Artykuł metodologiczny

Ekonomiczna i niezawodna metoda przewidywania naprężeń mechanicznych w pompach jednorazowych i standardowych

DOI:

10.3791/53052

5 sierpnia 2015

W tym artykule

Podsumowanie

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Badania naprężeń ścinających w systemie emulsji olejowo-wodnej skutkują rozpadem kropli w czasie eksperymentu. Aby zliczyć wielkość kropli w procesach pompowania, w protokole tym z powodzeniem wykazano przydatność endoskopii inline.

Streszczenie

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pompy są głównie używane do przenoszenia sterylnych bulionów hodowlanych w procesach produkcji biofarmaceutycznej i biotechnologicznej. Jednak podczas procesu pompowania występują siły ścinające, które mogą prowadzić do jakościowych i/lub ilościowych strat produktu. Aby obliczyć naprężenia mechaniczne przy ograniczonych kosztach eksperymentalnych, użyto systemu emulsji olejowo-wodnej, którego przydatność wykazano do wykrywania wielkości kropli w bioreaktorach1. Ponieważ rozpad kropli w układzie emulsji olej-woda jest funkcją naprężeń mechanicznych, rozmiary kropli muszą być liczone w czasie doświadczalnym badań naprężeń ścinających. W poprzednich badaniach wykazano, że endoskopia inline jest dokładną i niezawodną techniką pomiarową do wykrywania wielkości kropli w dyspersjach ciecz/ciecz. Celem tego protokołu jest wykazanie przydatności techniki endoskopii inline do pomiaru wielkości kropli w procesach pompowania. Aby wyrazić wielkość kropli, jako reprezentatywną średnicę kropli w emulsji olej-woda użyto średniej średnicy Sautera d32. Wyniki wykazały niewielką zmienność średnich średnic Sautera, które zostały określone ilościowo za pomocą odchyleń standardowych poniżej 15%, co wskazuje na wiarygodność techniki pomiaru.

Wprowadzenie

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pompy są używane do przenoszenia kultur komórkowych w przemyśle farmaceutycznym i biotechnologicznym. Podczas procesu pompowania naprężenia mechaniczne mogą spowodować nieodwracalne uszkodzenie komórek, co może pogorszyć ilość i jakość produktu1-4. Poziom naprężeń mechanicznych zależy od typu pompy i jej ustawień, jak wykazano w poprzednich badaniach5-6. Powszechnie pompy perystaltyczne, strzykawkowe i membranowe są używane do zastosowań opartych na technologii jednorazowego użytku (SU). Pompy te powodują duże lokalne siły ścinające spowodowane ściskaniem rurki pompy i pulsującym przepływem7.

Aby przezwyciężyć te wady, magnetycznie lewitujące pompy odśrodkowe (pompy odśrodkowe MagLev) stanowią obiecującą alternatywę. Silnik jest napędzany magnetycznie, aby uniknąć wąskich szczelin między wirnikiem a korpusem pompy (ilustracja 1). W poprzednim badaniu zbadano pompy odśrodkowe MagLev i wykazano mniejsze naprężenia mechaniczne w komórkach jajnika chomika chińskiego (CHO) w porównaniu z pompami perystaltycznymi i 4-tłokowymi membranowymi5. Ponadto analizy hemolizy nie wykazały znaczącego urazu krwi i tworzenia się skrzeplin w różnych warunkach pracy przy użyciu tych pomp8-11. Wyniki pokazują, że zastosowanie tych specjalnie zaprojektowanych pomp powoduje mniejsze obciążenie mechaniczne systemów biologicznych w porównaniu z pompami perystaltycznymi i membranowymi. Do zbadania naprężeń mechanicznych przy ograniczonych kosztach eksperymentalnych zaleca się model emulsji olejowo-wodnej ze względu na jego koszt (ok. 99,8%) i skrócone czasowo (ok. 99,5%) zastosowanie w porównaniu z biologicznymi systemami hodowli komórkowych.

