilmami Staphylococcus aureus. J. Vis. Exp. (2022)

W tym filmie pokazujemy przygotowanie biofilmu in vitro przez S. aureus na wielodołkowej płytce pokrytej poli-L-lizyną. Płytka uformowana w biofilm może być wykorzystana do dalszych eksperymentów.

Protokół

1. Przygotowanie biofilmu in vitro

1. Uzyskać izolowane kolonie S. aureus z kriokonserwowanego materiału przy użyciu techniki smugowej płytki na bogatej w składniki odżywcze płycie agarowej, takiej jak agar sojowy tryptyczny (patrz tabela materiałów).
2. Pokryj poszczególne studzienki 96-dołkowej płytki 100 μl 0,001% (v/v) poli-L-lizyny (PLL) rozcieńczonej w sterylnym_H2Oi inkubuj w temperaturze pokojowej przez 30 minut. Aseptycznie odessać roztwór PLL za pomocą pułapki aspiracyjnej wspomaganej próżnią. Pozostaw studzienki do wyschnięcia na noc w temperaturze pokojowej.
   nuta:<....

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
BD Bacto Tryptyczny bulion sojowy	Bd	DF0370-07-5	Połącz z 1,5% agarem, aby uzyskać agar sojowy Tryptic
Przezroczyste 96-dołkowe płyty polistyrenowe z płaskim dnem	Costar	3370
Zrównoważony roztwór soli Hanksa (HBSS) 1x	Corning cellgro	21-022-CV	Bez wapnia, magnezu i czerwieni fenolowej
Roztwór poli-L-lizyny	Sigma	Zobacz materiał P4707-50ML
Białe, nieprzezroczyste płytki 96-dołkowe	sokół	353296	Hodowla tkankowa poddana działaniu i płytka z płaskim dnem
Minimalna ilość niezbędnych nośników (MEM) Alpha 1x	Gibco (firma Gibco)	Numer katalogowy: 41061-029

szt.