Obrazowanie mózgu

Źródło: Provenzano, G., i wsp. Immunohistochemiczna wizualizacja aktywności neuronów hipokampa po uczeniu przestrzennym w mysim modelu zaburzeń neurorozwojowych. J. Vis. Exp. (2015)Ten film przedstawia obrazowanie immunohistochemiczne w celu wizualizacji aktywacji neuronów hipokampa. Poplamione skrawki mózgu ujawniają ciemniejsze obszary pod mikroskopem jasnego pola, co wskazuje na aktywowane neurony.

Źródło: Galenchik-Chan, A., et al. Funkcjonalny rezonans magnetyczny (fMRI) kory wzrokowej z szerokokątną stymulacją retinotopową. J. Vis. Exp. (2023). Film przedstawia funkcjonalny rezonans magnetyczny (fMRI) kory wzrokowej w celu mapowania aktywności na podstawie poziomu natlenienia krwi. Strukturalne obrazy MRI są pozyskiwane jako odniesienia anatomiczne, a następnie skany fMRI. Bodźce wzrokowe są wyświetlane w celu aktywacji neuronów retinotopowych w korze wzrokowej. Zwiększone...

Źródło: Wang, J., et al. Wizualizacja immunoreaktywnego unerwienia peptydu związanego z genem kalcytoniny opony twardej czaszki szczura z immunofluorescencją i śledzeniem neuronalnym. J. Vis. Exp. (2021). Ten film demonstruje metodę śledzenia pochodzenia neuronów czuciowych w oponie twardej za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej. Znacznik wsteczny jest wprowadzany do odsłoniętej opony twardej znieczulonego szczura. Znacznik jest pobierany przez czuciowe aksony neuronów i przemieszcza się...

Źródło: Sabado, V., et al., }Nagoshi, E. Obrazowanie na żywo fluorescencji w rozdzielczości pojedynczej komórki Drosophila Zegary okołodobowe w mózgu larw Kultura. J. Vis. exp. (2018). Ten film demonstruje procedurę osadzania mózgu Drosophila{} w matrycy fibryny, a następnie obrazowanie fluorescencyjne poklatkowe neuronów zegara okołodobowego w celu analizy rytmicznej aktywności zsynchronizowanej z cyklami światła/ciemności.

Źródło: Bancroft, E. A., et al. Kwantyfikacja spontanicznych strumieni ca2+{ i ich dalsze efekty w pierwotnych neuronach śródmózgowia myszy. J. Vis. Exp. (2020) {{TAG_ 46}}Ten film pokazuje wizualizację w czasie rzeczywistym napływu wapnia do neuronów brzusznego śródmózgowia pochodzących z zarodków myszy. Wykorzystując wektor wirusowy do ekspresji wskaźnika wapnia, neurony są obrazowane pod mikroskopem konfokalnym w celu śledzenia zmian intensywności fluorescencji podczas spontanicznej i...

Źródło: Calvo-Rodríguez, et al. Obrazowanie fluorescencyjne i bioluminescencyjne subkomórkowego Ca2+ w starzejących się neuronach hipokampa. J. vis. exp. (2015). Ten film demonstruje zastosowanie obrazowania fluorescencyjnego do pomiaru poziomu cytozolowego wapnia w krótko- i długoterminowych hodowlach hipokampa szczurów. Porównując młode i starzejące się neurony, podkreśla, w jaki sposób zwiększona gęstość kanałów wapniowych bramkowanych napięciem typu L i przedłużona aktywacja w starzejących...

Źródło: Reindl, V., et al. Przeprowadzanie eksperymentów hiperskaningowych z funkcjonalną spektroskopią w bliskiej podczerwieni. J. Vis. Exp. (2019) Ten film pokazuje zastosowanie funkcjonalnej spektroskopii bliskiej podczerwieni (fNIRS) do pomiaru aktywności mózgu podczas interakcji społecznych. Uczestnicy angażują się w skoordynowane zadanie, które zwiększa aktywność w korze przedczołowej, regionie krytycznym dla zachowań społecznych, podczas gdy system wykrywa zmiany w absorpcji światła...

Zacznij od pacjenta, u którego zdiagnozowano tętniaki mózgu, stan, w którym naczynia krwionośne w mózgu wybrzuszają się i wypełniają krwią. Zabezpiecz głowę pacjenta w cewce głowicy aparatu do rezonansu magnetycznego. Rozpocznij obrazowanie. System generuje silne pole magnetyczne, wyrównując protony w tkance mózgowej wzdłuż swojego kierunku. Zainicjuj przygotowaną przez namagnesowanie sekwencję szybkiego echa gradientowego lub MPRAGE poprzez zastosowanie inwersyjnego impulsu o częstotliwości...

Urazowe uszkodzenie mózgu (TBI) upośledza przepływ krwi do dotkniętych obszarów i zakłóca aktywność neuronów dopaminergicznych. Aby zbadać zakłócenia związane z TBI, zacznij od dożylnego wstrzyknięcia pacjentowi lipofilowego znacznika radioaktywnego. Znacznik przemieszcza się przez naczynia mózgowe i dyfunduje do komórek korowej i podkorowej tkanki mózgowej. Wykonaj tomografię komputerową z emisją pojedynczych fotonów lub SPECT, aby wykryć promieniowanie emitowane przez znacznik. Uzyskane...

Źródło: Wiegreffe, C., et. al., Poklatkowe obrazowanie konfokalne migrujących neuronów w organotypowej kulturze warstwowej embrionalnego mózgu myszy przy użyciu {{}}W macicy elektroporacji. J. Vis. exp.{{TAG_ 44}} (2017) Ten film przedstawia poklatkową mikroskopię konfokalną w celu obserwacji radialnej migracji neuronów korowych ze strefy podkomorowej do płytki korowej za pomocą promieniowych rusztowań glejowych w transdukowanych wycinkach mózgu myszy embrionalnych.

Umieść głowę ludzkiego uczestnika w cewce głowy systemu funkcjonalnego rezonansu magnetycznego lub fMRI. Zastosuj zajętość przestrzeni naczyniowej lub VASO, technikę pomiaru zmian objętości krwi w mózgu lub CBV, objętości krwi w mózgu. Zacznij od zastosowania impulsu regeneracyjnego inwersji, aby stłumić sygnały z krwi, umożliwiając wykrycie tylko sygnałów z otaczającej tkanki w regionie. Następnie użyj wkładek dousznych kompatybilnych z MRI, aby dostarczyć bodźce słuchowe. Bodźce docierają do...

Źródło: Schott, J. T., et al. Przygotowanie hodowli progenitorowych oligodendrocytów szczurów i kwantyfikacja oligodendrogenezy za pomocą skanowania fluorescencyjnego w podwójnej podczerwieni. J. Vis. Exp. (2016). Ten film demonstruje zastosowanie obrazowania podwójnej fluorescencji do oceny różnicowania oligodendrocytów od komórek prekursorowych (OPC) wyizolowanych z mózgu młodego szczura. Proces ten obejmuje utrwalanie komórek, znakowanie określonych markerów pierwszorzędowymi i sprzężonymi...

Źródło: Upputuri, P. K., et al. Wysokowydajny, kompaktowy system tomografii fotoakustycznej do obrazowania mózgu In Vivo. J. Vis. Exp. (2017)Ten film przedstawia protokół nieinwazyjnego obrazowania mózgu szczura in vivo za pomocą tomografii fotoakustycznej, prezentując przygotowanie, konfigurację systemu obrazowania i pozyskiwanie danych w celu rekonstrukcji obrazów mózgu 2D w celu wizualizacji struktur naczyniowych i zdrowia nerwowo-naczyniowego.

Źródło: Shimojo, H., et al. Obrazowanie bioluminescencyjne w czasie rzeczywistym dynamiki sygnalizacji Notch podczas neurogenezy myszy. J. Vis. Exp. (2019 rok)W tym filmie kultury warstw korowych z transgenicznych zarodków myszy są wykorzystywane do monitorowania ekspresji genów za pomocą obrazowania trójwymiarowego. Obrazy bioluminescencji, fluorescencji i jasnego pola są wykorzystywane do wizualizacji ekspresji genów w czasie rzeczywistym podczas różnicowania neuronów w tkance natywnej.

Źródło: Jamadar, S. et. al. Podawanie radioznacznika w pozytonowej tomografii emisyjnej ludzkiego mózgu o wysokiej rozdzielczości czasowej: zastosowanie do FDG-fPET. J. Vis. Exp. (2019 rok)Ten film przedstawia kwantyfikację metabolizmu glukozy w mózgu za pomocą pozytonowej tomografii emisyjnej (PET). Podczas skanowania uczestnikowi podaje się znacznik F-18 fluorodeoksyglukozy (FDG). FDG gromadzi się w aktywnych neuronach i emituje pozytony po rozpadzie F-18. Pozytony te oddziałują z...

Źródło: Delalande, J., et.al. Podwójne znakowanie komórek grzebienia nerwowego i naczyń krwionośnych w zarodkach kurczaków za pomocą szczepienia cewy nerwowejpiskląt GFP i wstrzyknięcia barwnika karbocyjaninowego DiI. J. Vis. Exp. (2015)Ten film pokazuje przeszczepienie cewy nerwowej dawcy znakowanej GFP z dopasowanego etapu transgenicznego zarodka kurczaka do zarodka biorcy na poziomie somitów od jednego do siedmiu, a następnie znakowanie naczyniowe przy użyciu lipofilowego barwnika...

Źródło: Zheng, W. i wsp., Obrazowanie rezonansu magnetycznego tensora dyfuzji w przewlekłym ucisku rdzenia kręgowego. J. Vis. Exp. (2019 rok)Ten film przedstawia obrazowanie tensora dyfuzji w ocenie przewlekłego ucisku rdzenia kręgowego. Analizując wzorce dyfuzji wody, anizotropię frakcyjną i pozorne wartości współczynników dyfuzji, wyniki ujawniają uszkodzenia aksonów w ściśniętych obszarach. Odkrycia dostarczają krytycznych informacji na temat patologii rdzenia kręgowego i integralności...