Ponieważ rozpad kropli w systemie emulsji olejowo-wodnej jest funkcją naprężeń mechanicznych, rozmiary kropli muszą być liczone w czasie eksperymentalnym badań naprężeń ścinających. Dostępnych jest wiele technik doboru rozmiaru, które można podzielić na techniki dźwiękowe, laserowe i fotograficzne12. W szczególności zastosowanie endoskopii inline z sondą fotooptyczną wykazuje prawie identyczne rozmiary kropli dla detekcji ręcznej i automatycznej (odchylenie standardowe poniżej 10%) i umożliwia wykrywanie 250 kropli na minutę13. Ze względu na swoją dokładność i niezawodność, technika endoskopowa okazała się skuteczną standardową techniką pomiaru rozkładu wielkości kropli w dyspersjach ciecz/ciecz w porównaniu z innymi powszechnie stosowanymi sondami (np. światłowodowym czujnikiem stosunku przód-tył (FBR), metodą odbicia skupionej wiązki (FBRM) i dwuwymiarową techniką pomiaru odbicia optycznego (2D-ORM))12,14. Co więcej, przydatność endoskopii inline do pomiaru wielkości kropel w naczyniu z mieszadłem została kilkakrotnie wykazana w poprzednich badaniach15-18.

Na podstawie wcześniejszego badania6, ten protokół opisuje użycie endoskopii inline do określania wielkości kropli (średnia średnica Sautera) systemu emulsji olej-woda w pompach. Średnia średnica Sautera została wykorzystana jako kryterium porównawcze w celu oszacowania naprężeń mechanicznych wielofunkcyjnych (MU) pomp odśrodkowych MagLev, perystaltycznej i jednorazowej (SU) 4-tłokowej pompy membranowej.

figure-introduction-1
Rysunek 1. Magnetycznie lewitowany system pomp odśrodkowych. (A) Zasada działania silnika bezłożyskowego i (B) PuraLev 200MU są pokazane jako przykład. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

Protokół

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Badania zostały przeprowadzone przy użyciu instalacji pompowej (Rys. 2), która umożliwia przeprowadzanie eksperymentów z naprężeniami mechanicznymi przy natężeniach przepływu do 60 L min-1 i spadkach ciśnienia do 2 barów. Jak pokazano na rys. 2, układ eksperymentalny składa się z naczynia magazynowego, obwodu pompy i sprzętu do techniki endoskopii na linii. Wirnik zbiornika magazynowego służył wyłącznie do mieszania środka powierzchniowo czynnego. Elementy peryferyjne zostały zintegrowane z zamkniętą pętlą w celu monitorowania natężenia przepływu V̇ i spadku ciśnienia p przy różnych ustawieniach pompy. Badania były urozmaicone za pomocą zaworu ręcznego.

