$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Wszystkie procedury dotyczące próbek zwierzęcych zostały sprawdzone i zatwierdzone przez odpowiednią komisję ds. oceny etyki zwierząt.
1. Obrazowanie
2. Obraz przesuwa się przy użyciu najwyższego ustawienia jakości z przesunięciem 0 nm i rozdzielczością 21 μm. Skanowanie trwa zazwyczaj 13-19 godzin, w zależności od używanego sprzętu skanującego.
3. Zaimportuj obrazy do oprogramowania do analizy obrazu (np. Image Studio), aby wyświetlić i oznaczyć półilościowe białko analiza.
2. Analiza ekspresji białek
1. Otwórz oprogramowanie do analizy obrazu i wybierz Work Area w którym obraz został zeskanowany.
2. Otwórz zeskanowany obraz w oprogramowaniu do analizy obrazu, aby wyświetlić skan i dostosuj, które długości fal są również wyświetlane. jako kontrast, jasność i powiększenie pokazane bez zmiany surowego obrazu lub całkowitej emisji ilościowej.
3. Zidentyfikuj kluczowe regiony do kwantyfikacji i wybierz Analysis tab wzdłuż górnej krawędzi strony, a następnie wybierz Draw Rectangle (or Rysuj elipsę/ Draw Freehand), aby narysować prostokąt nad obszarem, który zostanie określony ilościowo.
4. Aby wyświetlić rozmiar prostokąta, wybierz Shapes wzdłuż lewego dolnego rogu ekranu, następnie wybierz Columns wzdłuż dolnego prawego rogu. Dodaj Height oraz Width kolumny identyfikujące rozmiar kształtu.
UWAGA: Ważne jest, aby kontrolować rozmiar kształtu podczas porównywania kwantyfikacji. Zaleca się stosowanie identycznych kształtów umieszczonych w żądanym miejscu oznaczania ilościowego, w celu uzyskania dokładnej próbki emisji dla tego regionu.
5. Następnie nazwij kształt i powtórz. Po próbkowaniu wszystkich regionów dane dostępne z columns tab może być zagregowane i przeanalizowane.