Artykuł metodologiczny
28 kwietnia 2025
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
do lizy lizy ilościowego białka lizatu strony SDS lizatu cell culture experiment komórkowych do lizy do lizy strony SDS komórkowych komórkowych transferowej z hodowlą western blotting western blotting komórkowych komórkowych western blotting z hodowlą komórkową komórkowychtd style='szerokość:240pt;'>Mettler Toledo buforowych do lizy komórek TBS-T buffer do lizy z hodowlą komórkową do lizy do lizy komórkowych TBS-T komórkowych próbekNazwa Firma Numer katalogowy Komentarze 40% acrylamide Sigma-Aldrich A2917 Służy do produkcji żelu do oddzielania i układania w stosy dla SDS-PAGE Ammonium Per Sulfate Sigma-Aldrich 248614 Służy do produkcji żelu do oddzielania i układania w stosy dla SDS-PAGE anti pSPAK Uniwersytet Dundee S670B Używany jako podstawowe przeciwciało do western blotting anty-KCC2 Dundee University S700C Używane jako główne przeciwciało do western blottingu anti-KCC2 pSer940 Thermo Fisher Scientific PA5-95678 Używane jako główne przeciwciało do western blottingu anty-KCC2 pThr1007 Dundee University S961C Używane jako podstawowe przeciwciało do western blottingu anti-KCC2 pThr906 Uniwersytet Dundee S959C Używane jako podstawowe przeciwciało do western blottingu anti-mouse Technologia sygnalizacji komórkowej 66002 Używane jako przeciwciało wtórne dla western blotting anti-NKCC1 Uniwersytet Dundee S841B Używane jako główne przeciwciało do western blotting anty-NKCC1 pThr203/207/212 Uniwersytet Dundee S763B Używane jako podstawowe przeciwciało do western blottingu anti-rabbit Technologia sygnalizacji komórkowej C29F4 Używane jako przeciwciało wtórne do western blotting anty-owce abcam ab6900 Używane jako przeciwciało wtórne do western blottingu anti-SPAK Uniwersytet Dundee S669D Używane jako pierwotne przeciwciało do western blotting anty-β-tubulina III Sigma-Aldrich T8578 Używana jako główne przeciwciało do western blottingu Benzamine Merck UK 135828 Używany jako składnik bufora Beta-merkaptoetanol Sigma-Aldrich M3148 Używany jako składnik bufora ładowania i bufora Bradford Coomasie Thermo Scientific 1856209 Używany do oznaczania Aparatura odlewnicza Atto WSE-1165W Służy do przeprowadzania elektroforezy Wirówka Eppendorf 5804 Używany do przygotowania Wirówka VWR MicroStar 17R Używany do przędzenia próbek Dimethyl sulfoxide (DMSO) Sigma-Aldrich D2650-100ML Used for Dried Enchantmed Milk Marvel N/A Służy do tworzenia bufora blokującego Dulbecco's Modified Eagle's Medium - wysoka poziom glukozy Sigma-Aldrich D6429 Używany do hodowli Odczynnik ECL Perkin Elmer ORTT755/2655 Służy do wywoływania obrazu do western blottingu EDTA Fisher Scientific D/0700/53 Używany jako składnik bufora EGTA Sigma-Aldrich e4378 Używany jako składnik bufora Zasilacz do elektroforezy BioRad PowerPAC HC Zasilanie do przeprowadzenia elektroforezy Etanol ThermoFisher E/0650DF/17 Służy do przygotowania sterylizowanych urządzeń i środowiska Płodowa surowica bydlęca - inaktywowana termicznie Merck Life Sciences UK F9665 Używane do hodowli Fumehood Walker A7277 Używane do hodowli Żużel - Whatman GE Healthcare 10426981 Używany w western blotting do robienia kanapki Glycine Sigma-Aldrich 15527 Używany do tworzenia buforów GraphPad Prism