Odpowiedź immunologiczna

Ten film demonstruje obrazowanie in vivo w celu zbadania dynamiki rekrutacji neutrofili w miejscu infekcji u transgenicznej myszy z obniżoną odpornością, z neutrofilami wykazującymi ekspresję GFP. Polega na wstrzyknięciu bakterii luminescencyjnych w celu wywołania infekcji. Prowadzi to do rekrutacji neutrofili do miejsca infekcji, których śledzenie odbywa się za pomocą obrazowania.

W tym filmie pokazujemy aktywację makrofagów pochodzących ze szpiku kostnego w odpowiedzi na bakteryjny lipopolisacharyd i dożylną immunoglobulinę.

Ten film pokazuje aktywację makrofagów otrzewnowych myszy za pomocą dożylnego podania immunoglobuliny i bakteryjnego lipopolisacharydu. Kostymulacja aktywuje makrofagi otrzewnowe w makrofagi przeciwzapalne o działaniu regulującym działanie immunologiczne.

Ten film demonstruje technikę ex vivo do wywoływania śmierci komórek mózgowych, w której pośredniczą cytotoksyczne limfocyty T CD8+. Po uzyskaniu wycinków mózgu, aktywowane limfocyty T CD8 + skierowane do oligodendrocytów są przenoszone na wycinki, aby celować w osłonkę mielinową i oligodendrocyty. Po inkubacji uszkodzenie mieliny i śmierć neuronów można ocenić histologicznie w obszarach zainteresowania.

W tym filmie opisujemy protokół testowania skuteczności bezkomórkowej szczepionki przeciw krztuścowi przeciwko zakażeniu Bordetella pertussis u myszy. Po szczepieniu myszy poddano infekcji, a ich homogenat tkankowy poddano hodowli w celu analizy kolonii bakteryjnych jako odczytu odporności ochronnej wywołanej szczepionką.

W tym filmie opisujemy metodę badania dynamiki organelli w limfocytach B po ich aktywacji za pomocą mikrogranulek pokrytych antygenem.

Ten film pokazuje aktywację limfocytów B in vitro. Proces ten obejmuje interakcję antygenu z receptorami komórek B, prowadzącą do przebudowy cytoszkieletu, tworzenia synaps immunologicznych, ruchu lizosomów, internalizacji antygenu, przetwarzania, a następnie prezentacji na cząsteczkach MHC w celu aktywacji komórek B.

Ten film demonstruje technikę generowania chemicznie wywołanego mysiego modelu zapalenia jelita grubego - choroby zapalnej jelit. Mysz może spożywać roztwór siarczanu sodu dekstranu (DSS) przez odpowiedni czas. Po spożyciu DSS uszkadza barierę warstwy śluzu i nabłonka w okrężnicy, umożliwiając drobnoustrojom jelitowym przedostanie się do leżącej poniżej tkanki – gdzie są wyczuwane przez rezydujące komórki odpornościowe, aby pośredniczyć w przesadnej odpowiedzi immunologicznej, powodując stan...

W tym filmie pokazujemy wpływ różnych stężeń przeciwciał anty-c-fms na osteoklastogenezę, która jest procesem powstawania osteoklastów z komórek progenitorowych osteoklastów.

Ten film demonstruje ilościowe określanie mediatorów stanu zapalnego podczas infekcji poprzez inkubację ludzkich komórek odpornościowych pochodzących z tkanki płucnej z Haemophilus influenzae. Cytometria przepływowa służy do pomiaru fluorescencji cytokin w znakowanych limfocytach, korelującej z produkcją cytokin prozapalnych w odpowiedzi na infekcję bakteryjną.

W tym filmie demonstrujemy test chemiluminescencji in vitro, który wykrywa wytwarzanie reaktywnych form tlenu przez neutrofile po wystawieniu na działanie opsonizowanego biofilmu bakteryjnego.

Ten film demonstruje test in vitro do badania interakcji neutrofil-biofilm. Bakterie chorobotwórcze osadzone w biofilmie i wyizolowanych neutrofilach oznaczono za pomocą znaczników fluorescencyjnych, a odpowiedź immunologiczną neutrofili i unikanie odpowiedzi immunologicznej przez bakterie oceniono za pomocą mikroskopu fluorescencyjnego.

