Ocena skuteczności przeciwnowotworowej bakteryjnego białka immunomodulującego w modelu mysim

Streszczenie

Źródło: Codolo, G. et al. Ocena skuteczności białka H. pylori HP-NAP jako narzędzia terapeutycznego w leczeniu raka pęcherza moczowego w ortotopowym modelu myszy.J. Vis. Exp. (2015)

Ten film demonstruje technikę oceny przeciwnowotworowej aktywności białka aktywującego neutrofile Helicobacter pylori (HP-NAP) w modelu raka pęcherza moczowego u myszy. HP-NAP oddziałuje z neutrofilami nowotworowymi w celu wytworzenia cytokin prozapalnych, indukując różnicowanie naiwnych limfocytów T w fenotypy limfocytów T pomocniczych typu 1 (Th1) i cytotoksycznych (Tc1) typu 1. Komórki Th1 i Tc1 wydzielają interferon-gamma, hamując angiogenezę guza i promując niszczenie guza za pośrednictwem cytotoksycznych limfocytów T, zmniejszając objętość guza.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Zwierzęta

1. Hoduj samice myszy C57BL6/J do 8 tygodnia życia w indywidualnie wentylowanych klatkach z filtrami mikroizolacyjnymi.
   UWAGA: Preferowane są kobiety, ponieważ anatomiczna budowa ich zewnętrznego aparatu moczowo-płciowego sprawia, że cewnikowanie jest łatwiejsze niż u mężczyzn.

2. Hodowla komórkowa

1. Utrzymuj linię komórkową raka urotelialnego myszy....

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Samice myszy C57BL/6J	Harlan Italy (Udine, Włochy)
Ogniwa MB49			Uzyskane od prof. O'Donnela, University of Iowa Carver College of Medicine, Iowa, USA
Prędkość obrotowa	Sigma-Aldrich (St. Louis, Missouri, Stany Zjednoczone)	Czynnik R8758
FBS (Sieć Usługowa	Sigma-Aldrich	F7524
Pbs	Sigma-Aldrich	Zobacz materiał D1408	10X, do rozcieńczenia w wodzie apirogennej
kolba	Becton Dickinson (Franklin Lakes, New Jersey, Stany Zjednoczone)	353135
Strzykawka 1ml	Becton Dickinson	301358
trypsyna	Life Technologies (Waltham, Massachusetts, Stany Zjednoczone)
Gentamycyna	Technologie życiowe	Numer katalogowy: 15710-049
Xilor powiedział:	Bio 98 s.r.l. (Mediolan, Włochy)		2% ksylazyna
Zoletil powiedział:	Virbac (Carros, Francja)	3.59713E+11	5% Zolazepamu + 5% Tiletamina
Cewnik 24G	Terumo (Rzym, Włochy)	SR+DM2419PX
Hcl	Carlo Erba Reagents (Mediolan, Włochy)	403871	ciecz
NaOH	JT Baker (Center Valley, Pensylwania, Stany Zjednoczone)	10095011	proszek

powiedział: powiedział: powiedział: