Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Synteza biofilmu in vitro przez Staphylococcus aureus

1.8K wyświetleń

8 lipca 2025

W tym artykule

Streszczenie

Źródło: Rana, P. S. et al., Standaryzowane testy in vitro do wizualizacji i ilościowego określania interakcji między ludzkimi neutrofilami a biofilmami Staphylococcus aureus. J. Vis. Exp. (2022)

W tym filmie pokazujemy przygotowanie biofilmu in vitro przez S. aureus na wielodołkowej płytce pokrytej poli-L-lizyną. Płytka uformowana w biofilm może być wykorzystana do dalszych eksperymentów.

Protokół

1. Przygotowanie biofilmu in vitro

  1. Uzyskać izolowane kolonie S. aureus z kriokonserwowanego materiału przy użyciu techniki smugowej płytki na bogatej w składniki odżywcze płycie agarowej, takiej jak agar sojowy tryptyczny (patrz tabela materiałów).
  2. Pokryj poszczególne studzienki 96-dołkowej płytki 100 μl 0,001% (v/v) poli-L-lizyny (PLL) rozcieńczonej w sterylnymH2Oi inkubuj w temperaturze pokojowej przez 30 minut. Aseptycznie odessać roztwór PLL za pomocą pułapki aspiracyjnej wspomaganej próżnią. Pozostaw studzienki do wyschnięcia na noc w temperaturze pokojowej.
    nuta:<....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Nie stwierdzono konfliktu interesów.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
BD Bacto Tryptyczny bulion sojowyBdDF0370-07-5Połącz z 1,5% agarem, aby uzyskać agar sojowy Tryptic
Przezroczyste 96-dołkowe płyty polistyrenowe z płaskim dnemCostar3370
Zrównoważony roztwór soli Hanksa (HBSS) 1xCorning cellgro21-022-CVBez wapnia, magnezu i czerwieni fenolowej
Roztwór poli-L-lizynySigmaZobacz materiał P4707-50ML
Białe, nieprzezroczyste płytki 96-dołkowesokół353296Hodowla tkankowa poddana działaniu i płytka z płaskim dnem
Minimalna ilość niezbędnych nośników (MEM) Alpha 1xGibco (firma Gibco)Numer katalogowy: 41061-029
szt.

Tagi

biofilm Staphylococcus aureuspow oka z poli L lizynytworzenie biofilmuprzyleganie bakteriimacierz zewn trzkom rkowatworzenie mikrokoloniidojrzewanie biofilmuusuwanie kom rek planktonicznychprzygotowanie biofilmu