Ten artykuł demonstruje zabiegi chirurgiczne refluksu żołądkowo-przełykowego u myszy. Modele te są przydatnymi narzędziami do badań nad mechanizmami i leczeniem choroby refluksowej przełyku, a potencjalnie również choroby Barretta i raka przełyku.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Modele chirurgiczne refluksu gastroezofagoidalnego z użyciem myszy
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Zgłoszono wiele zabiegów chirurgicznych, które wywołują refluks gastroezofagealny u zwierząt. Niniejszy artykuł opisuje trzy modele chirurgiczne z użyciem myszy mające na celu wywołanie refluksu treści żołądkowej, treści dwunastnicy lub mieszanej treści. Zabiegi chirurgiczne i ogólne zasady zostały szczegółowo opisane. Badacz z doświadczeniem chirurgicznym powinien być w stanie opanować tę technikę po krótkim okresie ćwiczeń. Po zabiegu większość myszy może przeżyć i rozwinąć refluksowe zapalenie przełyku podobne do tego u ludzi. Należy jednak zauważyć, że różnice histologiczne między przełykiem myszym a ludzkim są uwarunkowaną cechą tych modeli chirurgicznych. Jeśli są stosowane w badaniach nad przełykiem Barretta i rakiem gruczołowym, te zabiegi mogą wymagać skojarzenia z modyfikacjami genetycznymi.
Wprowadzenie
Choroba refluksowa przełyku (GERD) to przewlekłe zaburzenie spowodowane przedłużającym się narażeniem końcowego odcinka przełyku na zawartość żołądka lub żołądkowo-jelitową1. Przedłużające się narażenie na te szkodliwe refluksaty osłabia wrodzone mechanizmy obronne w nabłonku przełyku i prowadzi do zapalenia przełyku2. Przełyk Barretta powstaje w warunkach przewlekłego refluksu i jest zmianą przedrakową z podwyższonym ryzykiem raka przełyku3,4. Pomimo klinicznego znaczenia, mechanizmy GERD, przełyka Barretta i raka nie zostały dobrze poznane.
Modele zwierzęce są niezbędne do badań nad etiologią, patofizjolo....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Wszystkie eksperymenty na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami i ich Użytkowania.
1. Przygotowanie myszy
- Do operacji używaj myszy o wadze ponad ~20 g lub starszych niż ~6 tygodni.
- Przed operacją, daj myszom pokarm laboratoryjny i wodę ad libitum i utrzymuj w cyklu 12:12 godzinnym światło-ciemność.
- Ogol strefę operacyjną maszynką do włosów. Zwierzęta znieczulaj przez podanie dootrzewnowe 80 mg/kg ketaminy i 12 mg/kg ksylazyny. Ta dawka przyśpi myszy w ciągu kilku minut i zapewnia wystarczające znieczulenie na kolejne zabiegi chirurgiczne.
- ....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Większość myszy (>95%) przetrwa operację. W okresie pooperacyjnym, głównymi przyczynami śmierci są przedawkowanie leków znieczulających, krwotoki i nieznane przyczyny.
Cztery tygodnie po operacji, >90% myszy z refluksem żołądkowym lub mieszanym refluksem i >80% myszy z refluksem dwunastnicy może przeżyć. W tym okresie myszy umierają głównie z powodu zwężenia przełyku i niemożności jedzenia. Te myszy wykazują oznaki ciężkiego stresu (zachowanie się na czworaka, brak aktywności, wymioty, wklęsłe.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Ustanowiono różne modele chirurgiczne w celu naśladowania refluksu żołądkowego, dwunastniczego i mieszanego u gryzoni. Te trzy opisane tu procedury są odpowiednie dla długoterminowych eksperymentów z rozsądnymi wskaźnikami przeżywalności pooperacyjnej. Badacz z doświadczeniem chirurgicznym powinien być w stanie opanować tę technikę po krótkim okresie ćwiczeń.
Krwawienie może wynikać z dootrzewnowego wstrzyknięcia środków znieczulających przed operacją, rozerwania wątroby podczas oddzielania tk.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Jeden z autorów (XC) otrzymał dofinansowanie, które zostało przekazane przez Takeda Pharmaceutical Company Ltd, które wspiera badania podstawowe związane z chorobą refluksową przełyku. Żaden z reagentów lub instrumentów użytych w tym artykule nie jest produkowany przez tę firmę.
Podziękowania
Dzięki wsparciu grantów badawczych Narodowej Fundacji Nauk Przyrodniczych Chin (NR 81400590), Narodowych Instytutów Zdrowia (U54 CA156735) oraz Takeda Pharmaceutical Company Ltd. (MA-NC-D-156).
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Dumont #1 Forceps Dumostar Tip | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Micro Clip Applying Forceps 5.5" | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Bonn Scissors 3.5" Straight 15 mm Sharp/Sharp Tungsten Carbide Blades | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Operating Scissors 5.5" Straight Sharp/Sharp SureCut | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| 4-0 Silk Black Braid 100 Yard Spool | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Surgeon's Needle 1/2 Circle Cutting Edge Size 12 (25 mm Chord Length) Pack 12 | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Halsey Needle Holder 5" Smooth | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Micro Needle Holder 5.125" Curved Lock.6 mm | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Reflex 9 mm Wound Clip Applier | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Reflex 9 mm Wound Clips Box Of 100 | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| PRONOVA Poly (hexafluoropropylene-VDF) Suture 8-0 | Ethicon US, LLC | ||
| Ringer's solution | Henry Schein, Inc. | ||
| ketamine | Henry Schein, Inc. | ||
| xylazine | Henry Schein, Inc. |
Bibliografia
- Kandulski, A., Malfertheiner, P. Gastroesophageal reflux disease--from reflux episodes to mucosal inflammation. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 9 (1), 15-22 (2012).
- Orlando, R. C. The integrity of the esophageal m....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
