Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
1K wyświetleń
⸱
8 lipca 2025
Źródło: Krefft, O. et al., Generation of Standaryzowane i odtwarzalne organoidy mózgowe typu przodomózgowia z ludzkich indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych. J. Vis. Exp. (2018).
Ten film przedstawia tworzenie organoidów typu przodomózgowia z ludzkich indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych (iPSC), demonstrując postęp od agregatów komórek macierzystych do złożonych struktur, które naśladują korę mózgu i różnicują się w różne typy neuronów.
1. Generowanie agregatów iPSC
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| A83-01 | StemGent | 130-106-274 | 500 nM |
| Suplement B27 | Gibco (firma Gibco) | Numer katalogowy: 17504-044 | od 1 do 100 |
| Ekstrakt z błony podstawnej (np. Geltrex) | Gibco (firma Gibco) | A14132-02 | |
| Cykliczny monofosforan adenozyny (cAMP) | Sigma-Aldrich | A9501 | 0,15 μg/ml |
| Odczynnik do dysocjacji komórek (TrypLE Express) | Gibco (firma Gibco) | 12605028 | |
| Komora licząca, np. Fuchs-Rosenthal | Karl Hecht | 40449001 | |
| D-glukoza | Carla Rotha | HN06.3 | 0,2 mg/ml |
| DMEM-F12 L-Glutamina | Gibco (firma Gibco) | 11320033 | |
| Formy do zatapiania (Tissue-Tek Cryomold) | Sakura Finetek | Numer katalogowy: 4565 | |
| Kwas etylenodiaminotetraoctowy | Sigma-Aldrich | E6511 | 0,5 mM |
| Żelantyna | Sigma-Aldrich | Klasa g1890 | |
| heparyna | Sigma-Aldrich | Zobacz materiał H3149-25KU | 10 μg/ml |
| Inhibitor odpowiedzi WNT (IWR-1) | Enzo Nauki przyrodnicze | BML-WN103-0005 | 10 μg/ml |
| insulina | Sigma-Aldrich | Zobacz materiał 91077C | 2,5 μg/ml |
| L-alanyl-L-glutamina (GlutaMax) | Gibco (firma Gibco) | 35050038 | 1 proc |
| Talerze o niskiej przyczepności 6 cm | Szpital Labomedic | 2081646L | |
| Płytki o niskiej przyczepności 10 cm | Szpital Labomedic | Numer katalogowy: 2081646O | |
| Numer identyfikacyjny LDN-193189 | Miltenyi Biotec | 130-104-171 | 180 nM |
| Suplement N2 | Gibco (firma Gibco) | Numer katalogowy: 17502-048 | od 1 do 200 |
| Aminokwasy endogenne | Gibco (firma Gibco) | 11140035 | 0,50% |
| Paraformaldehyd | Sigma-Aldrich | Zobacz materiał P6148 | 4,00% |
| Solanka fizjologiczna buforowana fosforanami (PBS) | Gibco (firma Gibco) | 14190144 | |
| Folia parafinowa z tworzywa sztucznego (Parafilm) | MARKA GMBH + CO KG | 701606 | |
| Inhibitor ROCK Y-27632 | Systemy naprowadzania komórek | Zobacz materiał SM02-100 | 5 μM lub 50 μM |
| sacharoza | Sigma-Aldrich | Zobacz materiał S7903 | |
| Probówki 15 ml | Nauki przyrodnicze Corning | Nr kat. 734-0451 | |
| Szkiełka mikroskopowe, np. szkiełka mikroskopowe Superfrost Plus | Thermo Scientific | 4951PLUS4 | |
| Kultura tkankowa na płytce 6-dołkowej | sokół | Nr kat. 734-0019 | |
| Hodowla tkankowa na płytce 24-dołkowej | sokół | Nr kat. 734-0949 | |
| Niebieska plama trypana | Gibco (firma Gibco) | Numer katalogowy: 15250-061 | |
| Płytka z powłoką lipidową A-U96 o bardzo niskim poziomie wiązania 96 dołków | Amsbio powiedział: | AMS.51011610 |
