Modelowanie zwyrodnienia i regeneracji siatkówki u danio pręgowanego za pomocą ogniskowego urazu laserowego

W tym artykule

Streszczenie

Źródło: Conedera, F. M., et al. Müller Aktywacja komórek glejowych w laserowo indukowanym modelu degeneracji i regeneracji siatkówki u danio pręgowanego. J. Vis. Exp. (2017).

Ten film demonstruje procedurę wywoływania zwyrodnienia siatkówki u dorosłych ryb pręgowanych za pomocą uszkodzenia laserowego. Laser celuje w komórki fotoreceptorowe w siatkówce, wywołując śmierć komórki i proces zwyrodnieniowy. To uszkodzenie aktywuje komórki glejowe Müllera (MG), prowadząc do ich odróżnicowania w komórki progenitorowe komórek macierzystych, które pomagają w regeneracji siatkówki.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalną komisję ds. opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Zwierzęta

Utrzymuj szczep TgBAC (gfap:gfap-GFP) zebry 167 (AB) w wieku od 6 do 9 miesięcy w standardowych warunkach w wodzie o temperaturze 26,5 °C i cyklu 14/10 godzin światła/ciemności.

2. Odwracalne znieczulenie ogólnoustrojowe

Przygotować roztwór podstawowy soli metanosulfonianu 3-aminobenzoesanu etylu (trikainy), rozpuszczając 400 mg proszku trikainy w 97,9 ml wody w zbiorniku i 2,1 ml 1 M soli fizjologi....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

figure-results-1
Rysunek 1: Przygotowanie do indukcji laserowego uszkodzenia siatkówki danio pręgowanego i po analizie OCT. (A) Rozmieszczenie systemu laserowego przed zabiegiem. (A.1) Danio pręgowany umieszczony na silikonowym uchwycie szpilkowym z soczewką kontaktową dna oka założoną tuż przed zastosowaniem wiązki laserowej. (B) Rozmieszczenie systemu KTZ przed ob.......