1. Konfiguracja eksperymentalna

  1. Upewnij się, że bioreaktor (D = 0,15 m, H/D = 2,2) jest wyposażony w wirnik do rozpuszczania środka powierzchniowo czynnego i upewnij się, że rurka wlotowa zanurza się w płynie, aby uniknąć przedostania się gazu.
  2. Wyposaż pętlę pompy w port strzykawkowy, badaną pompę, przepływomierz zaciskowy, jednorazowy czujnik ciśnienia i zawór ręczny. Po podłączeniu pętli pompy do naczynia magazynowego należy podłączyć głowicę pompy do silnika i przygotować sondę endoskopową.
  3. Zamontuj wymienną płaszczyznę odbicia, w tym przypadku zwierciadło rodowane, na końcówce sondy i wyreguluj odległość między lustrem a soczewką do 150 μm. Wyreguluj na 100 μm, aby ustawić ostrość obiektywu.
  4. Podłącz sondę do stroboskopu za pomocą światłowodowego, a kamerę endoskopu do komputera za pomocą Ethernet. Następnie połącz ze sobą kamerę i stroboskop za pomocą ze skrzynką spustową.
  5. Uruchom komputer i otwórz oprogramowanie dostarczone przez producenta, które zawiera oprogramowanie do akwizycji i rozpoznawania obrazów, a także oprogramowanie do analizy wyników.
  6. Wybierz oprogramowanie do akwizycji obrazów w menu głównym.
  7. Kliknij przycisk "Wykryj urządzenie" w lewym górnym rogu ekranu, aby wykryć kamerę.
  8. W sekcji "Ustawienia katalogu" wybierz lokalizację na komputerze do zapisywania obrazów i aktywuj polecenie "Utwórz podfoldery wyzwalające".
  9. Wprowadź parametry procesu w sekcji "Tryb wyzwalania: gotowy".
    Częstotliwość odświeżania: 7,5 Hz
    Liczba klatek na wyzwalacz: 50
    Liczba wyzwalaczy: 60
    Interwał wyzwalania: 60 sekund
  10. Po zakończeniu wszystkich prac przygotowawczych wlać 5 l wody dejonizowanej do naczynia magazynowego i włączyć pompę, aby napełnić pompę i pętlę pompy.
  11. Wyłączyć pompę i dodać 0,9 ml środka powierzchniowo czynnego (cśrodek powierzchniowo czynny = 0,18 ml L-1, ρśrodek powierzchniowo czynny, 20°C = 1,070 kg m-3, krytyczne stężenie miceli (cmc): ωcmc ≈ 0,018 ml L-1, ωśrodka powierzchniowo czynnego ≈ 10 · ωcmc) pipetą o pojemności 10 ml mieszając. Po 10 minutach środek powierzchniowo czynny ulega całkowitemu rozpuszczeniu.
  12. Wyłącz wirnik i włącz pompę. Ustaw sondę endoskopową tak, aby soczewka znajdowała się bezpośrednio pod rurką wlotową.
  13. Ustaw natężenie przepływu na 3,4 l min-1 i spadek ciśnienia na 0,03, 0,3 lub 0,61 bara, zmieniając prędkość wirnika i zawór pokrętła.
  14. Odważyć 6,3 g oleju bezpośrednio w strzykawce (β oleju = 1,26 g L-1, ρoleju, 20°C = 989,5 kg m-3).
  15. Uruchom oprogramowanie do akwizycji obrazu i dodaj olej przez port strzykawki. Pracująca pompa rozprowadza krople emulsji.
  16. Po 1 godzinie zakończ badanie naprężeń ścinających i wyczyść endoskop liniowy oraz bioreaktor ze zintegrowaną pętlą pompy. Następnie przygotuj konfigurację eksperymentalną do następnego procesu pompowania.

2. Pomiar i analiza obrazu

  1. Otwórz oprogramowanie do automatycznego rozpoznawania obrazu w menu głównym.
  2. W sekcji "Batch Root Directory" wybierz lokalizację na komputerze, w której chcesz zapisać pliki (all*.csv).
  3. Wybierz kolumnę "Ścieżka serii obrazów" i kliknij przycisk "Dodaj podfoldery serii obrazów" w lewym dolnym rogu ekranu, aby załadować serię obrazów.
  4. Załaduj parametry procesu, które są podane przez producenta. Wybierz kolumnę "Ustawienia wyszukiwania (*.pss lub auftrag_*.mat)" i kliknij przycisk "Ustaw ustawienia wyszukiwania" w dolnej środkowej części ekranu, aby załadować parametry procesu w celu określenia rozpoznawania upuszczania.
  5. Wybierz kolumnę "Search Pattern (*.psp lub F_*.mat) i kliknij przycisk "Set Search Pattern" w prawym dolnym rogu ekranu, aby załadować parametry procesu w celu określenia analizy spadku.
  6. Rozpocznij rozpoznawanie obrazu, klikając przycisk "Rozpocznij wsad".
  7. Po zakończeniu rozpoznawania obrazu należy wyrazić wykryte wielkości kropli za pomocą średniej średnicy Sautera (d32) lub dowolnej innej reprezentatywnej wartości średniej lub wybranego rozkładu za pomocą oprogramowania do analizy wyników.
  8. Otwórz oprogramowanie analizatora wyników w menu głównym.
  9. Aktywuj polecenie "wszystko*.csv w 1 folderze" i kliknij przycisk "Załaduj folder(y)" w lewym górnym rogu ekranu, aby załadować wcześniej zapisany plik all*.csv.
  10. Wybierz odpowiednią wartość (np. średnią średnicę Sautera) z listy rozwijanej w górnej środkowej części ekranu, aby wyświetlić wyniki. Aby obliczyć średnicę, wprowadź skalę 0,6591 μm pixel-1 po prawej stronie, która jest dostarczana przez producenta.

