$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.
1. Wprowadzenie matrycy elektrod implantu ślimakowego (CI)
UWAGA: Układ elektrod wewnątrzślimakowych składa się z czterech platynowych pasm (Ø0,2 mm) z drutem izolowanym platynowo-irydowym parylenem ekranowanym w silikonowej rurce (Rysunek 1).
- Umieść narzędzie zwijacza w nacięciu, aby ponownie uzyskać dostęp do pęcherza.
- Włóż matrycę elektrod do okrągłego okienka (scala tympani) na głębokość, na której 4. platynowy pierścień znajduje się tuż wewnątrz okrągłego okienka. Daje to głębokość wstrzyknięcia ~2 mm, co odpowiada położeniu wewnątrzślimakowemu przy ~30 kHz.
- Zwiń drut ołowiany wewnątrz bulli i przyklej drut do tkanki nad bullą. Zwijanie drutu pomaga utrzymać matrycę na miejscu przez cały czas trwania eksperymentu.
- Ostrożnie wyjmij retraktor i zamknij wkłucie klejem tkankowym.
- Wykonaj małe nacięcie (0,5 mm) w szyi prostopadłe do linii między miejscem, w którym będą znajdować się elektrody aktywnej i referencyjnej odpowiedzi słuchowej pnia mózgu (ABR), używając nożyczek do tkanek. Umieść platynową kulkę mieloną w kieszeni podskórnej i zamknij małe nacięcie klejem tkankowym (ryc. 2).
- Podłącz płytkę matrycy elektrod do platformy stymulatora zwierząt (ASP).
2. Elektryczna słuchowa odpowiedź pnia mózgu (eABR)
UWAGA: Platforma stymulatora dla zwierząt służy do elektrycznej stymulacji układu elektrod. Można korzystać z innych źródeł prądu i systemów oprogramowania.
- Oczyść elektrody ABR 70% roztworem etanolu. Umieść elektrody pod skórą: aktywne (Ch1) na wierzchołku, referencyjne (-) poniżej małżowiny usznej ucha ipsilateralnego i uziemione w tylnej nodze (ryc. 2).
- Otwórz oprogramowanie ASP i zdefiniuj paradygmat stymulacji impulsami elektrycznymi. Używamy impulsu dwufazowego o zrównoważonym ładunku z 50 μs/fazę i przerwą międzyfazową 10 μs prezentowaną na poziomie 23,3 impulsów na sekundę (pps). Stymulacja elektryczna jest dostarczana w konfiguracji elektrod monopolarnych o rosnącym natężeniu prądu. Na każdym bieżącym poziomie uśrednianych jest łącznie 400 odpowiedzi.
- Przedstaw elektryczne ciągi impulsów i nagrywaj wywołaną odpowiedź eABR w sposób ciągły za pomocą stacji czołowej, przedwzmacniacza i procesora słuchowego Tucker Davis Technologies (TDT).
- Wykreśl i przeanalizuj dane eABR za pomocą niestandardowego skryptu Matlab (Rysunek 3). Scenariusz i przykład nagrania znajdują się w Suplemencie.
