Mikroskopia dwufotonowa do obrazowania morfologii neuronów u szczeniaka myszy

Streszczenie

Source: Mizuno, H., et al. In Vivo Dwufotonowe obrazowanie neuronów korowych u noworodków myszy. J. Vis. Exp. (2018)

Ten film prezentuje mikroskopię dwufotonową używaną do obrazowania neuronów w mózgu znieczulonego transgenicznego szczeniaka myszy. Laser dwufotonowy pozwala na głębsze obrazowanie z wysoką rozdzielczością przestrzenną i minimalnym rozpraszaniem światła, umożliwiając szczegółowe uchwycenie morfologii neuronów, w tym projekcji dendrytycznych.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały poddane przeglądowi przez lokalną instytucjonalną komisję ds. opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną JoVE Komisja recenzencka.

Wyniki

Rycina 1: Operacja, przygotowanie okna czaszkowego i mocowanie pręta tytanowego. (A) Ten panel pokazuje usu.......

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
pK031. TRE-Cre	Autorzy	-	Dostępne od RIKEN BRC i Addgene
pK029. CAG-loxP-STOP-loxP-RFP-ires-tTA-WPRE	Autorzy	-	Dostępne od RIKEN BRC i Addgene
pK273. CAG-loxP-STOP-loxP-CyRFP-ires-tTA-WPRE	Autorzy	-	Dostępne od autorzy
Isoflurane	Wako	099-06571
410 Jednostka anestezjologiczna (maszyna do gazu izofluranowego)	Univentor	8323101
Vetbond (klej do tkanek)	3M	084-1469SB
MμltiFlex Round (końcówka ładowania)	Sorenson	13810
Gelfoam (gąbka żelatynowa)	Pfizer	09-0353-01
Agarose	Sigma	A9793	Niska temperatura topnienia
Okrągłe szkiełko nakrywkowe	Matsunami	-	Custom made
Unifast 2 (cement dentystyczny)	GC	-
Pasek tytanu	Autorzy	-	Wykonane na zamówienie (patrz rysunek 1G)
Rimadyl (carprofen)	Zoetis	-	Injectable
mikroskop 2-fotonowy	Zeiss	LSM7MP
Laser tytanowo-szafirowy	Spertra-Physics	Mai-Tai eHPDS
Płyta tytanowa	Autorzy	-	Wykonane na zamówienie (patrz rysunek 2A)
IMARIS, FilamentTracer, MeasurementPro	BITPLANE
Etap goniometru	Thorlabs	GN2/M