figure-protocol-1
Rysunek 2. Konfiguracja eksperymentalna. Obwód pompy do konfiguracji pompy rurowej przy użyciu endoskopii liniowej jako techniki pomiaru: (1) naczynie magazynowe, (2) port strzykawki, (3) pompa, (4) czujnik ciśnienia, (5) czujnik przepływu, (6) stroboskop, (7) komputer z oprogramowaniem dostarczonym przez producenta oraz (8) sonda endoskopowa. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

Wyniki

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ocena optyczna

Rys. u re 3 pokazuje obrazy rozpoznawania cząstek po czasie pompowania wynoszącym 1 godzinę. Cztery górne obrazy pokazują krople przed rozpoznaniem, a dolne cztery obrazy pokazują krople zaznaczone przez oprogramowanie do rozpoznawania. Wykryte krople są podświetlone zieloną obwódką. Porównanie górnego i dolnego obrazu pokazuje, że krawędzie spadku zostały precyzyjnie wykryte przez oprogramowanie do rozpoznawania obrazu. Zdjęcia po lewej stronie pokazują rozkład kropli dla pomp odśrodkowych MagLev PuraLev 200MU i PuraLev 600MU, a te po prawej pokazują 4-tłokową membranę i pompę perystaltyczną. Ocena optyczna pozwoliła na wstępną klasyfikację naprężeń mechanicznych w modelowym układzie emulsyjnym. Okazało się, że pompy odśrodkowe MagLev generowały większe rozmiary kropli i mniejszą liczbę kropli w porównaniu z 4-tłokową pompą membranową i perystaltyczną. W związku z tym pompy odśrodkowe MagLev, zwłaszcza PuraLev 200MU, wykazały zmniejszone pękanie kropli, co wskazuje na mniejsze naprężenia mechaniczne.

figure-results-1
Rysunek 3. Obrazy endoskopii w linii. Krople emulsji przed (A, B, C, D) i po (E, F, G, H) rozpoznaniu cząstek po 1 godzinie pompowania przy użyciu (A, E) PuraLev 200MU, (B, F) PuraLev 600MU, (C, G) 4-tłokowej pompy membranowej i (D, H) pompy perystaltycznej w identycznych warunkach pracy (3,4 l min-1 i 0,03 bara). Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

Średnia średnica Sautera

Dalsze badania wykazały odchylenia standardowe poniżej d32 ± 0,4 μm i gwarantowały powtarzalne wyniki przy użyciu inline endoskopii19. W związku z tym w przypadku tego podejścia nie było wymagane przeprowadzanie wielu badań, co dodatkowo zmniejszyło koszty eksperymentu.

Aby wyrazić wielkość kropli, średnia średnica Sautera d32 (patrz Równanie 1) została użyta jako reprezentatywna średnica kropel w emulsji olej-woda dla tego podejścia. Ogólnie rzecz biorąc, średnia średnica Sautera zmniejszała się z czasem dla wszystkich typów pomp i ustawień pompy, aż do osiągnięcia stanu ustalonego12. Badania przeprowadzone w tym badaniu potwierdziły przykładowo omówioną w niniejszym protokole progresję średniej średnicy Sautera (rys. u re 4A do D), krzywych PuraLev 200MU (rys. u re 4A) i pompy perystaltycznej (rys. u re 4D).