Źródło: Fowler, B. E., et al. Obrazowanie wapnia in vivo reakcji neuronów zwojowych przestępczych myszy na bodźce smakowe. J. Vis. Exp. (2021) Ten film demonstruje protokół dostarczania degustantów do chirurgicznie odsłoniętego zwoju kolankowatego u znieczulonej myszy i wykorzystania fluorescencji GCaMP z mikroskopią epifluorescencyjną do wizualizacji odpowiedzi neuronalnych w czasie rzeczywistym, wspomagając badania nad przetwarzaniem sygnałów smaku obwodowego.

Źródło: Blanc, J., et al. Funkcjonalna spektroskopia rezonansu magnetycznego przy 7 t w korze lufy szczura podczas aktywacji wąsów. J. Vis. Exp. (2019 rok)Film ten przedstawia metodę analizy zmian metabolicznych w korze beczki szczura za pomocą funkcjonalnej spektroskopii rezonansu magnetycznego podczas stymulacji wąsów. Wyjściowe widma metabolitów są porównywane z widmami stymulowanymi w celu wykrycia wzrostu mleczanu w korze beczkowatej, potwierdzając pomyślną aktywację neuronów.

Źródło: Villarreal, S., et. al., Pomiar endocytozy pęcherzyków synaptycznych w hodowanych neuronach hipokampa. J. Vis. Exp. (2017)Ten film przedstawia analizę endocytozy pęcherzyków synaptycznych w hodowanych neuronach hipokampa poprzez znakowanie peroksydazą chrzanową i mikroskopię elektronową.

Źródło: Becker-Kojić, Z. A., i inni. al., Wolne od GMO pokolenie komórek neuronalnych pochodzących z krwi. J. Vis. Exp. (2021)Film przedstawia protokół przygotowania komórek nerwowych pochodzących z przeprogramowanych komórek krwi obwodowej do mikroskopii fluorescencyjnej, prezentując różne typy komórek i etapy rozwoju za pomocą obrazowania immunofluorescencyjnego.

Źródło: McLeod, F., et al. Ocena gęstości synaps w wycinkach mózgu gryzoni w hipokampie. J. Vis. Exp. (2017). Ten film przedstawia metodę wizualizacji markerów synaptycznych w wycinkach mózgu hipokampa za pomocą konfokalnej analizy immunofluorescencyjnej. Plastry są barwione immunologicznie przeciwciałami pierwszorzędowymi skierowanymi przeciwko markerom presynaptycznym i postsynaptycznym, a następnie przeciwciałami drugorzędowymi sprzężonymi z fluoroforem. Oznaczone markery są następnie...

Źródło: Lerchundi, R., et. al. Obrazowanie wewnątrzkomórkowego ATP w organotypowych wycinkach tkanki mózgu myszy przy użyciu czujnika ATeam1.03YEMK opartego na FRET. J. Vis. Exp. (2019)Ten film demonstruje wykorzystanie czujników opartych na FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer) do pomiaru wewnątrzkomórkowych poziomów ATP w organotypowych wycinkach hipokampa myszy, umożliwiając wizualizację dynamiki ATP w neuronach i astrocytach w czasie rzeczywistym w warunkach fizjologicznych i...

Źródło: Espinoza, R., et al. Dwukolorowe, stymulowane w czasie rzeczywistym obrazowanie rozpraszania Ramana mózgu myszy w celu diagnozowania tkanek. J. Vis. exp. (2022). Film przedstawia dwukolorowe, stymulowane rozpraszanie Ramana (SRS) wycinków tkanki mózgowej myszy. Dwie zsynchronizowane wiązki laserowe są kierowane na przekrój tkanki w celu wzbudzenia drgań molekularnych, co powoduje względną zmianę intensywności wiązek. Lipidy i białka w tkance są wykrywane za pomocą różnych par...

Źródło: Olesen, M. V., et al. Technika frakcjonowania optycznego do szacowania liczby komórek w szczurzym modelu terapii elektrowstrząsowej. J. Vis. exp. (2017). Film demonstruje technikę ilościowego określania nowo wygenerowanych neuronów w tkance mózgowej. Wycinki tkanki hipokampa zawierające neurony znakowane bromodeoksyurydyną (BrdU) wybarwiono za pomocą immunohistochemii, a następnie określono ilościowo na całej grubości tkanki przy użyciu techniki frakcjonowania optycznego.

Źródło: Guan, W., et. al. Wizualizuj Drosophila Aksony neuronu ruchowego nóg przez dorosły naskórek. J. vis. exp. (2018) Ten film pokazuje obrazowanie Drosophila z zielonymi fluorescencyjnymi neuronami ruchowymi eksprymującymi białko za pomocą mikroskopii konfokalnej. Laser i dwa detektory wychwytują GFP i autofluorescencję naskórków. Obrazy są przetwarzane przez dzielenie kanałów, odejmowanie autofluorescencji i łączenie w kolorowy obraz kompozytowy w celu wizualizacji aksonów w segmencie nogi.

Source: Lauer, S. M., et al. Wizualizacja modułów korowych w spłaszczonych korach ssaków. (2018) Ten film pokazuje metodę wizualizacji modułów korowych w spłaszczonych sekcjach mózgu za pomocą barwienia histochemicznego. Wstępnie utrwalone skrawki są traktowane odczynnikiem odcedzającym, który uwydatnia aktywne klastry nerwowe, tworząc ciemne obszary o wysokim kontraście. Po zamontowaniu i odwodnieniu, moduły korowe pojawiają się pod mikroskopem jasnego pola jako ciemne, niejednolite wzory.

Źródło: Hidmark, A. S., et al. {{}}Analiza komórek odpornościowych w pojedynczych nerwach kulszowych i zwoju korzenia grzbietowego od pojedynczej myszy za pomocą cytometrii przepływowej. J. Vis. Exp.{{TAG_ 27}} (2017). Ten film demonstruje zastosowanie cytometrii przepływowej do analizy komórek odpornościowych w nerwach kulszowych myszy i zwojach korzenia grzbietowego (DRG). Proces ten polega na znakowaniu komórek odpornościowych przeciwciałami znakowanymi fluoroforem i biotyną, stabilizacji i...

Źródło: Morsch, M., , Wywoływanie stresu i śmierci komórki za pomocą konwencjonalnej laserowej mikroskopii konfokalnej UV. J. Vis. Exp. (2017)...

Źródło: Lunelli, L., et. al. Przyglądanie się polisomom mózgu za pomocą mikroskopii sił atomowych. J. Vis. exp.(2016). Ten film przedstawia obrazowanie polisomów przy użyciu mikroskopii sił atomowych. Arkusz miki pokryty jonami niklu zakotwicza RNA z dołączonymi rybosomami. Próbka jest myta, suszona i umieszczana na stoliku mikroskopowym. Końcówka wspornikowa skanuje powierzchnię próbki, rejestrując ugięcia lasera w celu odwzorowania topologii. Oprogramowanie służy do korekcji zniekształceń i...

Source: Kimmelmann-Shultz, B., et. al. Używanie fluorescencji w bliskiej podczerwieni i skanowania w wysokiej rozdzielczości do pomiaru ekspresji białek w mózgu gryzoni.J. Vis. Exp. (2019) Ten film demonstruje metodę fluorescencji w bliskiej podczerwieni i skanowania w wysokiej rozdzielczości do pomiaru ekspresji białek w mózgu gryzonia.

Źródło: Hamid, H. S., et al. Trójwymiarowe obrazowanie i analiza mitochondriów w obrębie śródnaskórkowych włókien nerwowych człowieka. J. Vis. Exp. (2017) Ten film przedstawia metodę wizualizacji mitochondriów specyficznych dla nerwów za pomocą obrazowania trójwymiarowego. Przedstawiono w nim proces pozyskiwania sekwencyjnych skanów wstępnie znakowanych śródnaskórkowych włókien nerwowych i generowania obrazów powierzchni 3D w celu wyizolowania i wyświetlenia mitochondriów w odniesieniu do...

Źródło: Mukherjee, K., et. al. Analiza mitochondriów mózgu za pomocą seryjnej skaningowej mikroskopii elektronowej. J. Vis. exp. (2016)Ten film pokazuje przygotowanie, obrazowanie i analiza tkanki mózgowej myszy przy użyciu seryjnego skaningowego mikroskopu elektronowego z blokową powierzchnią czołową (SBFSEM) w celu wizualizacji ultrastruktury mitochondriów, umożliwiając precyzyjne mapowanie ich morfologii i rozmieszczenia przestrzennego w aksonalnych i dendrytycznych przedziałach...

Źródło: Laboissonniere, et. al. Jednokomórkowy sekwencjoner RNA zdefiniowanych podzbiorów komórek zwojowych siatkówki. J. Vis. exp. (2017). Ten film demonstruje technikę fluorescencyjnego śledzenia w celu identyfikacji podtypów komórek zwojowych siatkówki (RGC) w transgenicznej siatkówce myszy. Proces ten polega na zabezpieczeniu izolowanej siatkówki w komorze rejestracyjnej, utrzymaniu żywotności komórek za pomocą natlenionej perfuzji i celowaniu w znakowane fluorescencyjnie RGC za pomocą...

Weź stały odcinek tkanki korowej mózgu myszy z aksonami neuronalnymi i dendrytami. Dendryty posiadają wypukłości, znane jako kolce dendrytyczne, które tworzą synapsy z aksonami. Inkubuj tkankę z żelazocyjankiem osmu, który wiąże się z lipidami, a następnie ponownie zastosuj osm, który zwiększa kontrast strukturalny do obrazowania. Barwnik ze związkiem metalu ciężkiego, który wiąże się z makrocząsteczkami i zwiększa kontrast. Odwodnić za pomocą zwiększających się stężeń alkoholu do zatapiania...

Source: Mizuno, H., et al. In Vivo Dwufotonowe obrazowanie neuronów korowych u noworodków myszy. J. Vis. Exp. (2018)Ten film prezentuje mikroskopię dwufotonową używaną do obrazowania neuronów w mózgu znieczulonego transgenicznego szczeniaka myszy. Laser dwufotonowy pozwala na głębsze obrazowanie z wysoką rozdzielczością przestrzenną i minimalnym rozpraszaniem światła, umożliwiając szczegółowe uchwycenie morfologii neuronów, w tym projekcji dendrytycznych.

