Ocena wpływu toksyn na rozwój sieci neuronowej zarodka pisklęcia przy użyciu układów wieloelektrodowych

1. Rejestrowanie aktywności sieci neuronalnej

1. W dniu pozyskania należy wymienić pożywkę hodowlaną na świeżą pożywkę neurobazalną i umieścić MEA w inkubatorze CO₂ przez co najmniej 2 godziny przed rejestracją. Uruchom oprogramowanie do nagrywania i ustaw temperaturę MEA na 37 °C, klikając ikonę temperatury.
   nuta: Nagrywanie może rozpocząć się już w 3 dniu powlekania i może trwać tak długo, jak długo kultury są żywe.
2. Ustaw parametry akwizycji, klikając prawym przyciskiem myszy ikonę "Muse" (w sekcji Strumienie w lewym panelu okna) i wybierz "Dodaj przetwarzanie" i "Detektor szczytów", a następnie kliknij OK w wyskakującym okienku. "Detektor kolców (6 x STD)" pojawi się pod nazwą pliku.
3. Następnie kliknij prawym przyciskiem myszy Spike Detector, wybierz "Dodaj przetwarzanie" i "Burst Detector", a następnie kliknij OK w wyskakującym okienku. "Burst Detector" (ISI) pojawi się pod ikoną Muse.
4. Następnie kliknij prawym przyciskiem myszy Burst Detector, wybierz "Dodaj przetwarzanie" i "Kompilator statystyk neuronowych". W wyskakującym okienku upewnij się, że wybrano Nagłówek pliku, Zagregowane statystyki studni i Synchronizacja. Kliknij OK. "Kompilator statystyk" pojawi się poniżej.
   nuta: Spowoduje to ustawienie adaptacyjnego przekraczania progu (filtr 6x STD), interwał między skokami na 100 ms z minimalną liczbą skoków na 5, wykrywanie średniej szybkości wypalania na 10 s z parametrem synchronizacji na 20 ms oraz minimalną szybkość skoków na 0,083333 skoków na minutę.
5. Ustaw zaplanowane nagrywanie na czas nagrywania 5 minut (300 000 ms), klikając ikonę zegara na dole. Osiąga się to poprzez zmianę informacji w sekcji ustawień, aby nagrywać co 5,1 minuty i nagrywać przez 5 minut. Zostanie to uruchomione natychmiast i zostanie wykonane raz.
6. Upewnij się, że temperatura MEA osiągnęła 37 °C przed przemieszczeniem MEA. Wyjmij MEA z inkubatora, umieść go na jednostce rejestrującej i zablokuj MEA. Rozpocznij nagrywanie aktywności sieciowej, klikając przycisk rozpocznij nagrywanie w sekcji zaplanowanego nagrywania lub ikonę nagrywania w oknie "Odtwarzanie plików". Zazwyczaj czas nagrywania wynosi 5 minut (300 000 ms), chociaż można uzyskać dłuższe nagrania do 10 minut.
7. Po nagraniu włóż MEA z powrotem do inkubatora.
   nuta: Należy dołożyć starań, aby utrzymać sterylność i zminimalizować czas, w którym MEA znajduje się poza inkubatorem.