W przeciwieństwie do PuraLev 200MU, średnie średnice Sautera były do 40% mniejsze dla pompy perystaltycznej w tych samych warunkach pracy (natężenie przepływu = 3,4 L min-1; spadek ciśnienia = 0,03 bara). W konsekwencji większe naprężenia mechaniczne skutkowały zwiększonym rozpadem kropli, a tym samym mniejszymi rozmiarami kropli. Co więcej, średnia średnica Sautera zmniejszała się wraz ze wzrostem spadku ciśnienia w PuraLev 200MU (rys. u re 4A), co wskazywało na zależność wielkości kropli od spadku ciśnienia. Natomiast pompa perystaltyczna wykazała średnią średnicę Sautera wynoszącą d32,60 min = 10 μm na końcu doświadczenia dla wszystkich parametrów procesu (rys. u re 4D). W związku z tym stwierdzono, że średnia średnica Sautera jest niezależna od spadku ciśnienia. Wyniki odzwierciedlają jednak fizyczne zrozumienie rozpadu kropli: przy większych naprężeniach mechanicznych wyznaczono mniejsze średnie średnice Sautera (patrz również rys. u re 5).

Dla każdego punktu pomiarowego wyznaczono co najmniej 300 kropli, aby zagwarantować pewność statystyczną. Maksymalne odchylenie standardowe zmniejszyło się dla PuraLev 200MU z d32,4 min ± 42 μm, a dla PuraLev 600MU z d32,6 min ± 21 μm do około d32 ± 0,5 μm na końcu procesu pompowania. Zmniejszone odchylenie standardowe wynikało ze zwiększonego jednorodnego rozkładu wielkości kropli aż do osiągnięcia stanu ustalonego. W porównaniu z pompami odśrodkowymi MagLev, pompy perystaltyczne i 4-tłokowe membranowe wykazały odchylenia standardowe poniżej d32 ± 10 μm.

figure-results-2 (1)

figure-results-3
Rysunek 4. Typowe profile średnich średnic Sautera d32 w czasie i wyznaczenie zmierzonych średnich średnic Sautera d32,m. Porównanie średnich średnic Sautera d32 (A) dla PuraLev 200MU, (B) dla PuraLev 600MU, (C) dla 4-tłokowej pompy membranowej i (D) dla pompy perystaltycznej. Średnie średnice Sautera d32 wyznaczono przy natężeniu przepływu 3,4 L min-1 i spadkach ciśnienia w zakresie od 0,03 do 0,61 bara. Zmierzona średnia średnica Sautera d32,m została obliczona dla ostatnich 10 minut (granica). Pokazano wynikowe odchylenie standardowe średnich średnic Sautera d32 (N ≥ 300). Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

Zmierzona średnia średnica Sautera jako system porównawczy

Jak opisano powyżej, średnia średnica Sautera zmniejszała się z czasem, aż rozmiary kropli osiągnęły stan ustalony. W ciągu ostatnich 10 minut czasu doświadczenia obliczono średnią wartość średniej średnicy Sautera w celu wyznaczenia zmierzonej średniej średnicy Sautera, która została wykorzystana jako kryterium porównawcze (patrz granica rys. 4A-D). Zmierzone średnie średnice Sautera d32,m przedstawiono na rys. 5 dla natężenia przepływu 3,4 L min-1 i zakresu spadku ciśnienia od 0,03 do 0,61 bara. Większe zmierzone średnie średnice Sautera wyznaczono zarówno dla pomp odśrodkowych MagLev (200 MU i 600 MU), jak i 4-tłokowej pompy membranowej przy niższych spadkach ciśnienia i prędkościach wirnika. Pompa perystaltyczna ujawniła zmierzone średnie średnice Sautera wynoszące d32,m = 10 μm dla wszystkich parametrów procesu. Jak wspomniano wcześniej, siły tnące były niezależne od spadku ciśnienia w pompie perystaltycznej.

