Artykuł metodologiczny

Listopad 2012: Miesiąc w JoVE

11.4K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/5044

⸱

1 listopada 2012

 , 

W tym artykule

Streszczenie

W tym wydaniu Oestreicher et al. pokazują, jak izolować bakterie magnetotaktyczne z próbek wody słodkiej i koncentrować je na jednym końcu szklanej kapilary. Bakterie magnetotaktyczne można następnie wizualizować za pomocą mikroskopii świetlnej i elektronowej transmisyjnej oraz wykorzystywać w różnych innych analizach.

Również w wydaniu z listopada 2012 r. Boland et al. demonstrują, jak przeprogramować fibroblasty w indukowane pluripotencjalne komórki macierzyste (iPSCs) oraz jak izolować linie iPSC do wstrzykiwania do blastocyst tetraploidalnych, co zostało wcześniej zaprezentowane w JoVE. Choć pipetowania ustnego zazwyczaj się nie zaleca ze względu na możliwe niekorzystne skutki, niniejszy protokół wymaga zastosowania tej techniki, wykonanej ostrożnie, w celu manipulacji embrionami. Jest to jedna z rzadkich okazji, kiedy pipetowanie ustne w laboratorium jest dopuszczalne. Jeśli indukowane komórki są w pełni pluripotencjalne, mogą one doprowadzić do powstania myszy donoszonych, pochodzących całkowicie z iPSCs.

W JoVE Neuroscience, Heermann i Krieglstein prezentują metodę wizualizacji rozwoju komórek Schwanna wzdłuż rosnących aksonów. W tym celu autorzy hodują eksplantaty zwojów szyjnych na matrycach kolagenowych i traktują je czynnikiem wzrostu nerwów lub innymi substancjami. Żele kolagenowe można następnie wizualizować za pomocą obrazowania time-lapse z wykorzystaniem mikroskopii fluorescencyjnej lub w polu jasnym, obserwując migrację wzdłuż aksonów w kierunku peryferii.

Również w JoVE Neuroscience, Hoffmann et al. zakładają małe słuchawki ptakom śpiewającym, aby zbadać, w jaki sposób wykorzystują one sprzężenie zwrotne słuchowe do korygowania swojego śpiewu. Autorzy demonstrują, jak skonstruować słuchawki i przymocować je do głowy ptaka; następnie, poprzez regulację sygnału akustycznego, mogą badać obliczeniowe i neurofizjologiczne podstawy uczenia się wokalnego u ptaków.

W JoVE Clinical & Medycyna Translacyjna, Iyengar i wsp. wykorzystują model nowotworowy u rybek danio pręgowanych do badania genów mogących modyfikować patogenezę czerniaka. Odbywa się to poprzez uprzednie stworzenie transgenicznych rybek danio pręgowanych wykazujących ekspresję badanego genu. Następnie można przeprowadzić różne analizy w celu zbadania, w jaki sposób poszczególne geny wpływają na czerniaka, w tym na jego występowanie, inwazyjność i zdolność do transplantacji.

W JoVE Bioengineering Martin et al. prezentują test ślizgania w celu pomiaru sztywności zgięciowej biopolimerów (takich jak mikrotubule). Poprzez przytwierdzenie białek motorycznych do szkiełka przedmiotowego i dodanie znakowanych fluorescencyjnie mikrotubul, autorzy mogą analizować dynamikę polimerów cytoszkieletu.

Niniejszy podgląd podsumowuje zaledwie kilka znaczących artykułów wideo w listopadowym wydaniu JoVE z 2012 roku. Zapraszamy do odwiedzin w ciągu całego listopada, aby zapoznać się z pełnymi wersjami tych oraz wielu innych artykułów.

Oświadczenia

Nie zgłoszono konfliktów interesów.

Przedruki i uprawnienia

Przeglądaj więcej artykułów

Magnetotactic BacteriaFreshwater SamplesLight MicroscopyTransmission Electron MicroscopyInduced Pluripotent Stem CellsIPSCsFibroblasts ReprogrammingTetraploid BlastocystsSchwann Cell DevelopmentNerve Growth FactorTime-lapse ImagingAuditory FeedbackVocal LearningZebrafish Tumor ModelMelanoma PathogenesisTransgenic ZebrafishBiopolymers Flexural RigidityCytoskeletal Dynamics