Źródło: Lark, A. R., et. al., Podejście do funkcjonalnego obrazowania mózgu in vivo oparte na bioluminescencyjnym wskaźniku wapnia GFP-aequorin. J. Vis. exp. (2016)Ten film przedstawia obrazowanie dynamiki wapnia w czasie rzeczywistym za pomocą Greena bioluminescencja białka fluorescencyjnego i aequoryny w głębokich strukturach mózgu .

Źródło: Muto, A., et al. Ablacja populacji neuronów za pomocą lasera dwufotonowego i jej ocena za pomocą obrazowania wapnia i rejestracji behawioralnej larw danio pręgowanego. J. vis. exp. (2018) W tym filmie Zademonstrowano procedurę dwufotonowej ablacji laserowej, umożliwiającą selektywne niszczenie neuronów fluorescencyjnych w unieruchomionych agarozą larwach danio pręgowanego. Obrazowanie w wysokiej rozdzielczości przed i po zabiegu potwierdza skuteczne uszkodzenie neuronów, co obserwuje...

Źródło: Winkle, C. C., et al. Wykorzystanie połączonych metodologii w celu zdefiniowania roli dostarczania błony plazmatycznej podczas rozgałęziania aksonów i morfogenezy neuronów. J. Vis. Exp. (2016)Ten film przedstawia technikę obrazowania na żywo z wykorzystaniem mikroskopii różnicowego kontrastu interferencyjnego (DIC) do obserwacji rozgałęzień aksonalnych w czasie rzeczywistym w neuronach korowych. Filmy poklatkowe ukazują efekty leczenia netryną-1, cząsteczką sygnałową, która indukuje...

Źródło: Zhilyakov, N. V. et al., Rejestracja stanów przejściowych wapnia w mysim połączeniu nerwowo-mięśniowym z wysoką rozdzielczością czasową przy użyciu mikroskopii konfokalnej. J. Vis. Exp. (2021)Ten film przedstawia technikę obrazowania polegającą na rejestrowaniu szybkich stanów przejściowych wapnia na zakończeniach nerwowych za pomocą mikroskopii konfokalnej. Stymulując nerw i wychwytując zmiany fluorescencji spowodowane barwnikami wiążącymi wapń, wizualizuje dynamiczny napływ i usuwanie...

Źródło: Ting, C., et al., Analiza morfologii dendrytycznej w kolumnach i warstwach. J. Vis. Exp. (2017)Ten film pokazuje procedurę przygotowania mózgu Drosophila, przechwytywania poziomych i czołowych stosów obrazów dendrytów rdzenia znakowanych GFP pod mikroskopem konfokalnym oraz tworzenia rekonstrukcji 3D w celu analizy ich morfologii w warstwach i kolumnach.

Źródło: Lacin, E., et al. Budowa komórkowych neuroprzekaźników fluorescencyjnych (CNiFER) do optycznej detekcji neuroprzekaźników in vivo. J. Vis. Exp. (2016)Ten film przedstawia technikę obrazowania uwalniania neuroprzekaźników in vivo przy użyciu komórkowych neuroprzekaźników fluorescencyjnych (CNiFER), wyspecjalizowanych komórek reporterowych wstępnie wstrzykniętych do kory myszy. Umieszczona pod mikroskopem dwufotonowym mysz umożliwia wizualizację sygnalizacji wapniowej indukowanej przez...

Źródło: Doser, R., et al. Subkomórkowe obrazowanie neuronalnej obsługi wapnia in vivo. J. Vis. Exp. (2023)Ten film pokazuje obrazowanie in vivo subkomórkowego strumienia wapnia w neuronach brzusznego rdzenia nerwowego transgenicznych szczepów Caenorhabditis elegans. Stosowane są dwa różne wskaźniki wapnia: wskaźnik cytoplazmatyczny w jednym szczepie i wskaźnik mitochondrialny w innym. Neurony obserwuje się pod mikroskopem fluorescencyjnym w celu monitorowania zmian intensywności fluorescencji w...

Źródło: Gouder, et. al. Trójwymiarowa kwantyfikacja kolców dendrytycznych z neuronów piramidowych pochodzących z ludzkich indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych. J. Vis. Exp. (2015).Ten film przedstawia obrazowanie i analizę kolców dendrytycznych w transdukowanych, znakowanych immunologicznie neuronach piramidowych przy użyciu mikroskopii konfokalnej. Szum tła jest redukowany, a dendryty są śledzone, szacując ich średnicę i długość. Automatyczna segmentacja kręgosłupa polega na...

Źródło: Creighton, B. A., et al. Wizualizacja i analiza transportu wewnątrzkomórkowego organelli i innych ładunków w astrocytach. J. Vis. Exp. (2019 rok)Ten film przedstawia wizualizację wewnątrzkomórkowego transportu ładunku w hodowanych astrocytach za pomocą fluorescencyjnej sondy kwasotropowej, która selektywnie znakuje kwaśne pęcherzyki endolizosomalne. Obrazowanie poklatkowe i akwizycja stosu Z za pomocą mikroskopu konfokalnego umożliwiają śledzenie fluorescencyjnie znakowanego ładunku w...

Źródło: Katsalifis, A., et al. Obrazowanie na żywo mitochondrialnego stanu redoks glutationu w neuronach pierwotnych przy użyciu wskaźnika ratiometrycznego. J. Vis. Exp. (2021)Ten film pokazuje obrazowanie mitochondrialnego stanu redoks w neuronach pierwotnych przy użyciu ratiometrycznego wskaźnika fluorescencyjnego. Stosując dwie długości fal wzbudzenia pod mikroskopem fluorescencyjnym, mierzy się współczynnik intensywności fluorescencji w celu oceny utleniania mitochondriów. Protokół obejmuje...

Źródło: Bagheri, M., et al. Protokół trójwymiarowej konfokalnej analizy morfometrycznej astrocytów. J. Vis. Exp. (2015).Ten film pokazuje obrazowanie fluorescencyjnie znakowanych astrocytów w części mózgu myszy przy użyciu mikroskopu konfokalnego. Wycinek mózgu umieszcza się pod odpowiednią soczewką obiektywu i dobiera odpowiednie fluorofory i filtry. Po automatycznej optymalizacji ekspozycji, parametry skanowania są definiowane w celu zapewnienia obrazów 2D o wysokiej rozdzielczości. Parametry...

Źródło: Weber, R. Z., et al., Intracerebral Transplantation and In Vivo Bioluminescence Tracking of Human Neural Progenitor Cells in the Mouse Brain. J. Vis. Exp. (2022)Ten film przedstawia metodę obrazowania bioluminescencyjnego in vivo genetycznie zmodyfikowanych ludzkich nerwowych komórek progenitorowych wstrzykniętych do mózgu myszy. Proces obejmuje wstrzyknięcie lucyferyny, przygotowanie obrazowania i wykrywanie sygnałów bioluminescencyjnych z przeszczepionych komórek w miejscu...

Źródło: Bannai, H., et al., Dissection of Local Ca2+ Signals in Cultured Cells by Membrane-targeted Ca2+ Indicators. J. Vis. Exp. (2019 rok)Film demonstruje obrazowanie fluorescencyjne w celu obserwacji specyficznej dla przedziałów spontanicznej dynamiki wapnia w astrocytach poprzez sekwencyjne monitorowanie wrażliwych na wapń białek zlokalizowanych na błonie plazmatycznej i retikulum endoplazmatycznym.

Źródło: Marinello, M., et al. Charakterystyka połączeń nerwowo-mięśniowych u myszy za pomocą połączonej mikroskopii konfokalnej i superrozdzielczej. J. Vis. Exp. (2021)Ten film przedstawia przygotowanie, barwienie immunologiczne i obrazowanie połączeń nerwowo-mięśniowych w tkance mięśniowej szczura przy użyciu mikroskopii konfokalnej i superrozdzielczej do wizualizacji i analizy struktur presynaptycznych i postsynaptycznych.

Źródło: Chiu, S. i in. Obrazowanie rezonansu magnetycznego z kontrastem fazowym w tętnicy szyjnej wspólnej szczura. J. Vis. Exp. (2018). Ten film przedstawia obrazowanie metodą rezonansu magnetycznego z kontrastem fazowym (PC-MRI) w celu pomiaru przepływu krwi w tętnicy szyjnej wspólnej szczura. Po zabezpieczeniu znieczulonego szczura na łóżku MRI i zapewnieniu stabilnych parametrów fizjologicznych, tętnica szyjna wspólna jest skanowana w celu uzyskania obrazów w określonych odstępach czasu.

Źródło: Hage, B. D. et. al., Funkcjonalne przezczaszkowe USG Dopplera do monitorowania przepływu krwi w mózgu. J. Vis. exp. (2021) Ten film pokazuje zastosowanie ultrasonografii dopplerowskiej jako funkcjonalnej narzędzie do obrazowania do pomiaru prędkości przepływu krwi w mózgu lub CBFV w czasie rzeczywistym. Podkreśla, w jaki sposób zmiany częstotliwości w tętnicy środkowej mózgu podczas zadań takich jak wstrzymywanie oddechu ujawniają zmiany w CBFV, oferując wgląd w aktywność mózgu i...

Umieść głowę pacjenta wewnątrz cewki o częstotliwości radiowej lub RF urządzenia do obrazowania metodą rezonansu magnetycznego lub MRI. Zainicjuj angiografię rezonansu magnetycznego czasu przelotu lub TOF MRA, nieinwazyjną technikę wizualizacji naczyń krwionośnych. Wybierz wycinek tkanki do obrazowania, aby uwidocznić tętnice i żyły. Zastosuj impuls RF, aby wzbudzić protony w wybranym wycinku obrazu. Protony te uwalniają energię, która jest wykrywana jako sygnał MR. Wielokrotne stosowanie...