Największe zmierzone średnie średnice Sautera wynoszące d32,m = 36 μm dla PuraLev 200MU i d32,m = 34 μm dla PuraLev 600MU uzyskano przy spadku ciśnienia 0,03 bara. W porównaniu z ich odpowiednikami, pompy odśrodkowe serii MagLev uzyskały do 59% większe zmierzone średnie średnice Sautera. Wyniki te wskazują na mniejszą szybkość rozpadu kropli, a tym samym mniejsze naprężenia mechaniczne wynikające z zastosowania pomp odśrodkowych.

Odchylenie standardowe zmierzonych średnich średnic Sautera w stanie ustalonym było poniżej 15%, potwierdzając tym samym wiarygodne i dokładne wartości dla wielkości kropli.

figure-results-4
Rysunek 5. Porównanie zmierzonych średnich średnic Sautera d32,m. Zmierzone średnie średnice pomp odśrodkowych MagLev i ich odpowiedników przy 3,4 l min-1 i spadkach ciśnienia 0,03, 0,30 i 0,61 bara. Przedstawiono wynikowe odchylenia standardowe zmierzonych średnich średnic Sautera d32,m w stanie ustalonym.

Skróty Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

T użytku
2D-ORMdwuwymiarowy pomiar odbicia optycznego
CcdUrządzenie sprzężone z ładunkiem
ChoJajnik chomika chińskiego
CmcKrytyczne stężenie miceli
FBR (Urząd Zarządzaniastosunek przód-tył
FBRM (Mechanizm zarządzania rybami)Metoda odbicia skupionej wiązki
MUWielozadaniowy
SuJednorazowego

Nomenklatura

figure-results-5[m3 sek-1]Przepływ
c[m3 m-3]koncentracja
D32[m]Średnia średnica Sautera
d32,m[m]zmierzona średnia średnica Sautera
ds[m]Średnica powierzchni
d v[m]średnica objętości
Z[Hz]częstotliwość
n[sek-1]prędkość obrotowa wirnika
N[-]Liczba kropli
ptatuśSpadek ciśnienia
tSGodzina
β[kg m-3]stężenie masowe
ρ[kg m-3]gęstość
ω[m3 m-3]Ułamek masowy

Tabela 1. Tabela skrótów i nomenklatury.

Dyskusja

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Celem tego protokołu jest wykazanie przydatności techniki endoskopii inline do pomiaru wielkości kropli w procesach pompowania. W tym celu określono wielkości kropli w układzie emulsyjnym olej-woda i obliczono zmierzoną średnią średnicę Sautera, aby scharakteryzować naprężenia mechaniczne pomp odśrodkowych MagLev, a także ich odpowiedników, pompy perystaltycznej i 4-tłokowej pompy membranowej. Wyniki wykazały niewielką zmienność zmierzonych średnich średnic Sautera, które zostały określone ilościowo za pomocą odchyleń standardowych poniżej 15%, co wskazuje, że wielkości kropli zostały zmierzone wiarygodnie i dokładnie. W związku z tym zmierzona średnia średnica Sautera może być z powodzeniem wykorzystana jako kryterium porównawcze do oceny naprężeń mechanicznych badanych pomp. Pompy odśrodkowe MagLev wykazały większe zmierzone średnie średnice Sautera, co wskazuje na mniejsze naprężenia mechaniczne przy kroplach emulsji w porównaniu z pompami perystaltycznymi i 4-tłokowymi membranowymi. W dotychczasowych badaniach wykazano, że endoskopia inline jest solidną i prostą techniką wiarygodnego pomiaru wielkości kropli1,6,12-14,20-21, co również zostało potwierdzone w tym badaniu. W porównaniu z alternatywnymi technikami pomiarowymi, takimi jak światłowodowy czujnik FBR, FBRM i technika 2D-ORM, technika endoskopowa może być stosowana jako standardowa metoda uzyskiwania precyzyjnych danych w zastosowaniach ciecz/ciecz12,14.

