Modulacja synaptyczna u Drosophila po ekspozycji na długotrwałe światło

Streszczenie

Źródło: Sugie, A., et al. Analiza modulacji synaptycznej fotoreceptorów Drosophila melanogaster po ekspozycji na długotrwałe światło. J. Vis. Exp. (120)

Ten film pokazuje hodowlę Drosophila melanogaster w określonych warunkach oświetleniowych, aby zbadać rolę białek Bruchpilot w uwalnianiu neuroprzekaźników i wynikającej z tego modulacji aktywności synaptycznej.

Protokół

1. Warunki ekspozycji na światło

1. Od stadium larwy do eklacji należy utrzymywać muchy w cyklu 12 godzin światła/12 godzin ciemności (LD) w temperaturze 25 °C (ryc. 1A).
2. Zbierz muchy 0 - 6 godzin po eklozji i umieść je w nowej fiolce zawierającej pokarm dla much.
3. Umieść fiolki w przezroczystym stojaku na żywicę akrylową w trzech stopniach (wysokość 41 cm, podstawa 21 cm, grubość 4 cm i wysokość 13 cm dla każdego stopnia) (Rysunek 1B).
4. Dostosuj odległość między szafą rack a panelem LED, aby zapewnić oświetlenie o średnim natężeniu 1 000 luksów za pomocą cyfrowego światłomierza (rysunek 1C).
5. Muchy należy trzymać przez 1–3 dni w jednym z następujących warunków: stała ciemność (DD), 12 godzin światła/12 godzin cyklu ciemności (LD) lub stałe światło (LL) w temperaturze 25 °C w małym inkubatorze (rysunki 1A i 1C).

Wyniki

Rysunek 1: Przygotowanie warunków do ekspozycji na światło o określonym natężeniu. (A) Protokoły ekspozycji na światło po ekluzji. DD, ciągła ciemność; LD, 12 h jasny/12 h ciemny; LL, stała ekspozycja na światło. Mózgi much zostały wypreparowane w czasie wskazanym w nawiasach (Adaptacja z poprzedniej publikacji9). (B) Fiolki są wyrównane w niestandardowym akrylowym przezroczystym stojaku. (C) Akrylo...

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
fiolka	Hightech, Japonia	MKC-20
wtyczka	Thermo Fisher Sciehtific, Stany Zjednoczone	Zobacz materiał AS-275
Dostosowany przezroczysty stojak wykonany z żywicy akrylowej	Shin-Shin Corporation, Japonia		wysokość 41 cm, podstawa 21 cm, grubość 4 cm i wysokość 13 cm dla każdego stopnia
Fajny inkubator	MITSUBISHI ELECTRIC, Japonia	CN-40A
Panel LED	MISUMI, Japonia	LEDXC170-W
Cyfrowy światłomierz	CEM (Organizacja Gospodarcza	Zobacz materiał DT-1301
Podkładka pod muchy	Tokken, Japonia	TK-HA03-S