Przestrzenie okołonaczyniowe (PVS) to wypełnione płynem przestrzenie wokół naczyń krwionośnych mózgu biorących udział w drenażu płynów. Aby zbadać zmiany w PVS podczas udaru małego naczynia, należy wykonać rezonans magnetyczny (MRI) obszaru zwojów podstawy mózgu pacjenta. Protokół obrazowania obejmuje sekwencje szybkiego echa spinowego i odzysku inwersji tłumionej płynem (T2-zależnych) od fluktuacji (FLAIR). Obrazowanie T2-zależne zwiększa kontrast między PVS wypełnionym płynem...

Source: Nishimura, C. Kwantyfikacja architektury naczyń mózgowych za pomocą mikroskopii dwufotonowej w mysim modelu zapalenia nerwów wywołanego wirusem HIV. J. Vis. Exp. (2016). Ten film pokazuje wizualizację in vivo naczyń włosowatych kory mózgowej myszy przy użyciu mikroskopii dwufotonowej. Przedstawiono w nim etapy wstrzykiwania barwnika fluorescencyjnego znieczulonej myszy z cienkim oknem korowym czaszki, przygotowywania zestawu do obrazowania i uzyskiwania szczegółowych obrazów struktur...

Umieść pacjenta ze zwężeniem tętnicy szyjnej wewnętrznej, stanem charakteryzującym się zwężeniem tętnicy szyjnej wewnętrznej, na stole do obrazowania do cyfrowej angiografii subtrakcyjnej (DSA). Włóż angiocewnik do tętnicy szyjnej wspólnej na czwartym poziomie kręgu szyjnego. Wykonaj zdjęcie rentgenowskie przed kontrastem, aby zarejestrować struktury tła, takie jak kości i tkanki miękkie, za pomocą promieniowania rentgenowskiego. Podać Jodowy środek kontrastowy do tętnicy szyjnej. Środek...

Zacznij od ludzkiego pacjenta z zapaleniem naczyń mózgowych, które powoduje stan zapalny i zwiększoną przepuszczalność naczyń krwionośnych w mózgu. Umieść głowę pacjenta w cewce o częstotliwości radiowej lub RF urządzenia do obrazowania metodą rezonansu magnetycznego lub MRI. Zainicjuj angiografię rezonansu magnetycznego lub MRA, która wykorzystuje impulsy RF do obrazowania przepływu krwi. Protony w przepływającej krwi generują silne sygnały, sprawiając, że naczynia krwionośne wydają się jasne,...

Źródło: Tan, Z., et al., Budowa i zastosowanie atlasu przepływu krwi w mózgu opartym na regionie funkcjonalnym z wykorzystaniem rezonansu magnetycznego i znakowania wirowania tętnic. J. Vis. Exp. (2024). Ten film przedstawia metodę konstruowania atlasu przepływu krwi w mózgu poprzez integrację danych z rezonansu magnetycznego lub znakowania MRI-spin tętnicy z segmentowanymi obszarami mózgu, wizualizację wzorców przepływu krwi i ilościowe określanie poziomów przepływu w obszarach funkcjonalnych.

Źródło: Kim, D., et. al. Połączone obrazowanie fluorescencyjne w bliskiej podczerwieni i mikrotomografia komputerowa do bezpośredniej wizualizacji zakrzepowej choroby zakrzepowo-zatorowej mózgu. J. Vis. Exp. (2016)Ten film przedstawia wizualizację skrzepliny mózgowej u myszy za pomocą obrazowania mikrotomografii komputerowej (mikro-CT). Mysi model zakrzepliny mózgowej jest wstrzykiwany z nanocząstkami złota ukierunkowanymi na fibrynę, działającymi jako środek kontrastujący. Mysz jest...

Źródło: Giustetto, P., et. al., Nieinwazyjne miąższowe, naczyniowe i metaboliczne ultrasonografie o wysokiej częstotliwości oraz fotoakustyczne obrazowanie głębokiego mózgu szczura. J. Vis. Exp. (2015)W tym filmie pokazujemy zastosowanie ultradźwięków o wysokiej częstotliwości i obrazowania fotoakustycznego do badania układu naczyniowego i zawartości hemoglobiny w mózgu szczura. Metoda ta zapewnia szczegółowy wgląd w perfuzję mózgową i natlenienie krwi, umożliwiając nieinwazyjną analizę...

Źródło: Kalva, S. K., i wsp., Pulsacyjna tomografia fotoakustyczna oparta na diodach laserowych do monitorowania wymywania i wypłukiwania barwnika w unaczynieniu kory mózgowej szczura. J. Vis. Exp. (2019)Ten film przedstawia procedurę wykorzystania obrazowania fotoakustycznego do obserwacji zmian w naczyniach korowych znieczulonego szczura. Proces obejmuje obrazowanie bazowe, wstrzykiwanie barwnika oraz analizę wchłaniania i klirensu barwnika podczas wymywania i wymowywania.

Źródło: Menezes Forti, R. et al. Monitorowanie w czasie rzeczywistym pacjentów w stanie neurokrytycznym za pomocą rozproszonych spektroskopii optycznych. J. Vis. Exp. (2020)Ten film demonstruje zastosowanie spektroskopii korelacji rozproszonej (DCS) do pomiaru przepływu krwi w mózgu u ludzi. Przedstawiono w nim etapy przygotowania systemu, kalibracji sondy, umieszczenia jej na czole uczestnika, pozyskiwania danych dotyczących rozproszonego światła i analizowania wahań intensywności w celu...

Źródło: Kim, D. E., et al. Połączone obrazowanie fluorescencyjne w bliskiej podczerwieni i mikrotomografia komputerowa do bezpośredniej wizualizacji choroby zakrzepowo-zatorowej mózgu. J. Vis. Exp. (2016)Ten film przedstawia obrazowanie fluorescencyjne w bliskiej podczerwieni (NIRF) w celu wizualizacji skrzeplin w wyciętej tkance mózgowej znakowanej sondą specyficzną dla fibryny. Światło bliskiej podczerwieni pobudza sondę, powodując fluoryzację skrzepliny, umożliwiając wizualizację skrzeplin o...

Źródło: Villaseñor, R i Collin. L. Obrazowanie konfokalne bariery krew-mózg w wysokiej rozdzielczości: obrazowanie, rekonstrukcja 3D i kwantyfikacja transcytozy. J. Vis. Exp. (2017)Ten film przedstawia obrazowanie 3D w wysokiej rozdzielczości bariery krew-mózg (BBB) przy użyciu mikroskopii konfokalnej, pokazując wycinki mózgu myszy barwione przeciwciałami w celu analizy składników BBB i struktur wewnątrzkomórkowych, mających zastosowanie do badania homeostazy mózgu, interakcji...

Źródło: Sweeney, A. M., et al. Obrazowanie in vivo transportu płynu mózgowo-rdzeniowego przez nienaruszoną czaszkę myszy przy użyciu makroskopii fluorescencyjnej. J. Vis. Exp. (2019)Ten film przedstawia proces wizualizacji przepływu płynu mózgowo-rdzeniowego (CSF) w mózgu myszy za pomocą obrazowania fluorescencyjnego. Znacznik fluorescencyjny jest wstrzykiwany do cisterna magna (CM), umożliwiając śledzenie jego ruchu za pomocą płynu mózgowo-rdzeniowego przez przestrzenie podpajęczynówkowe i...

Źródło: Breid, S., et. al. Obrazowanie bioluminescencyjne zapalenia układu nerwowego u myszy transgenicznych po obwodowej inokulacji włókienek alfa-synukleiny. J. Vis. Exp. (2017)Ten film demonstruje obrazowanie bioluminescencyjne zapalenia układu nerwowego u myszy transgenicznych, prezentując reakcje lucyferazy-lucyferyny w aktywowanych astrocytach. Protokół umożliwia nieinwazyjną kwantyfikację aktywacji astrocytarnej, wspomagając badania nad zapaleniem OUN i skutecznością terapeutyczną.

Źródło: Nyström, S., et al., Obrazowanie tkanek amyloidowych wybarwionych luminescencyjnymi sprzężonymi oligotiofenami za pomocą hiperspektralnej mikroskopii konfokalnej i obrazowania czasu życia fluorescencji. J. Vis. Exp. (2017). Ten film przedstawia analizę struktur amyloidowych za pomocą mikroskopii obrazowania fluorescencji (FLIM), przy użyciu barwnika hFTAA w celu ujawnienia zwartych rdzeni jako niebieskich/zielonych i niestabilnych peryferii jako czerwonych/żółtych na obrazach...

Źródło: Bosco, A., et al. In Vivo Dynamika aktywacji mikrogleju siatkówki podczas neurodegeneracji: konfokalne obrazowanie oftalmoskopowe i morfometria komórkowa w jaskrze myszy. J. Vis. Exp. (2015) Ten film przedstawia obrazowanie in vivo mikrogleju siatkówki w mysim modelu jaskry. Transgeniczna mysz z mikroglejem siatkówki wykazującym ekspresję białka fluorescencyjnego jest umieszczana pod oftalmoskopem. Oświetlenie w podczerwieni służy do zlokalizowania głowy nerwu wzrokowego (ONH), a...

Źródło: Maiti, P. et. al.,. Znakowanie i obrazowanie blaszek amyloidowych w tkance mózgowej przy użyciu naturalnej kurkuminy polifenolowej. J. Vis. exp. (2019)Ten film przedstawia procedurę obrazowania blaszek beta-amyloidowych w skrawkach tkanki mózgowej za pomocą znakowania immunologicznego i barwienia kurkuminą. Znakowanie immunologiczne zapewnia swoistość dla beta-amyloidu, podczas gdy kurkumina selektywnie wiąże włókienka bogate w β arkusze, poprawiając wizualizację. Kolokalizacja...

Umieść głowę pacjenta ze stwardnieniem rozsianym wewnątrz cewki o częstotliwości radiowej lub RF aparatu do rezonansu magnetycznego. Rozpocznij odzyskiwanie inwersji osłabionej płynem lub obrazowanie FLAIR. Wybierz wycinek mózgu zawierający zmiany w pobliżu obszarów bogatych w płyn mózgowo-rdzeniowy. System generuje silne pole magnetyczne, wyrównując protony w zdrowej i uszkodzonej tkance mózgowej oraz płyn mózgowo-rdzeniowy wzdłuż swojego kierunku, tworząc namagnesowanie netto. Zastosuj...