Łatwa obsługa endoskopii inline i prosta produkcja niebiologicznego systemu emulsji olejowo-wodnej umożliwia prostą procedurę wykrywania wielkości kropli zgodnie z tekstem protokołu (patrz wyżej). Niemniej jednak należy wspomnieć, że położenie sondy endoskopowej zależy od przepływu płynu w naczyniu magazynowym. Dalsze badania (dane nie zostały pokazane) wykazały, że soczewka sondy powinna znajdować się bezpośrednio pod rurą wlotową dla niższych natężeń przepływu do 5 L min-1 , aby uniknąć wielokrotnego wykrywania jednej kropli19. Aby uzyskać ostre obrazy przy natężeniu przepływu powyżej 5 L min-1, zaleca się umieszczenie sondy w odległości co najmniej 10 cm od rurki wlotowej. Niezależnie od parametrów procesu, uchwyt endoskopii inline powinien być stabilny, aby uniknąć przesuwania się sondy, co może skutkować rozmyciem obrazu.

Ponadto należy zwrócić szczególną uwagę na to, że wykryta wielkość kropli jest bliska dolnej granicy wykrywalności zastosowanego systemu fotooptycznego, gdzie minimalna wykrywalna średnica kropli wynosi 6,5 μm. Ponieważ oprogramowanie dostarczone przez producenta zostało ulepszone, techniki endoskopii inline mogą niezawodnie wykrywać minimalny rozmiar kropli wynoszący 1 μm. Co więcej, przetwarzanie obrazu będzie dalej rozwijane, aby umożliwić monitorowanie aplikacji przemysłowych online.

Podczas gdy obecne badanie koncentrowało się na stosunkowo niskich natężeniach przepływu do 3,4 l min-1, przyszłe badania powinny uwzględniać szerszy zakres warunków pracy. Pierwsze badania przeprowadzono przy natężeniach przepływu do 20 L min-1 (dane nie pokazane). Zaleca się jednak rozcieńczenie 1:2 (cśrodek powierzchniowo czynny = 0,09 ml L-1, colej = 0,64 ml L-1) układu emulsji olej-woda przy natężeniach przepływu powyżej 10 L min-1 19, ponieważ w przeciwnym razie zwiększony rozpad kropli spowodowany większymi naprężeniami mechanicznymi wpłynąłby na wykrywanie kropli i zmniejszyłby liczbę wykrywanych kropli. Testy przeprowadzono w rozcieńczeniu 1:2 i porównano z wynikami nierozcieńczonego układu emulsji olej-woda. W przypadku obu podejść średnie średnice Sautera zostały wiarygodnie zmierzone (odchylenie standardowe poniżej 5%). W związku z tym zmniejszona frakcja objętościowa (rozcieńczenie 1:2) nie miała wpływu na zmierzone średnie średnice Sautera, a zatem rozpad kropla-kropla był znikomy.

Te potężne podejścia eksperymentalne stanowią dobrą podstawę do ulepszenia techniki endoskopii, a także powiązanego oprogramowania do akwizycji, rozpoznawania i analizy wyników. Ponadto z powodzeniem wykazano przydatność techniki endoskopii do klasyfikowania typów i serii pomp w zależności od ich naprężeń mechanicznych. Uzyskane wyniki są niezbędne do opracowania konstrukcji pomp i optymalizacji pomp w celu zmniejszenia uszkodzeń ogniw.

Oświadczenia

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wolfgang Dornfeld i Reto Schöb są pracownikami firmy Levitronix, Ltd., producenta pomp odśrodkowych MagLev.

Podziękowania

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy chcieliby podziękować Komisji ds. Technologii i Innowacji (CTI, Szwajcaria) za wsparcie finansowe (nr 13236.1 PFFLI-LS).

