Obrazowanie aktywacji neuronów hipokampa w sekcjach mózgu myszy

W tym artykule

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Źródło: Provenzano, G., i wsp. Immunohistochemiczna wizualizacja aktywności neuronów hipokampa po uczeniu przestrzennym w mysim modelu zaburzeń neurorozwojowych. J. Vis. Exp. (2015)

Ten film przedstawia obrazowanie immunohistochemiczne w celu wizualizacji aktywacji neuronów hipokampa. Poplamione skrawki mózgu ujawniają ciemniejsze obszary pod mikroskopem jasnego pola, co wskazuje na aktywowane neurony.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie procedury dotyczące próbek zwierzęcych zostały poddane przeglądowi i zatwierdzone przez odpowiednią komisję ds. oceny etycznej zwierząt.

1. Immunohistochemia

Przenieś 3-5 grzbietowych odcinków hipokampa dla każdej myszy do 24 wielodołkowych płytek zawierających 500 μl 0,1 M soli fizjologicznej buforowanej fosforanem (PBS) dla każdej studzienki.
Skrawki znajdujące się w każdej studzience ....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
24 well plate	Sigma	CLS3524
100% etanolu	Fisher Scientific	A406-20	Służy do wytwarzania gradientu etanolu do odwodnienia przed montażem zjeżdżalni.
Xylene	VWR	66004-950	Toksyczny - do stosowania pod maską. Zmieniaj ksylen co miesiąc w zależności od zastosowania.
PBS	Sigma	P3813-10PAK
Triton X-100	Sigma	T-8787
Nadtlenek wodoru	Sigma	H1009-100ML
Normalna surowica kozia	Abcam	G9023-10ML
zestaw ABC Vectastain	Laboratoria wektorowe	PK-6100	Dodać objętość 5 ml PBS 2 krople odczynnika A, wymieszać, a następnie dodać 2 krople odczynnika B i wymieszać.
Podłoże peroksydazy DAB	Vector Laboratories	SK-4100	Dodaj objętość 5 ml podwójnie destylowanej wody: 2 krople buforowego roztworu podstawowego i wymieszaj; 4 krople DAB i wymieszaj; 2 krople nadtlenku wodoru i wymieszaj.
przeciwciało pERK	Technologie sygnalizacji komórkowej	4370	Rozcieńczenie 1:500
Biotynylowane kozie przeciwciało anty-królicze IgG	Laboratoria Wektorowe	BA-1000	Rozcieńczenie 1:250
SuperFrost Slides	Carl Roth	1879
Szkiełka nakrywkowe	Fisher	12-548-B
DPX	Sigma	317616	Medium montażowe do prowadnic. Można użyć równoważnego medium montażowego.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Powiązane artykuły