Software GraphPad Software, Inc., USA Wersja 6.0 Służy do kreślenia wykresów i analizowania danych dla western blottingu HCl Acros Organics 10647282 Służy do sporządzania żelu separacyjnego i układającego dla SDS-PAGE Blok grzewczy Grant QBT1 Służy do podgrzewania WB ładując próbki HEK293 cells Merck UK 12022001-1VL Linia komórkowa do eksperymentu Oprogramowanie ImageJ Wayne Rasband i współpracownicy; NIH, Stany Zjednoczone ImageJ 1.53e Służy do pomiaru intensywności pasma z obrazów System obrazowania BioRad ChemiDoc MP Służy do robienia obrazów Inkubator LEEC LEEC precyzja 190D Używany do hodowli Isopropanol Honeywell 24137 Używany w żelu odlewniczym do elektroforezy roztwór L-glutaminy Sigma-Aldrich G7513 Używany do hodowli Siarczan dodecylu litu (LDS) Novex NP0008 Używany jako bufor ładowania dla western blottingu MEM Aminokwas endogenny Merck Life Sciences UK M7145 Używany dla komórki culture Mikrowirówka Eppendorf 5418 Służy do przygotowania lizatów dla WB Czytnik mikropłytek BioRad iMark Służy do odczytu stężenia białka lizatu Microsoft Powerpoint Microsoft, USA PowerPoint2016 Służy do edycji obrazów Marker masy cząsteczkowej BioRad 1610373 Używany do western blotting N-etylomaleimid Thermo Fisher Scientific 23030 Używany do eksperymentu Membrana nitrocelulozowa Fisher Scientific 45004091 Używany do western blotting Penicylina-Streptomycyna Gibco 15140122 Używany do hodowli pH< Siedem kompaktowych s210 Służy do monitorowania pH roztworów Fluorek fenylometylosulfonylu (PMSF) Sigma-Aldrich P7626 Używany jako składnik bufora Bufor fosforanowy Saline Sigma-Aldrich D8537 Używany do hodowli PKCδ pThr505 Technologia sygnalizacji komórkowej 9374 Używane jako podstawowe przeciwciało do western blottingu Sepharose Protein G Generon PG50-00-0002 Używane do immunoprecypitacji Chlorek sodu Sigma-Aldrich S7653 Używany jako składnik bufora myjącego Chlorek sodu Sigma-Aldrich S7653 Służy do przygotowania bufora Sodium Dodecyl Sulfate Sigma-Aldrich L5750 Służy do sporządzania żelu do oddzielania i układania dla SDS-PAGE orthovanadate sodu Sigma-Aldrich S6508 Used as component of lysis buffer Sodium Pyrustalle Sigma-Aldrich S8636 Used for cell sodium-β-glycerophosphate Merck UK G9422 Używany jako składnik bufora Staurosporyna (z Streptomyces sp.) Scientific Laboratory Supplies, UK S4400-1MG Używany do eksperymentu Sacharoza Scientifc Laboratory Supplies S0389 Używany jako składnik bufora TEMED Sigma-Aldrich T7024 Służy do produkcji żelu do oddzielania i układania w stosy dla SDS-PAGE Komora transferowa BioRad 1658005EDU Używany w western blotting do przenoszenia białka na błonie Tris Sigma-Aldrich T6066 Służy do produkcji żelu separacyjnego i układającego dla SDS-PAGE Triton-X100 Sigma-Aldrich T8787 Używany jako składnik bufora Roztwór trypsyny-EDTA Merck Life Sciences UK T4049 Używany do hodowli Tween-20 Sigma-Aldrich P3179 Używany jako bufor Pompa próżniowa Charles Austen Dymax 5 Używany do hodowli Vortex Scientific Industries K-550-GE Używany do przygotowania Mikser Vortex Scientific Industries Ltd Vortex-Genie K-550-GE Używany do mieszania rozdzielonej próbki Kąpiel wodna Grant Instruments Ltd. (JB Academy) JBA5 Służy do inkubacji roztworów
Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE
Poproś o pozwolenie