Źródło: McFadden, T., et al. Quantifying Subcellular Ubiquitin-proteasome Activity in the Gryzoń Brain. J. Vis. Exp. (2019).
Ten film pokazuje, jak mierzyć aktywność proteasomu w różnych subkomórkowych przedziałach bocznego ciała migdałowatego z mózgów szczurów kondycjonowanych strachem i kontrolnych za pomocą testu peptydów fluorogennych. Proteasom rozszczepia substrat peptydu fluorogenicznego, uwalniając cząsteczki fluorescencyjne, które są oznaczane ilościowo za pomocą czytnika płytek w celu oceny aktywności proteasomu we frakcjach białek jądrowych i synaptycznych. Zwiększona aktywność jądrowa sugeruje zmiany w ekspresji genów, podczas gdy zmniejszona aktywność synaptyczna wskazuje na stabilizację białek niezbędną do utrzymania pamięci długotrwałej.
