Mysi model przeszczepu szyjki macicy przy użyciu zmodyfikowanej techniki mankietowej

Summary

Model przeszczepu mysiego serca szyjnego doskonale nadaje się do badań immunologicznych i niedokrwiennych uszkodzeń reperfuzyjnych. Zmodyfikowaliśmy procedurę przy użyciu techniki mankietu bez szwów i przeprowadziliśmy ponad 1000 udanych przeszczepów przy użyciu tego podejścia.

Niniejszym podajemy dodatkowe szczegóły tej techniki, aby uzupełnić film.

Abstract

Modele mysie są szczególnie interesujące w badaniach, ponieważ dostępna jest szeroka gama przeciwciał monoklonalnych oraz komercyjnie zdefiniowanych szczepów wsobnych i nokautujących do przeprowadzania mechanistycznych badań in vivo. Podczas gdy modele przeszczepu serca wykorzystujące technikę szwów zostały po raz pierwszy z powodzeniem opracowane na szczurach, translacja na równie rozpowszechniony mysi odpowiednik nigdy nie została osiągnięta ze względu na techniczną złożoność procedury mikrochirurgicznej. W przeciwieństwie do tego, techniki mankietów bez szwów, również opracowane początkowo u szczurów, zostały z powodzeniem przystosowane do stosowania u myszy^1-3. Ta technika rewaskularyzacji obejmuje dwa główne etapy: I) naczynie biorcze nad mankietem z polietylenu; II) naciągnięcie naczynia dawczego na naczynie dawcze i przytrzymanie go w miejscu za pomocą opaski obwodowej. Zapewnia to ciągłość warstwy śródbłonka, krótki czas działania i bardzo wysoką drożność⁴.

Korzystając z tej techniki do zespolenia naczyniowego, przeprowadziliśmy ponad 1000 przeszczepów szyjki macicy z ogólnym wskaźnikiem sukcesu wynoszącym 95%. W przypadku dopływu tętniczego tętnicę szyjną wspólną i proksymalny łuk aorty zespolono w wyniku perfuzji wstecznej przeszczepionego serca. W celu drenażu żylnego tętnicę płucną przeszczepu zespolono z żyłą szyjną zewnętrzną biorcy⁵.

Niniejszym podajemy dodatkowe szczegóły tej techniki, aby uzupełnić film.

Introduction

Transplantacja serca stanowi terapię z wyboru dla pacjentów cierpiących na różne schyłkowe choroby serca. Postęp w technikach chirurgicznych, skuteczniejsza profilaktyka zakażeń i nowatorskie schematy immunosupresyjne doprowadziły do znacznej poprawy wyników przeszczepiania narządów⁶. Jednak długoterminowa przeżywalność przeszczepów nie poprawiła się rygorystycznie w ciągu ostatnich lat⁷. Przewlekłe odrzucenie, charakteryzujące się miażdżycą tętnic po przeszczepie, nadal stanowi główną przeszkodę w długoterminowym przeżyciu przeszczepu^8-11.

Model heterotopowego przeszczepu serca u myszy dostarcza ważnego i w....

Protocol

Zwierzęta są trzymane w obiekcie wolnym od patogenów barierowych. Wszystkie zwierzęta otrzymują opiekę człowieka zgodnie z "Zasadami opieki nad zwierzętami laboratoryjnymi" sformułowanymi przez National Society for Medical Research" oraz "Przewodnikiem opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych" opracowanym przez Narodową Akademię Nauk i opublikowanym przez National Institutes of Health (publikacja NIH nr 86-23, Poprawiony w 1985 r.). Wszystkie eksperymenty są zatwierdzone przez austriackie Ministerstwo Edukacji, Nauki i Kultury.

1. Przygotowanie odbiorcy

1. Znieczulić zwierzę biorcy za pomocą domięśniowego wstrzyknięcia ksylaz....

Results

Rysunek 2 pokazuje reprezentatywne dane dotyczące przeżycia alloprzeszczepów serca od dawców BALB/c po przeszczepie do w pełni niedopasowanych biorców MHC C57BL/6. Serca są odrzucane w 7 ± 1 dniu po przeszczepie. Badanie palpacyjne przeszczepionego przeszczepu jest czułą metodą wykrywania zależnego od czasu przebiegu odrzucenia przeszczepu allogenicznego. Wszystkie syngeniczne przeszczepy serca wykonane w naszej serii przeżyły w nieskończoność (>150 dni).

Discussion

Odrzucenie unaczynionych przeszczepów allogenicznych pociąga za sobą mnóstwo różnych etapów, które można jedynie niewystarczająco ocenić za pomocą modeli in vitro . Zjawiska takie jak uwrażliwienie biorców, przetwarzanie antygenu w wtórnych narządach limfatycznych, ale także różnicowanie i proliferacja komórek kompetentnych immunologicznie są lepiej scharakteryzowane in vivo. Modele zwierzęce są zatem idealnym narzędziem do badań translacyjnych¹⁶. Modele mysie nadal stanowią złoty standard w .......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Yasargil Clip Mini Permanent 7 mm	Aesculap	FE720K
Mikroklips do naczyń	S & T	B1 00396 V
Mikronożyczki	FST	14075-11
Rozszerzacz naczyń	S & T	D-5a.2 00125
Mikrokleszcze	FST	Dumont 11271- 30
Clipapplicator	S & T	CAF-4 00072
Klips do mikronaczyń	S & T	B1 00396 V