Źródło: Zaeck, L., et al. Obrazowanie 3D w wysokiej rozdzielczości zakażenia wirusem wścieklizny w tkance mózgowej oczyszczonej rozpuszczalnikiem. J. Vis. exp. (2019). Ten film pokazuje proces przygotowania i obrazowania tkanki mózgowej myszy zakażonej wirusem wścieklizny (RABV) w celu oceny postępu infekcji. Przedstawiono w nim kluczowe etapy, w tym barwienie tkanek za pomocą markerów fluorescencyjnych, odwodnienie, oczyszczanie i montaż do konfokalnej laserowej mikroskopii skaningowej,...

Źródło: Bisht, K., et. al. Korelacyjne światło i mikroskopia elektronowa w celu zbadania interakcji mikrogleju z blaszkami β-amyloidowymi. J. vis. exp. (2016) Ten film przedstawia wizualizację i mapowanie płytek amyloidowych znakowanych metoksy-X04 w mózgu myszy z chorobą Alzheimera sekcje wykorzystujące mikroskopię fluorescencyjną i jasne pole, umożliwiające precyzyjną korelację blaszek ze strukturami anatomicznymi w celu badania patologii choroby Alzheimera.

Źródło: Ouyang, Y., i wsp. Jednoczesne obrazowanie PET/MRI podczas niedotlenienia mózgu myszy. J. Vis. Exp. (2015)Ten film przedstawia technikę oceny uszkodzenia niedotlenienia mózgu za pomocą jednoczesnej pozytonowej tomografii emisyjnej (PET) i rezonansu magnetycznego (MRI). Znieczulona mysz przechodzi podwiązanie wspólnej tętnicy szyjnej (CCA), zmniejszając przepływ krwi do jednej półkuli mózgu i predysponując ją do uszkodzenia wywołanego niedotlenieniem. Obrazowanie PET i MRI ocenia...

Źródło: Krishnamurthy, K. i wsp. Fluorescencyjny pomiar funkcji synaptycznych w czasie rzeczywistym w modelach stwardnienia zanikowego bocznego. J. Vis. Exp. (2021)Ten film demonstruje obrazowanie wapnia w czasie rzeczywistym w celu monitorowania aktywności synaptycznej w neuronach z mutacją ALS wyrażających genetycznie kodowany bioczujnik wapnia. Przedstawiono w nim etapy przygotowania neuronów do obrazowania, stymulowania dynamiki wapnia i rejestrowania fluorescencji w celu pomiaru zmian w...

Źródło: Ciraku, L., et. al. Model wycinka mózgu ex vivo do badania i celowania we wzrost guza przerzutowego do mózgu raka piersi. J. Vis. Exp. (2021). Ten film pokazuje obrazowanie komórek nowotworowych wyrażających lucyferazy w organotypowym wycinku mózgu myszy. Lucyferyna jest dodawana do pożywki, a płytkę umieszcza się w komorze systemu obrazowania in vivo. Parametry przechwytywania obrazu są dostosowywane, a kształt i rozmiar guza są definiowane. Następnie rejestrowane są sygnały...

Źródło: Arango-Lievano, M. et. al., Podłużne obrazowanie in vivo naczyń mózgowych: znaczenie dla chorób OUN. J. Vis. Exp. (2016)Ten film demonstruje obrazowanie dwufotonowe in vivo w celu wizualizacji znakowanych fluorescencyjnie blaszek amyloidowych i naczyń mózgowych. Niebieska fluorescencja oznacza blaszki miażdżycowe, podczas gdy zielona fluorescencja podkreśla naczynia krwionośne mózgu. Mapa 3D obszaru zainteresowania i obrazowanie mozaikowe o wysokiej rozdzielczości ujawniają szczegółowe...

Źródło: Clark, A.J., et al. Obrazowanie bioluminescencyjne immunokompetentnego modelu zwierzęcego glejaka. J. Vis. Exp. (2016)Ten film przedstawia obrazowanie bioluminescencyjne w celu śledzenia progresji glejaka w immunokompetentnym modelu myszy, przy użyciu komórek nowotworowych eksprymujących lucyferazy i lucyferyny do nieinwazyjnego ilościowego określenia wzrostu guza.

Źródło: Parker, J. J., et al. Organtypowy model hodowli plastrów glejaka ludzkiego do badania migracji komórek nowotworowych i specyficznych dla pacjenta skutków leków przeciwinwazyjnych. J. Vis. Exp. (2017)Ten film przedstawia obrazowanie wycinków tkanki glejaka wykazujących ekspresję białka zielonej fluorescencji (GFP) za pomocą mikroskopii konfokalnej. Obrazy o wysokiej rozdzielczości są rejestrowane w stałych odstępach czasu w celu śledzenia ruchu i kierunku komórek nowotworowych.

Źródło: Lutz, D., et.al. Ocena parametrów neuroplastyczności ultrastrukturalnej po transdukcji in utero rozwijającego się mózgu myszy i rdzenia kręgowego. J. Vis. Exp. (2019). Ten film demonstruje przygotowanie i analizę za pomocą transmisyjnej mikroskopii elektronowej (TEM) wycinka mózgu szczeniaka myszy. Protokół rozpoczyna się od tkanki utrwalonej tetratlenkiem osmu w żywicy, a następnie precyzyjnego przycinania w celu wyizolowania obszaru zainteresowania i ultramikrotomii w celu...

Źródło: Inal, M. A. et. al., wsteczne śledzenie embrionalnych neuronów ruchowych Drosophila przy użyciu lipofilowych barwników fluorescencyjnych. J. Vis. Exp. (2020)Ten film pokazuje metodę wstecznego znakowania neuronów ruchowych Drosophila za pomocą barwników lipofilowych. Barwnik dostaje się do aksonu, przemieszcza się wstecz i oznacza neurony na zielono, umożliwiając szczegółową wizualizację ich morfologii i projekcji pod mikroskopem konfokalnym.

Źródło: Flatz, W. H. et al. In vivo Analiza morfometryczna ludzkich nerwów czaszkowych za pomocą rezonansu magnetycznego Uszy Menière'a w chorobie i uszy słyszenia prawidłowego. J. Vis. exp. (2018). Ten film pokazuje zastosowanie MRI do analizy morfologii nerwów czaszkowych w uszach pacjentów cierpiących na przewlekłe zaburzenie ucha wewnętrznego. Przedstawiono w nim etapy wykonywania skanu MRI w silnym polu magnetycznym u pacjenta, rekonstrukcję obrazów przekroju poprzecznego 3D nerwów...

Źródło: Braeckman, K., et. al. Zaawansowane obrazowanie dyfuzyjne w hipokampie szczurów z łagodnym urazowym uszkodzeniem mózgu. J. Vis. exp. (2019)Ten film demonstruje zastosowanie obrazowania dyfuzyjnego do oceny zmiany mikrostrukturalne w hipokampie szczura po łagodnym urazowym uszkodzeniu mózgu (mTBI), podkreślające uszkodzenie aksonów poprzez precyzyjne skanowanie MRI i analizę dyfuzji.

Źródło: Papadelis, C., et wsp., Międzynapadowe oscylacje wysokiej częstotliwości wykryte za pomocą jednoczesnej magnetoencefalografii i elektroencefalografii jako biomarker padaczki dziecięcej. J. Vis. exp.{{TAG_ 27}} (2016). Ten film demonstruje metodę wykorzystania zapisów elektroencefalografii (EEG) i magnetoencefalografii (MEG) do identyfikacji międzynapadowych wyładowań padaczkowych (IED) i oscylacji o wysokiej częstotliwości (HFO) w celu zlokalizowania obszarów mózgu podatnych na napady.

Źródło: Huang, Y. et. al., Podłużne monitorowanie morfologiczne i fizjologiczne trójwymiarowych sferoid nowotworowych za pomocą optycznej tomografii koherentnej. J. Vis. Exp. (2019)Ten film demonstruje zastosowanie koherencji optycznej tomografia (OCT) do monitorowania sferoid guza w płytce wielodołkowej poprzez przechwytywanie obrazów przekroju poprzecznego o wysokiej rozdzielczości. Analizując odbicia światła od struktur komórkowych, OCT konstruuje modele 3D w celu oceny cech morfologicznych,...

Źródło: Lahne, M., et.al. Hodowla dorosłych transgenicznych eksplantatów siatkówki danio pręgowanego do obrazowania żywych komórek za pomocą mikroskopii wielofotonowej. J. Vis. Exp. (2017)Ten film pokazuje obrazowanie żywych komórek migracji jądrowej gleju Mullera w eksplantatach siatkówki danio pręgowanego osadzonych w agarozie po uszkodzeniu fotoreceptorów wywołanym światłem. Czynnik martwicy nowotworu alfa (TNF-α) uwalniany przez uszkodzone fotoreceptory aktywuje komórki glejowe Mullera,...

Źródło: Bénard, M., i wsp. Ex vivo Obrazowanie migracji komórek ziarnistych móżdżku po urodzeniu za pomocą makroskopii konfokalnej. J. Vis. Exp. (2015)Ten film demonstruje konfokalną metodę makroskopową do śledzenia ex vivo migracji komórek ziarnistych w wycinkach móżdżku z postnatalnych mózgów szczurów.

Źródło: Daynac, M., et. al. Sortowanie komórek nerwowych komórek macierzystych i progenitorowych ze strefy podkomorowej dorosłej myszy i obrazowanie na żywo ich dynamiki cyklu komórkowego. J. Vis. Exp. (2015)Ten film demonstruje obrazowanie poklatkowe nerwowych komórek macierzystych (NSC) z mózgu transgenicznej myszy przy użyciu konfokalnego laserowego mikroskopu skaningowego. NSC fluoryzują na czerwono podczas fazy G1 i są niefluorescencyjne w innych fazach cyklu komórkowego. Przylegającą...

Źródło: Williams, A. L., et al. Wielofotonowe obrazowanie poklatkowe w celu wizualizacji rozwoju w czasie rzeczywistym: wizualizacja migrujących komórek grzebienia nerwowego w zarodkach danio pręgowanego. J. Vis. Exp. (2017)Ten film przedstawia protokół obrazowania poklatkowego wielofotonowego w celu wizualizacji migracji komórek grzebienia nerwowego w zarodku danio pręgowanego w czasie rzeczywistym z wysoką rozdzielczością.

