Kwantyfikacja poziomów mediatorów immunologicznych w płynie z błony śluzowej człowieka

Streszczenie

Źródło: Wolsk, H. M. et al., Nieinwazyjne pobieranie próbek płynu z błony śluzowej w celu ilościowego określenia poziomów mediatorów immunologicznych górnych dróg oddechowych in vivo.J. Vis. Exp. (2017)

Ten film pokazuje ilościowe określenie poziomów mediatorów immunologicznych w ekstrakcie z błony śluzowej nosa u noworodków. System testów multipleksowych oparty na elektrochemiluminescencji mierzy te mediatory, oceniając intensywność emitowanego światła, gdy są one wzbudzone.

Protokół

Wszystkie procedury związane z pobieraniem próbek zostały przeprowadzone zgodnie z wytycznymi instytutu IRB.

1. Konfiguracja eksperymentalna

1. Stosować arkusze bibuły filtracyjnej (włókniste arkusze hydroksylowanego poliestru, patrz Tabela materiałów).
   1. Wytnij paski o wymiarach 3 x 15 mm dla 1-miesięcznego dziecka i w kształcie litery L dla starszych dzieci i dorosłych (5 x 20 x 10 mm (krótkie ramię L)).
2. Włóż jeden kawałek bibuły filtracyjnej do każdego nozdrza niemowlęcia za pomocą kleszczy. Umieść bibułę filtracyjną w przedniej części małżowiny usznej dolnej (o....

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Włókniste hydroksylowane arkusze poliestrowe	Accuwik Ultra	SPR0730	Bibuła filtracyjna
Bufor testowy Milliplex	Milipory	L-AB	bufor
płytki magazynujące o niskiej zawartości wiązań białkowych	Thermo Scientific	CLS8161	Płyty
Inhibitor proteazy	Roche	11873580001	Kompletny koktajl inhibitorów proteazy wolny od EDTA
Czytnik płytek wielopunktowych	Mezoskala	nie	Kamera sektorowa 6000
Testy	Mezoskala		Ludzki test cytokin 10-plex TH1 / TH2 i test chemokin 9-plex oraz pojedynczy pleks IL-17A, TGF-β1 i TSLP. Opis można znaleźć w Internecie na stronie www.mesoscale.com