Opisujemy wysoce powtarzalną metodę trwałego zamknięcia głównego naczynia krwionośnego mózgu gryzoni. Technikę tę można osiągnąć przy bardzo niewielkim uszkodzeniu obwodowym, minimalnej utracie krwi, wysokim wskaźniku długoterminowego przeżycia i stałej objętości zawału współmiernej do populacji klinicznej ludzi.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Stała niedrożność naczynia mózgowego poprzez podwójne podwiązanie i przecięcie
* These authors contributed equally
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Udar mózgu jest główną przyczyną śmierci, niepełnosprawności i strat społeczno-ekonomicznych na całym świecie. Większość wszystkich udarów wynika z przerwania przepływu krwi (niedokrwienia) 1. Tętnica środkowa mózgu (MCA) dostarcza zdecydowaną większość krwi do bocznej powierzchni kory mózgowej 2, jest najczęstszym miejscem udaru mózgu u ludzi 3, a niedokrwienie na jej terytorium może prowadzić do rozległej dysfunkcji lub śmierci 1,4,5. Osoby, które przeżyły udar niedokrwienny, często cierpią z powodu utraty lub zaburzenia zdolności motorycznych, deficytów sensorycznych i zawału. Starając się uchwycić te kluczowe cechy udaru, a tym samym opracować skuteczne leczenie, duży nacisk kładzie się na zwierzęce modele niedokrwienia w MCA.
Tutaj prezentujemy metodę trwałego zamknięcia naczynia krwionośnego na powierzchni kory. Przedstawimy tę metodę na przykładzie odpowiedniej niedrożności naczyń, która modeluje najczęstszy typ, lokalizację i wynik udaru mózgu, stałą niedrożność tętnicy środkowej mózgu (pMCAO). W tym modelu chirurgicznie odsłaniamy MCA u dorosłego szczura, a następnie zamykamy go poprzez podwójne podwiązanie i przecięcie naczynia. To pMCAO blokuje proksymalną gałąź korową MCA, powodując niedokrwienie w całym terytorium kory MCA, dużej części kory. Ta metoda okluzji może być również stosowana do zamykania bardziej dystalnych części naczyń korowych w celu uzyskania bardziej ogniskowego niedokrwienia ukierunkowanego na mniejszy obszar kory. Podstawową wadą pMCAO jest to, że zabieg chirurgiczny jest nieco inwazyjny, ponieważ do uzyskania dostępu do MCA wymagana jest mała kraniotomia, chociaż powoduje to minimalne uszkodzenie tkanek. Podstawowymi zaletami tego modelu są jednak: dobrze zdefiniowane miejsce okluzji, stopień zmniejszenia przepływu krwi jest stały, upośledzenie funkcjonalne i neurologiczne występuje szybko, rozmiar zawału jest stały, a wysoki wskaźnik przeżycia pozwala na długoterminową ocenę przewlekłą.
Wprowadzenie
W celu wywołania stanów niedokrwiennych, które skutecznie naśladują udar niedokrwienny u ludzi, szeroko stosuje się kilka zwierzęcych modeli udaru, co skutkuje różną objętością zawału. W modelu fotozakrzepowym mózg jest napromieniany przez nienaruszoną czaszkę za pomocą oświetlenia laserowego po dożylnym wstrzyknięciu substancji światłoczułej (takiej jak róża bengalska), co powoduje koagulację fotochemiczną, zablokowanie napromienianych naczyń i niedokrwienie otaczającej tkanki 6,7. Fotozakrzepica może powodować bardzo małe, izolowane obszary zawału i jest zwykle stosowana jako sposób modelowania "mini-udarów" lub "mikroudarów".
....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
1. Wprowadzenie: Wymagane narzędzia chirurgiczne
Zobacz Rysunek 4
- Wiertarka dentystyczna (Kavo Dental Equipment, model: UMXL-TM), wiertarka 2-bitowa i wiertarka 3-bitowa
- Dwie igły podskórne o rozmiarze ~30
- Pęseta ząbkowana, opcjonalnie zakrzywiona końcówka (może być pomocna, ale nie jest niezbędna)
- Dwie pęsety z cienką końcówką
- przecinaki do drutu
- Nici do szwów
- Mikro nożyczki
2. Tworzenie okna chirurgicznego
- Znieczulenie: Procedury są zgodne z wytycznymi NIH i zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Opieki i....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Pomyślną okluzję naczynia można potwierdzić za pomocą obrazowania plamek laserowych (LSI) oraz innych technik obrazowania przepływu krwi. Przepływ krwi w głównych gałęziach korowych tętnicy środkowej mózgu (MCA) powinien spaść do poziomu ~25% wartości bazowej lub mniej po okluzji, w zależności od poziomu szumu w systemie rejestracji oraz czułości zastosowanej techniki. Przedstawione na Rysunku 3 reprezentatywne obrazy LSI pokazują odcinek gałęzi korowej MCA przed i po okluzji MCA. W przy.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Protokół ten został opracowany w celu wywołania niedokrwienia w korze gryzoni i zrobienia tego przy minimalnym wpływie obwodowym na osoby eksperymentalne. Metoda podwójnej okluzji i przecięcia pozwala na wizualne potwierdzenie, że naczynie zostało trwale zamknięte i może być wykonane bez nadmiernej inwazji lub uszkodzenia tkanek oraz z wysokim wskaźnikiem przeżycia. Ten protokół okluzji może być zastosowany do dowolnego naczynia korowego, do którego można uzyskać dostęp za pomocą kraniotomii w celu wywołania niedokrwieni.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy nie mają w tej chwili nic do ujawnienia.
Podziękowania
Ta praca była wspierana przez American Heart Association Predoctoral Fellowship 788808-41910, NIH-NINDS NS-066001 i NS-055832, oraz The Center for Hearing Research NIH Training Grant 1T32DC010775-01.
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Bardzo cienkie kleszcze Graefe - końcówki 0,5 mm Lekka krzywizna (1) | Fine Science Tools | 11151-10 | |
| Kleszcze Dumont #5 z powłoką ceramiczną (2) | Narzędzia do nauki o wysokiej | 11252-50 | |
| Bardzo cienkie nożyczki do bonn, proste (1) | Narzędzia do nauki o naczyniu | 14084-08 | |
| Okrągłe igły do szycia 3/8 (16 mm) | Narzędzia do nauki | 12050-02 | |
| 6-0 Pleciony jedwab Zszyj | narzędzia do nauki o NC9071061 < | br / > Aparat Harvarda nr: | |
| 30 gauge i frac12; " długość | Narzędzia do nauki | NC9867376 Nr : ZT-5-030-5-L / COL |
Bibliografia
- Caplan, L. R. Caplan's Stroke, A Clinical Approach. , 4th edn, Saunder's & Elsevier. (2009).
- Blumenfeld, H. Neuroanatomy Through Clinical Cases. , Sinauer Associates. (2002).
- Roger, V. L., et al. Heart Disease and Stroke Statistics--2011 Update: A Report From the American Heart Assoc....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