Źródło: Jeong, S. Wizualizacja wzorca projekcji aksonalnej embrionalnych neuronów ruchowych u Drosophila. J. Vis. Exp. (2017)Ten film pokazuje wizualizację projekcji aksonalnych w zarodkach Drosophila. Znakowanie immunologiczne neuronów ruchowych, precyzyjna sekcja w celu odsłonięcia struktur neuronalnych oraz mikroskopia kontrastowa z różnicową interferencją łącznie ujawniają szczegółową architekturę neuronów, podkreślając wzorce projekcji aksonalnej.

Źródło: Canovic, E. P., et. al., Charakterystyka wieloskalowych właściwości mechanicznych tkanki mózgowej za pomocą mikroskopii sił atomowych, wgłębień udarowych i reometrii. J. Vis. Exp. (2016)Film demonstruje użycie wgłębień udarowych do pomiaru właściwości mechanicznych uwodnionej tkanki mózgowej myszy, w tym sztywności, rozpraszania energii i tłumienia, poprzez analizę przemieszczenia sondy i prędkości.

Źródło: Portela-Lomba, M., et. al. Kokultura aksotomizowanych neuronów zwojowych siatkówki szczura z glejem osłonki węchowej, jako model in vitro regeneracji aksonów u dorosłych. J. Vis. Exp. (2020). Ten film przedstawia obrazowanie i kwantyfikację regeneracji aksonów w aksotomizowanych neuronach zwojowych siatkówki szczura (RGN) współhodowanych z unieśmiertelnionymi ludzkimi komórkami glejowymi otaczającymi węch. RGN są znakowane immunologicznie, z czerwonymi somi i zielonymi aksonami. Obrazy...

Źródło: Changou, C. A., et. al. Obrazy na żywo transportu białka GLUT4 w pierwotnych neuronach podwzgórza myszy przy użyciu mikroskopii dekonwolucyjnej. J. Vis. Exp. (2017). Ten film przedstawia obrazowanie indukowanej insuliną translokacji GLUT4 w neuronach podwzgórza, wykorzystując mikroskopię dekonwolucyjną do uchwycenia i analizy dynamiki transportu GFP-GLUT4 w wysokiej rozdzielczości.

Źródło: Kennedy, L. H., et. al. Wizualizacja i obrazowanie na żywo organelli oligodendrocytów w organotypowych wycinkach mózgu przy użyciu wirusa związanego z adenowirusem i mikroskopii konfokalnej. J. Vis. Exp. (2017)Ten film pokazuje obrazowanie mitochondriów oligodendrocytów w organotypowych wycinkach mózgu myszy. Plaster umieszcza się w komorze kąpielowej z ciągłą cyrkulacją płynu i kontrolowaną temperaturą. Po ustawieniu różnych parametrów mikroskopu konfokalnego wykonywane są obrazy...

Źródło: Etienne, F. i wsp. Dwufotonowe obrazowanie przyciągania procesów mikroglejowych do ATP lub serotoniny w ostrych wycinkach mózgu. J. Vis. Exp. (2019)Ten film demonstruje zastosowanie mikroskopii dwufotonowej do badania przyciągania procesów mikroglejowych w kierunku wstrzykniętego związku w wycinkach mózgu. Zawiera przegląd przygotowywania wycinków mózgu myszy, wstrzykiwania związku testowego chemoatraktantu i obrazowania znakowanego fluorescencyjnie mikrogleju w celu wizualizacji ich...

Źródło: Wang, Z., et al. Przezźrenicowe dwufotonowe obrazowanie in vivo siatkówki myszy. J. Vis. Exp. (2021). Ten film przedstawia technikę obrazowania siatkówki in vivo przy użyciu mikroskopii dwufotonowej. Znieczulone myszy są przygotowywane do obrazowania poprzez zabezpieczenie głowy, nałożenie lubrykantu do oczu i umieszczenie szkiełka nakrywkowego na oku. Komórki zwojowe siatkówki (RGC) eksprymujące białka fluorescencyjne są najpierw wizualizowane za pomocą epifluorescencji w celu...

Źródło: Bisht, K., et al. Precyzyjne mapowanie mózgu w celu wykonywania powtarzalnych obrazowań in vivo dynamiki neuroimmunologicznej u myszy. J. Vis. Exp. (2020)Ten film demonstruje obrazowanie fluorescencyjne dynamiki neuroimmunologicznej u transgenicznej myszy z implantem czaszki. Stabilność naczyniowa i neuronalna jest obrazowana wraz z dynamicznymi zmianami mikrogleju, odzwierciedlającymi odpowiedzi immunologiczne na aktywność neuronów.

Źródło: Shannonhouse, J., et al. In vivo Obrazowanie wapniowe zespołów neuronalnych w sieciach pierwotnych neuronów czuciowych w nienaruszonych zwojach korzenia grzbietowego. J. Vis. Exp. (2023). Film przedstawia technikę obrazowania wapnia in vivo w celu monitorowania aktywności neuronalnej w zwojach korzenia grzbietowego (DRG) myszy transgenicznej. Neurony DRG wyrażają wskaźnik wapnia, który zwiększa intensywność fluorescencji po związaniu się z wapniem. Bodźce mechaniczne lub termiczne...

Źródło: Hellerman, M. B., et al. Obrazowanie na żywo Drosophila Oko poczwarki. J. Vis. exp. (2015){{TAG_ 28}}Film demonstruje technikę obrazowania na żywo do badania wzorców oczu u poczwarki Drosophila melanogaster. Markery znakowane zielonym białkiem fluorescencyjnym (GFP) umożliwiają wizualizację organizacji i różnicowania komórek podczas tworzenia rozwijającej się struktury oka.

Źródło: Ulivi, A. F., et. al. Podłużne dwufotonowe obrazowanie grzbietowego hipokampa CA1 u żywych myszy. J. Vis. exp. (2019) Ten film pokazuje podłużne obrazowanie dwufotonowe znakowanych fluorescencyjnie neuronów piramidowych u żywej myszy, prezentacja preparatu, wyrównania kaniuli oraz obrazowania dendrytów i kolców dendrytycznych w celu zbadania struktury neuronalnej w regionie CA1 hipokampa.

Źródło: Gómez-Villafuertes, R., et. al., Obrazowanie na żywo, a następnie śledzenie pojedynczych komórek w celu monitorowania biologii komórki i progresji linii wielu populacji neuronów. J. vis. exp. (2017){{}} . Film przedstawia proces przygotowania, obrazowania i śledzenia dorosłych nerwowych komórek macierzystych w czasie rzeczywistym w celu zbadania zachowań komórek, w tym podziału i różnicowania.

Źródło: Volpe, B. A., et al. Test ablacji i regeneracji laserowej oparty na mikroskopie konfokalnym w komórkach międzynerwowych danio pręgowanego. J. vis. exp.{{TAG_ 31}} (2020) Ten film pokazuje monitorowanie odzyskiwania komórek międzynerwowych u danio pręgowanego za pomocą mikroskopii konfokalnej, śledzenie śmierci i naprawy komórek za pomocą poklatkowego obrazowania fluorescencyjnego.

Źródło: Fried, D. E., Gulbransen, B. D. In situ ca2+ Obrazowanie jelitowego układu nerwowego. J. Vis. Exp.Exp. (2015)Ten film pokazuje wapń obrazowanie w celu wizualizacji i analizy aktywności neuronów jelitowych i gleju w preparatach splotu mięśniowo-mięśniowego okrężnicy myszy.

Source: Jagodzińska, J., et. al., optyczna tomografia koherentna: obrazowanie komórek zwojowych siatkówki myszy . J. Vis. Exp. (2017) W tym filmie pokazujemy zastosowanie optycznej koherentnej tomografii w domenie spektralnej (SD-OCT) do obrazowania warstw siatkówki i oceny zmian strukturalnych w genetycznie zmodyfikowanym modelu myszy z neuropatią nerwu wzrokowego.

Źródło: Chaney, A. M., et.al. Obrazowanie zapalenia nerwów metodą PET za pomocą [11C]DPA-713 w mysim modelu udaru niedokrwiennego. J. Vis. exp. (2018). Ten film demonstruje technikę obrazowania in vivo zapalenia nerwów w mysim modelu udaru niedokrwiennego przy użyciu radioznacznika specyficznego dla TSPO. Po wstrzyknięciu radioznacznik wiąże się z TSPO, białkiem znajdującym się na zewnętrznej błonie mitochondrialnej i ulegającym nadekspresji w aktywowanych komórkach odpornościowych. Skaner...

Źródło: Choi, J. P. et al. Obrazowanie indukcji i mikrotomografii komputerowej malformacji jamistych mózgu na modelu mysim. J. vis. exp. ( 2017)Ten film pokazuje zastosowanie obrazowania mikro-CT do wizualizacji zmian w malformacji jamistych mózgu (CCM) w mózgu myszy. Szczegółowo opisano w nim etapy przygotowania próbki, obrazowania i rekonstrukcji obrazu 3D w celu oceny gęstości i lokalizacji zmian CCM w tkance mózgowej.

Źródło: Schmitz, K., et al., Bioluminescencja i obrazowanie w bliskiej podczerwieni zapalenia nerwu wzrokowego i mózgu w modelu EAE stwardnienia rozsianego u myszy. J. Vis. Exp. (2017).Ten film pokazuje metodę wizualizacji i monitorowania eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia kręgowego lub zapalenia nerwu wzrokowego wywołanego EAE za pomocą obrazowanie bioluminescencyjne. Obejmuje to pozycjonowanie myszy, wstrzykiwanie odczynnika i przechwytywanie sekwencyjnych...

Źródło: Ishimoto, H. et. al.,, Obrazowanie wapnia ex vivo do wizualizacji reakcji mózgu na sygnalizację endokrynologiczną u Drosophila. J. Vis. exp. (2018) Ten film przedstawia obrazowanie wapnia do badaniaDrosophila reakcje mózgu na neuropeptydy. Neurony wyrażające fluorescencyjny wskaźnik wapnia ujawniają wewnątrzkomórkową dynamikę wapnia i funkcjonalne odpowiedzi na cząsteczki sygnałowe.

