Przygotowanie plastrów kollicyczno-wzgórzowo-korowych z mózgu szczeniaka myszy

W tym artykule

Streszczenie

Źródło: Slater, B. J., et al., Modyfikacja kolkulo-wzgórzowo-korowego wycinka mózgu myszy, obejmująca druk 3D elementów komory i wieloskalowe obrazowanie optyczne. J. Vis. Exp. (2015)

Film pokazuje przygotowanie kolikulo-wzgórzowo-korowych wycinków mózgu z mózgów mysich szczeniąt. Izolowany mózg jest ustawiany na zaznaczonym slajdzie i cięty pod kątem, aby wyrównać słuchowe śródmózgowie i przodomózgowie w tej samej płaszczyźnie. Mózg jest następnie krojony za pomocą wibratomu, a wycinki zawierające główne struktury słuchowe śródmózgowia i przodomózgowie są przenoszone do komory przetrzymywania w celu konserwacji.

Protokół

Wszystkie procedury związane z pobieraniem próbek zostały przeprowadzone zgodnie z wytycznymi instytutu IRB.

1. Przygotowanie i usunięcie mózgu myszy do krojenia

Przygotuj się do inkubacji perfuzji i plastrów.
1. Około 30 minut przed krojeniem należy przygotować roztwór do cięcia o wysokiej zawartości sacharozy i sztuczny płyn mózgowo-rdzeniowy o niskiej zawartości wapnia (aCSF) do inkubacji plastra przed zapisem lub obrazowaniem.
2. Rozłóż wszystkie niezbędne narzędzia (duże nożyczki z końcem, małe nożyczki sprężynowe, kleszcze anatomiczne, duże nożyczki lub gilotyna, nożyczki do tęczówki, kles....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

figure-results-1
Rysunek 1. Obrazowanie autofluorescencyjne flawoprotein kolikulo-wzgórzowo-korowego wycinka mózgu.(A) Połączony wycinek mózgu kolikulo-wzgórzowo-korowy, potwierdzony przez autofluorescencję flawoprotein. Stymulacja elektryczna przy 0,05 Hz IC zobrazowana przy 4 Hz i przetworzona metodą Fouriera w celu pokazania mocy przy częstotliwości stymulacji. Zwróć uwagę na aktywację MGB, ją.......