$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Wszystkie procedury z udziałem modeli zwierzęcych zostały zweryfikowane przez lokalną instytucjonalną komisję ds. opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.
1. Umieszczenie klipsów do tętniaka
- Umieść klips do tętniaka szczura 30 G na każdej tętnicy macicznej. Zapewnić zatrzymanie przepływu krwi, w tym tętna proksymalnego i dystalnego oraz ciemnienie naczyń macicy, w tym poszczególnych łożysk. Przykryj odsłonięte rogi i całe pole operacyjne gazą i przepłucz sterylną solą fizjologiczną. Nawadniaj pole mniej więcej co 10 minut, aby było wilgotne.
- Po 60 minutach usuń gazę i nawodnij pole. Upewnij się, że rogi i naczynia macicy są odpowiednio nawilżone, aby można było skutecznie usunąć klips. Delikatnie usuń każdy klips tętniaka za pomocą kleszczy. Uważaj, aby nie spowodować urazu naczynia i zachowaj integralność tkanek podczas usuwania.
- Dokładnie przepłukać rogi macicy i pole, uważając, aby usunąć wszelkie zabłąkane nitki gazy z worków owodniowych.
2. Wstrzyknięcie lipopolisacharydu do worków owodniowych
- U podstawy każdego pojedynczego worka owodniowego, tuż przed płytką łożyskową, wstrzyknij 100 μl lipopolisacharydu (LPS) (4 μg/worek) z rozcieńczonym niebieskim barwnikiem Evana do płynu owodniowego. Użyj tępych kleszczy, aby ustabilizować i obrócić każdy worek owodniowy do optymalnej pozycji do wstrzyknięcia. Rozcieńczony niebieski barwnik Evana jest środkiem kontrastowym, który jest pomocny w potwierdzeniu prawidłowego umieszczenia strzykawki i wstrzyknięcia.
UWAGA: Do iniekcji doowodniowych używaj tylko ultracienkiej strzykawki insulinowej o pojemności 0,3 ml z dołączoną igłą 8 mm 31 G. Używanie igieł o większej średnicy spowoduje przewlekłą utratę płynu owodniowego, śmierć płodu i ponowne wchłonięcie ciąży. Niewielki wyciek płynu owodniowego po wyjęciu strzykawki można złagodzić poprzez bezpośredni ucisk na worek owodniowy. Niektóre płody szczurów mogą tolerować pewien stopień małowodzie. Jednak ostra utrata płynu owodniowego w wyniku nakłucia igłami o dużej średnicy lub przypadkowego nakłucia powodującego przewlekły wyciek płynu powoduje utratę płodu, a w ciężkich przypadkach utratę sąsiednich ciąż. - Przepłukać rogi macicy 3x sterylną solą fizjologiczną.
3. Zamykanie laparotomii
- Za pomocą kleszczy ostrożnie przywróć rogi macicy do jamy otrzewnej. Zapewniając odpowiednią przestrzeń między workami owodniowymi a nacięciem w linii środkowej, ponownie przybliż krawędzie warstwy mięśniowo-powięziowej za pomocą biegnącego szwu jedwabnego 3-0. Należy zwrócić uwagę na rozmieszczenie worków owodniowych podczas zamykania nacięcia mięśniowego. Uważaj, aby nie zszyć worka ani nie przechodzić przez niego.
- Ponownie przybliż warstwę skóry, używając biegnącego szwu jedwabnego 3-0, zamykając warstwę skóry.
UWAGA: Laparotomia powinna być zamknięta w dwóch warstwach ciągłych szwów, aby umożliwić rozszerzanie się skóry i mięśni wraz ze wzrostem ciąży. Szwy ciągłe pozwalają na równomierne rozłożenie napięcia rany. Przerwane szwy są mniej pożądane, ponieważ wiele węzłów jest drażniących i może być łatwo przeżute przez szczura po powrocie do zdrowia po znieczuleniu. Zszywki chirurgiczne nie są pożądane. Ogony węzłów chirurgicznych powinny być bardzo krótko przycięte (<3 mm). - Wstrzyknąć 1 ml 0,125% bupiwakainy podskórnie wokół brzegów rany za pomocą igły 26 G. Należy podać jedną dawkę 0,1 mg/kg buprenorfiny podskórnie na kark.
- W razie potrzeby wyłącz izofluran i osusz szczura ręcznikiem. Umieść szczura w czystej klatce domowej i monitoruj jego powrót do zdrowia po znieczuleniu. Upewnij się, że szczur nie wpadnie w hipotermię.