Źródło: Al Omran, A. J., et al. Obrazowanie na żywo rzęsek wyściółki w komorach bocznych mózgu myszy. J. Vis. exp. (2015). Ten film demonstruje technikę obrazowania na żywo przy użyciu mikroskopii kontrastu interferencyjnego (DIC) do obserwacji bicia rzęsek wyściółki w strzałkowych odcinkach mózgu myszy. Rzęski wyściółki napędzają płyn mózgowo-rdzeniowy (CSF), a ich aktywność jest rejestrowana w sekcjach mózgu utrzymywanych w pożywce bogatej w składniki odżywcze i obrazowanych w komorze o...

Źródło: Pigazzini, M. L., et. al. Charakterystyka struktur amyloidowych w starzeniu się C. Elegans Korzystanie z obrazowania czasu życia fluorescencji. J. Vis. exp. (2020). Ten film demonstruje zastosowanie mikroskopii obrazowania czasu życia fluorescencji (FLIM) do oceny agregacji białek polyQ w neuronach C. elegans, porównując robaki kontrolne i robaki z niedoborem białka opiekuńczego. Zwiększona agregacja u robaków z niedoborem białka opiekuńczego sprzyja przenoszeniu energii między...

Źródło: Landeira, BS, i wsp., Obrazowanie na żywo pierwotnych komórek kory mózgowej przy użyciu systemu hodowli 2D. J. Vis. Exp. (2017)Film demonstruje zastosowanie obrazowania poklatkowego do śledzenia znakowanych fluorescencyjnie progenitorów kory mózgowej, monitorowania ich podziału i różnicowania oraz badania rozwoju linii w pierwotnych komórkach kory...

Źródło: Lee, H. et. al., Udane obrazowanie wapnia in vivo za pomocą zminiaturyzowanego mikroskopu montowanego na głowie w ciele migdałowatym swobodnie zachowującej się myszy. J. Vis. Exp. (2020)Ten film pokazuje obrazowanie wapnia in vivo u myszy przy użyciu gradientowego współczynnika załamania światła lub soczewki GRIN i zminiaturyzowanego mikroskopu. Konfiguracja łączy mocowanie głowy w beztarciowym mobilnym systemie klatek, stymulując neurony i wyzwalając napływ jonów wapnia. Soczewka GRIN...

Źródło: Thapa, R., et. al., Stereotaktyczne wstrzyknięcie wirusa i implantacja soczewki o indeksie gradientowym dla głębokiego mózgu In vivo Obrazowanie wapnia. J. Vis. Exp. (2021)Film demonstruje obrazowanie wapnia w czasie rzeczywistym za pomocą miniskopu u transdukowanej myszy, korelując aktywność neuronów z zachowaniem.

Źródło: Moore, J. D., et al. Juxtacellular Monitoring and Localization of Single Neurons within Sub-cortical Brain Structures of Alert, Head-restricted Rats. J. Vis. Exp. (2015)Ten film pokazuje metodę zestawiania nagrań komórkowych i barwienia u skrępowanego, przytomnego szczura. Zabieg polega na rejestrowaniu sygnałów z neuronów i wstrzykiwaniu barwnika w celu precyzyjnej lokalizacji miejsca zapisu. Technika ta pozwala na dokładne odwzorowanie aktywności neuronalnej na anatomiczną strukturę...

Źródło: Schramm, P. et al. Obrazowanie in vivo w pełni aktywnej tkanki mózgowej u wybudzonych larw danio pręgowanego i osobników młodocianych poprzez usunięcie czaszki i skóry. J. Vis. Exp. (2021)Ten film pokazuje obrazowanie in vivo neuronów móżdżku u transgenicznych larw danio pręgowanego, które wyrażają białka fluorescencyjne w neuronach Purkinjego. Proces polega na znieczuleniu larw, unieruchomieniu ich w agarozie i ostrożnym usunięciu pigmentowanej skóry w celu zwiększenia penetracji...

Źródło: Ing-Esteves, S. & Lefebvre, J. L. Obrazowanie poklatkowe arboryzacji neuronów przy użyciu rzadkiego znakowania wirusem związanym z adenowirusem genetycznie ukierunkowanych populacji komórek siatkówki. J. Vis. Exp. (2021)Ten film demonstruje zastosowanie mikroskopii konfokalnej do wizualizacji dynamiki dendrytycznej w żywych eksplantatach siatkówki myszy. Przedstawiono w nim etapy stabilizacji siatkówki pod mikroskopem konfokalnym, wykonywania obrazowania epifluorescencyjnego w celu...

Źródło: Kamei, R., et al., In Vivo Chronic Two-Photon Imaging of Microglia in the Mouse Hippocampus. J. Vis. Exp. (2022)Film przedstawia proces konfiguracji i obrazowania do mikroskopii dwufotonowej in vivo dynamiki mikrogleju w hipokampie CA1 (Cornu ammonis 1) i zakręcie zębatym, zapewniając optymalne wyrównanie optyczne i ocenę integralności strukturalnej.

Źródło: Łukasz, D., et al. Obrazowanie in vivo wapnia komórek rzęsatych linii bocznej u larw danio pręgowanego. J. Vis. Exp. (2018)Ten film pokazuje obrazowanie na żywo napływu wapnia do komórek rzęsatych linii bocznej sparaliżowanej transgenicznej larwy danio pręgowanego przy użyciu mikroskopu konfokalnego. Mechaniczna stymulacja wiązek włosów za pomocą impulsów płynu indukuje wnikanie wapnia przez kanały mechanotransdukcji i kanały bramkowane napięciem, co jest wizualizowane w czasie...

Źródło: Louth, E. L., i inni. Obrazowanie neuronów w grubych odcinkach mózgu metodą Golgiego-Coxa. J. Vis. Exp. (2017)Ten film demonstruje obrazowanie neuronów w grubym fragmencie mózgu zabarwionym metodą Golgiego-Coxa, ustawiając górną i dolną granicę ostrości oraz rejestrując nakładające się obrazy. Obrazowanych jest wiele lokalizacji, aby zapewnić szczegółowe projekcje neuronów, które są łączone w celu stworzenia reprezentacji 3D.

Źródło: Heredia, D. J., et. al. Obrazowanie ex vivo specyficznej dla komórki sygnalizacji wapniowej w trójdzielnej synapsie przepony myszy. J. Vis. Exp. (2018) Ten film przedstawia obrazowanie fluorescencyjne dynamiki wapnia w połączeniach nerwowo-mięśniowych (NMJ) u transgenicznej myszy wykazującej ekspresję genetycznie kodowanych wskaźników wapnia. NJM jest identyfikowany przez fluorescencyjnie znakowane receptory acetylocholiny w przeponie z nerwem przeponowym . Rozdzielacz obrazu służy do...

Źródło: Pekarek, B. T., et. al., Obrazowanie i kwantyfikacja nienaruszonych dendrytów neuronalnych za pomocą oczyszczania tkanek CLARITY. J. Vis. Exp. (2021)W tym filmie pokazujemy przygotowanie, obrazowanie i analizę oczyszczonego mózgu myszy w celu zbadania dendrytycznych altan dendrytycznych, morfologii kręgosłupa i rozmieszczenia neuronów przy użyciu mikroskopii konfokalnej i technik rekonstrukcji 3D.

Źródło: Refaeli, R., i wsp., Badanie interakcji przestrzennej między astrocytami a neuronami w oczyszczonych mózgach. J. Vis. Exp. (2022) Film przedstawia przygotowanie komora i neuroobrazowanie oczyszczonej tkanki hipokampa myszy przy użyciu mikroskopii dwufotonowej w celu wizualizacji interakcji przestrzennych między fluorescencyjnie znakowanymi astrocytami a neuronami pobudzającymi.

Źródło: Chan, U., et al., wykorzystując elektroporację poporodową in vivo do badania morfologii neuronów ziarnistości móżdżku i rozwoju synaps.J. Vis. Exp. (2021).Ten film przedstawia analizę rozwoju neuronów ziarnistości móżdżku poprzez obrazowanie wstępnie ustalonych wycinków tkanki mózgowej od myszy znakowanych białkiem fluorescencyjnym, Przechwytywanie obrazów stosu Z o wysokiej rozdzielczości za pomocą mikroskopu konfokalnego i pomiar parametrów strukturalnych, w tym długości neurytów,...

Źródło: Maruoka, H., et. al. Jednoczesne obrazowanie dynamiki mikrogleju i aktywności neuronalnej u obudzonych myszy. J. Vis. Exp. (2022) Ten film przedstawia procedurę mikroskopii dwufotonowej do obrazowania aktywności neuronalnej i dynamiki mikrogleju u obudzonej myszy podczas stymulacji wzrokowej, podkreślając stany przejściowe wapnia i interakcje komórkowe.

Źródło: Moye, S. L., et.al. Wizualizacja morfologii astrocytów za pomocą żółtej jonoforezy Lucyfera. J. Vis. Exp. (2019). Ten film demonstruje zastosowanie jonoforezy barwnika fluorescencyjnego do badania morfologii astrocytów w utrwalonych wycinkach mózgu. Szczegółowo opisuje przekłuwanie somy astrocytów elektrodą w celu dostarczenia anionowego, hydrofilowego barwnika do cytoplazmy pod prądem o niskim napięciu, umożliwiając barwnikowi dyfuzję i znakowanie somy i gałęzi. Mikroskopia...

Źródło: Jongbloets, B. C., et al. Wizualizacja aktywności kinazy białkowej A u myszy zachowujących się z głową przy użyciu mikroskopii obrazowania czasu życia fluorescencji dwufotonowej in vivo. J. Vis. Exp. (2019) Ten film demonstruje procedurę mikroskopii obrazowania czasu życia fluorescencji dwufotonowej do wizualizacji aktywności kinazy białkowej A u myszy zachłanających głowę podczas wymuszonej lokomocji.

Źródło: Kwon, J., et al., Spektralna mikroskopia reflektometryczna na mielinowanych aksonach in situ. J. Vis. Exp. (2018) Ten film demonstruje zastosowanie reflektometrii spektralnej z hiperspektralnym mikroskopem konfokalnym do analizy wzorców interferencji i określania mielinowych średnic aksonów w utrwalonych wycinkach tkanki mózgowej.