Ten film demonstruje metodę wykrywania aktywacji inflamasomu NLRP3 w makrofagach za pomocą fluorescencyjnych sond reporterowych. Komórki są traktowane jonoforami potasu i glicyną w celu indukcji składania inflamasomu i aktywacji kaspazy-1. Fluorescencyjne sondy reporterowe wizualizują aktywowaną kaspazę-1, a komórki są barwione barwnikiem fluorescencyjnym w celu wizualizacji jąder.

Ten film demonstruje technikę badania tworzenia inflamasomu w pierwotnej makrofagach za pomocą immunofluorescencji receptorów podobnych do NOD, rodziny receptorów pirynowych, zawierających domenę 3 (NLRP3). Makrofagi są najpierw przygotowywane za pomocą bakteryjnego lipopolisacharydu (LPS) w celu zwiększenia ekspresji białka NLRP3. Wystawienie makrofagów na działanie nigerycyny - jonoforu potasu - prowadzi do aktywacji NLRP3 i powstania inflamasomów, które są wizualizowane za pomocą...

Ten film demonstruje test dehydrogenazy mleczanowej do wykrywania śmierci makrofagów za pośrednictwem inflamasomów. Makrofagi są poddawane działaniu lipopolisacharydu w celu pobudzenia, a następnie ekspozycji na nigerycynę w celu spowodowania śmierci komórek wywołanej inflamasomem, która jest określana przez test dehydrogenazy mleczanowej.

Ten film demonstruje indukcję i wizualizację zewnątrzkomórkowych pułapek neutrofili lub NET w wstępnie oznakowanych neutrofilach przy użyciu surowicy pacjenta zawierającej przeciwciała cytoplazmatyczne anty-neutrofilowe. Co więcej, zastosowanie nieprzepuszczalnego barwnika DNA i mikroskopii fluorescencyjnej umożliwia wizualizację NET.

Ten film demonstruje izolację lipidów od ludzkich neutrofili za pomocą dwufazowego systemu rozpuszczalnikowego z użyciem metanolu i chloroformu.

W tym filmie demonstrujemy test cytotoksyczności do oceny infekcji Cryptococcus neoformans, grzyba chorobotwórczego, u makrofagów. Cytotoksyczność jest określana przez uwalnianie enzymu cytoplazmatycznej dehydrogenazy mleczanowej w wyniku lizy makrofagów spowodowanej zakażeniem Cryptococcus neoformans.

Ten film demonstruje system infekcji oparty na wkładce membranowej, który pozwala ocenić wpływ wydzielanych toksyn bakteryjnych. Eliminując bezpośredni kontakt między patogenem bakteryjnym a komórkami gospodarza za pomocą przepuszczalnej membrany, technika ta pozwala na badanie wpływu toksyn wydzielanych przez bakterie chorobotwórcze na komórki gospodarza ssaków.

Ten film demonstruje system wkładów membranowych do badania wpływu toksyn bakteryjnych na komórki gospodarza w kontrolowany i izolowany sposób. Takie podejście pozwala na selektywną ekspozycję komórek na toksyny przy jednoczesnym zachowaniu fizycznej separacji, która naśladuje naturalną interakcję gospodarz-patogen.

Ten film demonstruje test przylegania bakterii do hodowli komórek nabłonkowych oznaczony GFP w celu zbadania dynamiki interakcji gospodarz-patogen za pomocą obrazowania opartego na mikroskopii fluorescencyjnej.

Ten film demonstruje technikę wykrywania lokalnej i globalnej reakcji jonów wapnia na zakażenie Shigella ludzkimi komórkami nabłonkowymi. Shigella atakuje komórki gospodarza i uwalnia efektory inwazji, wpływając na wewnątrzkomórkowy poziom wapnia. Amplitudę i częstość lokalnego i globalnego cytozolowego wapnia bada się za pomocą wskaźnika fluorescencyjnego.

Ten film analizuje tworzenie się synaps immunologicznych między limfocytami T w nieoczyszczonych preparatach pan-leukocytów a enterotoksyną B, komórkami Raji Staphylococcus aureus obciążonymi SEB. Wzbogacenie CD3 i F-aktyny obserwuje się w synapsie immunologicznej za pomocą obrazowej cytometrii przepływowej.

