Method Article

Opracowanie zmodyfikowanego modelu 3D spolaryzowanej tkanki nerwowej na bazie jedwabiu

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Źródło: Chwalek, K. et al., Engineered 3D Silk-collagen-based Model of Polarized Neural Tissue.J. Vis. Exp. (2015).

Ten film prezentuje tworzenie 3D spolaryzowanego modelu tkanki nerwowej z wykorzystaniem rusztowań jedwabno-kolagenowych. Szczegółowo opisuje proces wysiewania komórek neuronalnych na porowatych rusztowaniach z jedwabiu, inkubacji w celu przyczepienia komórek, osadzania rusztowania kolagenem i podkreśla znaczenie wspierającej macierzy kolagenowej w tworzeniu spolaryzowanego modelu tkanki nerwowej 3D.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie procedury związane z pobieraniem próbek zostały przeprowadzone zgodnie z wytycznymi instytutu IRB.

1. Przygotowanie rusztowania jedwabnego

  1. Przygotowanie roztworu jedwabiu z kokonów Bombyx mori
    1. Pokrój każdy kokon na 8 równych kawałków za pomocą nożyczek. Użyj około 11 kokonów na 5 g rozdrobnionych kokonów. (Czas trwania: 15 min)
    2. Przygotować 2 l roztworu 0,02 M Na2CO3 i zagotować na płycie grzejnej. (Czas trwania: 15 min)
    3. Odważyć 5 g rozdrobnionych kokonów i gotować je w roztworze Na2CO3 przez 30 min. Mieszaj wrzący je....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Rysunek 1. Forma PTFE używana do przygotowania rusztowań z gąbki jedwabnej. Wymiary: średnica 10 cm, wysokość 2 cm.

figure-results-2
Rysunek 2. 3D model tkanki przypominającej mózg. (A) Porowate rusztowanie z jedwabnej gąbki. (B) Żywe/martwe barwien.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Nie stwierdzono konfliktu interesów.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Wirówka 5804 REppendorf
poli-D-lizynaSigma-AldrichZobacz materiał P6407-5MGstężenie końcowe 10 μg/ml rozpuszczone w wodzie
Podłoże nerwowo-podstawoweGibco (firma Gibco)21103049przed użyciem podgrzać do 37 °C
B27 suplement 50xGibco (firma Gibco)Numer katalogowy: 17504-044
Glutamax (Glutamax)Gibco (firma Gibco)Numer telefonu 35050-061
Penicilina StreptomycynaCorning30-002-CI
Kolagen I, ogon szczura, 100 mgCorning354236stężenie końcowe 3 mg/ml
NaOHSigma-AldrichZobacz materiał S2770
PbsSigma-AldrichD1283-500ML
Na2CO3Sigma-AldrichNumer katalogowy: 223530
LiBr (Biblioteka LiBrSigma-Aldrich213225
Kasety dializacyjne MWCO 3500Rybak termicznyNumer katalogowy: 66110
Płyta grzewczaFisher NaukowyIzotemp
sitoFisher NaukowyNr 270, Nr 35, Nr 30
Ptfeforma wykonana we własnym zakresie (Rysunek 1) Średnica 10 cm, wysokość 2 cm
Zawartość NaClSigma-AldrichNumer telefonu 71382
Dziurkacz do biopsji 5 mmŚwiatowy instrument precyzyjny501909
Dziurkacz do biopsji 2 mmŚwiatowy instrument precyzyjny501908
trypsynaSigma-Aldrich T4049-500ML
Strefa DNazaRoche10104159001Stężenie końcowe 0,3%
Białko sojoweSigma-AldrichT6522-100MGstężenie końcowe 1 mg/ml
powiedział: powiedział: )

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Silk Collagen ScaffoldNeuronal Cell SeedingCollagen Polymerization3D Neural Tissue ModelPolarized Neural TissueCell AttachmentAxonal Network FormationPorous Silk ScaffoldRat Cortical NeuronsNeurobasal Medium

Related Articles