Zacznij od pacjenta z oponiakiem lub guzem mózgu, umieszczonego w skanerze MRI w celu nieinwazyjnego obrazowania mózgu. Dostosuj skaner, aby uzyskać obrazy strukturalne poszczególnych wycinków mózgu. Zwiększ kontrast, aby poprawić różnicowanie tkanek. Użyj obrazowania współczynnika transferu namagnesowania międzywarstwowego na wycinkach mózgu przy użyciu impulsów o częstotliwości radiowej nieznacznie przesuniętych w stosunku do sygnału MRI. Impulsy dostarczają energię do puli protonów w...

Source: < style='text-decoration:none;' href='https://app.jove.com/v/57546/visualization-of-motor-axon-navigation-and-quantification-of-axon-arborization-in-mouse-embryos-using-light-sheet-fluorescence-microscopy'>Liau, E. S. et al. Wizualizacja motorycznej nawigacji aksonów i kwantyfikacja arboryzacji aksonów w zarodkach myszy za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej za pomocą lekkiej mikroskopii fluorescencyjnej. J. Vis. Exp. (2018). Ten film demonstruje zastosowanie mikroskopii...

Ilościowe mapowanie podatności lub QSM określa ilościowo podatność magnetyczną tkanki mózgowej, co odzwierciedla jej skład komórkowy, taki jak zawartość mieliny. Zacznij od uzyskania danych z rezonansu magnetycznego ex-vivo lub rezonansu magnetycznego nieruchomej półkuli ludzkiego mózgu. Użyj gradientowych pól magnetycznych 3D do namagnesowania tkanki i zbierania sygnałów w wielu punktach czasowych lub echa, aby zredukować szumy tła i artefakty oraz wzmocnić sygnały. Generuj mapy fazowe dla...

Źródło: Feng, Y., et al. Lepkosprężysta charakterystyka fantomów żelatynowych naśladujących tkanki miękkie przy użyciu elastografii wgłębień i rezonansu magnetycznego. J. Vis. Exp. (2022) Ten film przedstawia metodę elastografii rezonansu magnetycznego (MRE) do oceny właściwości lepkosprężystych tkanek poprzez analizę Rozchodzenie się fali ścinającej przez fantom żelatynowy, naśladujące tkankę mózgową. Proces ten polega na generowaniu i wychwytywaniu fal poprzecznych za pomocą rezonansu...

Źródło: Boyer, N. P. et. al., Obrazowanie i analiza transportu neurofilamentów w wyciętym nerwie piszczelowym myszy. J. Vis. exp. (2020) Ten film przedstawia metodę fotoaktywacji fluorescencji do analizy transport neurofilamentów w mielinowanych aksonach nerwów obwodowych. Śledząc fotoaktywowane zielone neurofilamenty znakowane fluoroforem, technika ta dostarcza informacji na temat transportu aksonalnego w chorobach neurodegeneracyjnych.

Źródło: Kulkarni, M. et al. Obrazowanie ca2+ Dynamika w stożku fotoreceptorów zakończeń aksonów siatkówki myszy. J. Vis. Exp. (2015)Ten film demonstruje zastosowanie mikroskopii dwufotonowej do monitorowania dynamiki wapnia w fotoreceptorach czopków transgenicznej siatkówki myszy. Przedstawiono w nim etapy przygotowania wycinków siatkówki, obrazowania biosensorów wapnia opartych na FRET oraz analizy zmian fluorescencji w celu ilościowego określenia poziomu wapnia przy oświetleniu tła i...

Źródło: Nishidate, I., et al. Jednoczesna ocena hemodynamiki mózgu i właściwości rozpraszania światła mózgu szczura In Vivo przy użyciu wielospektralnego obrazowania odbicia rozproszonego. J. Vis. Exp. (2017)Ten film demonstruje zastosowanie wielospektralnego obrazowania odbicia rozproszonego do analizy przepływu krwi w mózgu, poziomu tlenu i zmian struktury tkanek u znieczulonego szczura, zapewniając wgląd w hemodynamikę i morfologię mózgu w różnych warunkach.

Źródło: Van Wonterghem, E., et al. Mikrodysekcja i wizualizacja skaningowej mikroskopii elektronowej myszy z całego mocowania. J. Vis. Exp. (2022)Ten film przedstawia przygotowanie i obrazowanie tkanki splotu naczyniówkowego z mózgu myszy za pomocą skaningowej mikroskopii elektronowej (SEM). Proces obejmuje utrwalanie, odwadnianie i powlekanie tkanki przewodzącą warstwą platyny w celu stabilizacji i przygotowania próbki do obrazowania. SEM rejestruje szczegółowe obrazy komórek nabłonka z...

Źródło: Kato, D. et. al., Ocena i manipulacja aktywnością neuronalną za pomocą dwufotonowej mikroskopii holograficznej. J. Vis. Exp. (2022)Ten film przedstawia technikę obrazowania dwufotonowego w połączeniu z optogenetyką przy użyciu mikroskopii holograficznej. Technika ta, wykorzystująca przestrzenny modulator światła, umożliwia precyzyjną stymulację neuronów polegającą na ekspresji białka wrażliwego na światło czerwone i obrazowanie wapnia przy minimalnym fotouszkodzeniu. Takie podejście...

Źródło: Canovic, E. P., et al. Charakterystyka wieloskalowych właściwości mechanicznych tkanki mózgowej za pomocą mikroskopii sił atomowych, wgłębień udarowych i reometrii. J. Vis. Exp. (2016)Ten film pokazuje zastosowanie mikroskopii sił atomowych (AFM) do pomiaru właściwości lepkosprężystych tkanki mózgowej, w której wspornik ze sferyczną sondą oddziałuje z tkanką i ugina się pod wpływem przyłożonych sił. Wiązka laserowa skierowana na detektor śledzi wspornik w celu zmierzenia głębokości...

Źródło: Canovic, E. P., et al. Charakterystyka wieloskalowych właściwości mechanicznych tkanki mózgowej za pomocą mikroskopii sił atomowych, wgłębień udarowych i reometrii. J. Vis. Exp. (2016)W tym filmie reometr został użyty do zastosowania kontrolowanego oscylacyjnego ruchu obrotowego do tkanki mózgowej w celu wygenerowania odkształcenia ścinającego i oceny właściwości lepkości i elastyczności tkanki. Reometr, jako narzędzie funkcjonalne, zapewnia wgląd w mechanikę mózgu podczas urazów lub...

Źródło: Hare, D. J., et.al. Obrazowanie metali w tkance mózgowej metodą ablacji laserowej - plazma sprzężona indukcyjnie - spektrometria mas (LA-ICP-MS). J. Vis. Exp. (2017)Ten film demonstruje zastosowanie spektrometrii mas plazmy sprzężonej indukcyjnie z ablacją laserową (LA-ICP-MS) do wizualizacji i ilościowego określenia rozkładu metali w tkance mózgowej myszy. Protokół obejmuje ablację laserową w celu wytworzenia aerozolu cząstek próbki, jonizację cząstek w plazmie wysokotemperaturowej...

Źródło: Piazza, V., et al., Bezznacznikowa optyka nieliniowa do badania defektów zależnych od tubuliny w centralnej mielinie. J. Vis. Exp. (2023)Ten film przedstawia procedurę obrazowania nieprawidłowości mikrotubul w wycinku tkanki mózgowej szczura za pomocą mikroskopu wzbudzenia dwufotonowego. Wykorzystuje sygnały drugiej generacji harmonicznej (SHG) do wykrywania wad tubuliny i zmniejszonej produkcji mieliny.

Źródło: Daniele, F., et. al Sondy TIRFM i pH GFP do oceny dynamiki pęcherzyków neuroprzekaźników w komórkach nerwiaka zarodkowego SH-SY5Y: obrazowanie komórek i analiza danych. J. Vis. Exp. (2015). Ten film pokazuje obrazowanie ludzkich komórek nerwiaka zarodkowego przy użyciu mikroskopu całkowitej fluorescencji wewnętrznego odbicia (TIRF) do wizualizacji pęcherzyków synaptycznych znakowanych fluoroforem. Komórki są najpierw skupiane w trybie epifluorescencji. Następnie dokonuje się regulacji,...

Źródło: Winkle, C. C., et al. Wykorzystanie połączonych metodologii w celu zdefiniowania roli dostarczania błony plazmatycznej podczas rozgałęziania aksonów i morfogenezy neuronów. J. Vis. Exp. (2016)Ten film przedstawia mikroskopię fluorescencji całkowitego wewnętrznego odbicia (TIRF) do wizualizacji zdarzeń egzocytarnych w neuronach korowych. Wrażliwy na pH marker białka zielonej fluorescencji (GFP) fluoryzuje po fuzji pęcherzyków, z selektywnym wzbudzeniem TIRF wychwytującym egzocytozę...

Źródło: McCullagh, E. A., et al. Koherentna spektroskopia Ramana Antystokesa (CARS) do obrazowania mielinizacji w wycinkach mózgu. J. Vis. Exp. (2022)Film demonstruje obrazowanie fluorescencyjne i koherentną spektroskopię Ramana antystokesa (CARS) w celu wizualizacji architektury neuronalnej w tkance mózgowej gryzoni. Barwienie Nissl znakuje ciała komórkowe poprzez wiązanie się z rybosomalnym RNA, podczas gdy obrazowanie CARS celuje w mielinę bogatą w lipidy za pomocą sygnałów indukowanych...

Źródło: Hontani, Y., et al. Mikroskopia fluorescencyjna trójfotonowa tkanek głębokich w nienaruszonym mózgu myszy i danio pręgowanego. J. Vis. Exp. (2022)Ten film pokazuje konfigurację i wykonanie obrazowania trójfotonowego w znieczulonym mózgu danio pręgowanego. Protokół umożliwia wizualizację głębokich tkanek neuronów znakowanych fluorescencyjnie, ujawniając aktywność neuronalną i struktury w czasie rzeczywistym do zastosowań badawczych w dziedzinie neurobiologii.