| Ciężki sprzęt | | | |
|---|
| stół wibracyjny z klatką Faradaya | TMC (Międzynarodowa Organizacja T | SERIA 63-500 | wymagane: izoluje system rejestrujący od drgań indukowanych przez otoczenie (ruchy eksperymentatora, wibracje urządzeń, takich jak wentylatory do chłodzenia komputerów itp.); może być również zakupiony z klatką Faradaya lub wyposażony w specjalnie wykonaną klatkę Faradaya; klatka ta jest zalecana, aby uniknąć hałasu elektrycznego z otoczenia |
|---|
| optyka | | | |
|---|
| mikroskop | Olympus | BX51WI | mikrokopa pionowa wyposażona w epifluorescencję; stolik stały lub ruchomy w zależności od preferencji użytkownika |
|---|
| Cele | Olympus | LUMPLFL40XW | wymagane są co najmniej 2 obiektywy: 4X lub 10X do zgrubnego podejścia do celi oraz 40-krotne zanurzenie na dużą odległość Olympus LUMPLFL40XW / IR /0,8 / WD:3,3 MM |
|---|
| Lupa | Olympus | U-TVCAC | BEZWZGLĘDNIE WYMAGANE: umieszczony na drodze światła między obiektywem a kamerą; pozwala na powiększenie obrazu na ekranie w celu precyzyjnego dotarcia do pokrętła z elektrodą rejestrującą |
|---|
| kamera | Olympus | Zobacz materiał DP72 | Dobra kamera jest potrzebna, aby zobaczyć neurony we fluorescencji, jak również w jasnym polu; oprogramowanie sterujące jest proste i pozwala na robienie zdjęć i wykonywanie obrazu z kamery na żywo w celu monitorowania zbliżania się elektrody do komórki. Ultraczuły aparat fotograficzny nie jest konieczny |
|---|
| Filtry | Olimp/Barwa | | w zależności od białka fluorescencyjnego zastosowanego u myszy; przykład dla GFP: wzbudzenie: BP460-490: emisja: HQ530/50m |
|---|
| Elektrody/system rejestrujący | | | |
|---|
| wzmacniacz | HEKA powiedział: | EPC10 USB | monitoruje prądy przepływające przez elektrodę rejestrującą, a także kontroluje zaciąganie się, wysyłając sygnał TTL do spritzera; konfiguracja EPC10 to
sterowany komputerowo |
|---|
| oprogramowanie | HEKA powiedział: | Mistrz Łat | steruje wzmacniaczem podczas eksperymentu |
|---|
| mikromanipulator | Sutter | Odtwarzacz MP225 | precyzyjny mikromanipulator, umożliwia precyzyjne ruchy z dokładnością do 1/10 mikrometra; ten model jest bardzo stabilny; unikaj manipulatorów hydraulicznych, które mogą dryfować |
|---|
| ściągacz elektrod | Sutter | Zobacz materiał P97 | z włóknem FT345-B o szerokości rynny; do przygotowania pipet rejestrujących o średnicy około 2 μm z długą końcówką docierającą do komórek; rezystancja powinna wynosić od 15 do 20 Mohm z perforowanym roztworem zacisku krosowego |
|---|
| szkło | Sutter | Zobacz materiał BF120-69-10 Zobacz materiał BF120-69-10 | W naszych warunkach nagrywania szkło to jest idealne do nagrywania pipet |
|---|
| komora nagraniowa | Instrumenty Warnera | RC-26G | Do ustawienia preparatu pod mikroskopem potrzebna jest komora. Aby utrzymać preparat w środku komory, należy użyć siatki/kotwy. |
|---|
| stymulacja | | | |
|---|
| szkło | Wskaźnik WPI | TW100F-4 | Pipety te, połączone w grupy po 7 sztuk, służą do przygotowania wstępnie naciągniętych pipet stymulujących |
|---|
| ściągacz wielolufowy | Mdi | PMP-107-Z | Dzięki połączeniu ciągnięcia i skręcania, ściągacz ten pozwala nam przygotować elektrody dmuchające z 7 beczkami |
|---|
| precyzyjny wtryskiwacz ciśnieniowy | Firma Toohey | P/N T25-1-900 Pojedynczy kanał | ten precyzyjny wtryskiwacz ciśnienia kontroluje ciśnienie wyrzucane w ściągaczu wielolufowym; jest sterowany ręcznie lub przez wzmacniacz za pomocą 5V TTLs |
|---|
| mikromanipulator | Narishige powiedział: | TY-1 | Wystarczy zgrubny manipulator, aby zbliżyć elektrodę zaciągającą się do miejsca nagrania |
|---|
| Rurki | | | |
|---|
| roztwory/perfuzja/chemikalia | | | |
|---|
| pompa próżniowa | Gardner Denver | | |
|---|
| system perfuzyjny | N/a | N/a | |
|---|
| Nystatyna | Sigma-Aldrich | Nr kat. N3503 | Obowiązkowe wykonanie roztworu wewnętrznego dla perforowanego zacisku krosowego |
|---|
| Dimetylosulfotlenek | Sigma-Aldrich | Zobacz materiał D5879 | Służy do rozpuszczania nystatyny do roztworu wewnętrznego do łaty perforowanej |
|---|
| chlorek sodu | Sigma-Aldrich | Zobacz materiał S9625 | Roztwór zewnątrzkomórkowy |
|---|
| Chlorek potasu | Sigma-Aldrich | Zobacz materiał P4504 | Roztwór wewnątrzkomórkowy/zewnątrzkomórkowy |
|---|
| Chlorek wapnia dwuwodny | Sigma-Aldrich | Zobacz materiał C7902 | Roztwór zewnątrzkomórkowy |
|---|
| Sodu fosforan jednozasadowy jednowodny (NaH2PO4) | Sigma-Aldrich | Zobacz materiał S9638 | Roztwór zewnątrzkomórkowy |
|---|
| Siarczan magnezu siedmiowodny (MgSO4,7H2O) | Sigma-Aldrich | Numer katalogowy: 63140 | Roztwór zewnątrzkomórkowy |
|---|
| glukoza | Sigma-Aldrich | Kontroler G8270 | Roztwór zewnątrzkomórkowy |
|---|
| Wodorowęglan sodu | Sigma-Aldrich | Zobacz materiał S6297 | Roztwór zewnątrzkomórkowy |
|---|
| EGTA (Kwas bis(2-aminoetyloetero)-glikolu etylenowego-N,N′,N′-tetraoctowego) | Sigma-Aldrich | E3889 | Rozwiązanie wewnętrzne |
|---|
| Hydroksyd potasu | Sigma-Aldrich | Zobacz materiał P1767 | Rozwiązanie wewnętrzne |
|---|
| Sulftlenek metylu | Sigma-Aldrich | W387509 | roztwór wewnątrzkomórkowy |
|---|
| Hepes-Na | Sigma-Aldrich | Zobacz materiał H7006 | roztwór wewnątrzkomórkowy |
|---|
| sacharoza | Sigma-Aldrich | S0389 | roztwór wewnątrzkomórkowy |
|---|