Ten film demonstruje test do badania regulacji fagocytozy makrofagów za pomocą mezenchymalnych komórek macierzystych (MSC) w kokulturze. Po jednoczesnej hodowli MSC z makrofagami, nieopsonizowane cząstki zymosanu sprzężone z fluoroforem wrażliwym na pH są dodawane w celu fagocytozy przez makrofagi. Wraz ze wzrostem fagocytozy wzrasta intensywność fluorescencji, co pozwala na określenie regulacji aktywności fagocytarnej za pośrednictwem MSC.

W tym filmie pokazujemy intracisternalne dostarczanie Neisseria meningitidis do modelu mysiego w celu wywołania infekcji zapalenia opon mózgowych.

W tym filmie opisujemy metodę identyfikacji małocząsteczkowych inhibitorów kinaz, które modulują apoptozę podwójnie dodatnich niedojrzałych tymocytów samoreaktywnych CD4+CD8+. Apoptoza jest indukowana w podwójnie dodatnich tymocytach poprzez aktywację ich za pomocą kulek magnetycznych pokrytych anty-CD3 i anty-CD28; Następnie przeprowadza się leczenie inhibitorami małocząsteczkowymi i analizę cytometrii przepływowej w celu wykrycia, czy inhibitory modulują ekspresję markera apoptotycznego.

W tym filmie opisujemy procedurę polegającą na wykonaniu nano-iniekcji jednoniciowego wirusa RNA o pozytywnym sensie do dorosłego samca muszki Drosophila, a następnie badaniu odpowiedzi przeciwwirusowych zainicjowanych w wyniku infekcji. Analiza reakcji łańcuchowej polimerazy identyfikuje regulację w górę określonych genów u zakażonych muszek, które wskazują na aktywację szlaków odpowiedzi immunologicznej, w tym interferencji RNA i sygnalizacji JAK/STAT.

Ten film demonstruje metodę barwienia hematoksyliny i eozyny (H&E) do oceny uszkodzenia jelita grubego w mysim modelu zapalenia jelita grubego wywołanego przez DSS - choroby zapalnej jelit. Po wyizolowaniu okrężnicy od myszy leczonej DSS i uzyskaniu skrawków tkanki, barwienie H&E skrawków pomaga zidentyfikować uszkodzenia tkanek spowodowane stanem zapalnym.

W tym filmie opisujemy metodologię tworzenia systemu hodowli narządów jelitowych ex vivo w celu zbadania interakcji między fragmentami tkanki jelitowej myszy a specyficznymi bakteriami jelitowymi. Urządzenie składa się z dwóch par portów wejścia-wyjścia, z których pierwszy łączy światło tkanki jelitowej i dostarcza do niej specyficzną zawiesinę bakteryjną, a drugi w sposób ciągły dostarcza pożywkę do studzienek urządzenia w celu utrzymania żywotności tkanek ex vivo.

Ten film demonstruje technikę in vitro do badania wpływu leczenia przeciwbakteryjnego na agregaty Pseudomonas aeruginosa (Pa). Znakowane fluorescencyjnie komórki Pa są hodowane jako agregaty, naśladując wzorzec wzrostu podczas infekcji. Po poddaniu skupiskom subletalnym stężeniem antybiotyku kolistyny, ocena interakcji bakteria-antybiotyk w czasie rzeczywistym jest przeprowadzana za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej.

Ten film demonstruje technikę kwantyfikacji in vitro w celu określenia zakażenia Listeria monocytogenes makrofagami za pomocą testu jednostki tworzącej kolonię. Kolonie bakteryjne na płytce agarowej reprezentują wewnątrzkomórkową populację bakterii, która wymyka się mechanizmowi obronnemu gospodarza i przeżywa w makrofagach.

W tym filmie określamy ilościowo wewnątrzkomórkową i zewnątrzkomórkową Listeria monocytogenes, wewnątrzkomórkową bakterię chorobotwórcze, po ich zakażeniu hodowanymi makrofagami in vitro za pomocą cytometrii przepływowej.

Ten film pokazuje nano-wstrzyknięcie zawiesiny bakteryjnej do jamy ciała muchy, co powoduje namnażanie się bakterii i infekcję. Odpowiedź immunologiczna muchy usuwa niektóre bakterie, podczas gdy inne uciekają przed klirensem immunologicznym i przeżywają w żywicielu, powodując infekcję.

Ten film demonstruje technikę infekowania Drosophila poprzez wprowadzenie bakterii chorobotwórczej bezpośrednio do ich jamy ciała. Metoda ta omija bariery nabłonkowe i inne pasywne mechanizmy obronne, pozwalając na indukcję infekcji ogólnoustrojowej. Po zakażeniu wynikającą z zakażenia odpowiedź immunologiczną ocenia się poprzez monitorowanie śmiertelności much i przeprowadzanie dalszych testów.

W tym filmie demonstrujemy technikę pomiaru obciążenia bakteriami E. coli po wstrzyknięciu E. coli do klatki piersiowej Drosophila melanogaster.

W tym filmie demonstrujemy test efektu cytopatycznego w celu określenia zakaźnej dawki wirusa Drosophila C w hodowli tkankowej na komórkach Drosophila S2*. Do zakażenia hodowanych komórek wykorzystuje się szereg stężeń wirusa. Określa się odsetek komórek wykazujących zmiany strukturalne, a dane te są wykorzystywane do obliczenia dawki infekcyjnej dla hodowli tkankowej.

Ten film demonstruje metodę wywoływania zapalenia powierzchni oka i dysfunkcji gruczołów Meiboma w modelu mysim. Stymulacja układu odpornościowego myszy za pomocą immunogenu, a następnie ponowna stymulacja tym samym immunogenem sprzyja zapaleniu powierzchni oka, które powoduje zatkanie wydzielania gruczołów Meiboma przez aggNET wytwarzane przez neutrofile i prowadzi do zespołu suchego oka.

Ten film pokazuje aktywację białek kaspazy u ludzkich makrofagów za pomocą białek reporterowych dwucząsteczkowej komplementacji fluorescencji. Prodomeny kaspazy-1 są połączone z niefluorescencyjnymi fragmentami białek Wenus, które są rekrutowane do kompleksów inflamasomowych. Bliskość inflamasomów indukuje ponowne fałdowanie i fluorescencję fragmentów Wenus, potwierdzając aktywację kaspazy w makrofagach.

Ten film pokazuje wpływ preparatów wyrobów tytoniowych, TPP, na produkcję cytokin z ludzkich komórek jednojądrzastych krwi obwodowej za pomocą cytometrii przepływowej. Leczenie komórek TPP obniża produkcję cytokin prozapalnych, którą szacuje się po stymulacji lipopolisacharydami, a następnie barwieniu immunologicznym i analizie cytometrii przepływowej.

W tym filmie pokazujemy przygotowanie biofilmu in vitro przez S. aureus na wielodołkowej płytce pokrytej poli-L-lizyną. Płytka uformowana w biofilm może być wykorzystana do dalszych eksperymentów.

Ten film demonstruje technikę in vitro do stymulacji limfocytów za pomocą nietypizowanego Haemophilus influenzae (NTHi) i oceny odpowiedzi immunologicznej. Inkubacja izolowanych komórek jednojądrzastych krwi obwodowej (PBMC) z NTHi powoduje, że komórki bakteryjne stymulują limfocyty T, co prowadzi do produkcji cytokin. Po zahamowaniu wydzielania cytokin przeprowadza się barwienie immunofluorescencyjne w celu wykrycia nagromadzonych cytokin wewnątrzkomórkowych w stymulowanych limfocytach T.

Ten film pokazuje ocenę chemicznie wywołanego zapalenia jelita grubego poprzez immunohistochemiczne barwienie tkanki okrężnicy myszy. W wycinku wybarwionej tkanki obecność dużej liczby komórek reagujących immunologicznie w uszkodzonej tkance reprezentuje infiltrację komórek odpornościowych podczas zapalenia jelita grubego.

W tym filmie badamy wpływ całego medium kondycjonowanego dymem, preparatu palnego tytoniu, na zabijanie komórek K562 przez efektorowe komórki jednojądrzaste krwi obwodowej.

Ten film demonstruje technikę in vivo oceny testowego antygenu poprzez wywoływanie stanu zapalnego skóry w modelu mysim. Antygen testowy - hapten w roztworze oleju / acetonu - jest miejscowo nakładany na skórę ucha myszy, a stan zapalny skóry ocenia się po odpowiednim czasie.

Ten film demonstruje procedurę biopsji ciosu w celu stworzenia precyzyjnej rany w modelu mysim. Wycięcie odsłania podskórną warstwę skóry, zapewniając odpowiednie miejsce do badania odpowiedzi immunologicznej na zlokalizowane zakażenie patogenem.