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Kamera CCDAllied Vision Technologies GmbHGX2750Sprzęt do endoskopii inline
C-Flex Rurki biofarmaceutyczneSaint-Gobain Performance Plastics374-375-4Rurka
Wybierz długość rurki około 45  cm przed pompą.
Rurki biofarmaceutyczne C-FlexSaint-Gobain Performance Plastics374-375-3Rurka
Wybierz długość rurki około 45  cm za pompą i zacisk na czujniku przepływu do tej rurki.
Złącze CLAVEVictus011-C2000Port próbkowania
Kontroler LPC-200.1-02Levitronix GmbH100-30030Sterownik PuraLev 200MU
Kontroler LPC-600.1-02Levitronix GmbH100-30033Sterownik PuraLev 600MU
Czujnik zaciskowy LeviFlow LFSC-12Levitronix GmbH100-30329Czujnik przepływu dla natężeń przepływu poniżej 5  L  min-1
LeviFlow Konwerter LFC-1C-CSLevitronix GmbH100-30328Urządzenie wyjściowe czujnika przepływu 
Masterflex I/P Easy LoadFisher Scientific AGEW-77963-10Pompa perystaltyczna
Zawór swobodnego przepływuMitos Parker Hannifin Europe Sà rlFFLQR16S6S6AMZawór
Mobil Eal ArcticExxon Mobil CorporationMobil EAL Arctic 22Oil
Przygotować emulsję bezpośrednio przed eksperymentem.
SilnikElektromotorenwerk Brienz AG7WAC72N4THTFSilnik do wału mieszadła
Silnik BSM-1.4Levitronix GmbH100-10005Silnik PuraLev 200MU
Silnik LPM-600.4Levitronix GmbH100-10038Silnik PuraLev 600MU
Norm-Ject 10 ml Luer LockRestek Corporation22775strzykawkowej
LPP-200.5Levitronix GmbH100-90525Głowica pompy PuraLev 200MU
Głowica pompy LPP-600.18Levitronix GmbH100-90548Głowica pompy PuraLev 600MU
Quattroflow 1200-SUAlmatechnik AGQF 12004-tłokowa pompa membranowa
SciPres SensorSciLog080-695PSXCzujnik
SciPres Sensor MonitorSciLog080-690Urządzenie wyjściowe czujnika ciśnienia 
Sonda endoskopowa SOPAT-VF InlineSOPAT GmbHEndoskopia inline
StroboskopDrello GmbH & Co KGDrelloscop 255-01Sprzęt do endoskopii inline
Triton X-100Sigma-AldrichX100Surfaktant
Handle z rękawicami i okularami.
(ostra toksyczność, podrażnienie oczu)
Głowica pompy ciśnienia

Bibliografia

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Wollny, S. Experimentelle und numerische Untersuchungen zur Partikelbeanspruchung in gerührten (Bio ) Reaktoren (Experimental and numerical investigations of particle stress in stirred (bio-) reactor). , Technische Universität Berlin. Berlin. (2010).
  2. Jaouen, P., Vandanjon, L., Quéméneur, F. The shear stress of microalgal cell suspension (Tetraselmis suecica) in tangential flow filtration systems: the role of pumps. Bioresour. Technol. 68 (2), 149-154 (1999).
  3. Bee, J. S., et al. Response of a concentrated monoclonal antibody formulation to high shear. Biotechnol. Bioeng. 103 (1), 936-943 (2009).
  4. Klaus, S. Bluttraumatisierung bei der Passage zeitkonstanter und zeitvarianter Scherfelder (Blood trauma during passage through steady and transient shear fields). , RWTH Aachen University. Aachen. (2004).
  5. Blaschczok, K., et al. Investigations on mechanical stress caused to CHO suspension cells by standard and single-use pumps. Chem. Ing. Tech. 85 (1-2), 144-152 (2012).
  6. Dittler, I., et al. A cost-effective and reliable method to predict mechanical stress in single-use and standard pumps. Eng. Life Sci. 14 (3), 311-317 (2014).
  7. Kaiser, S. C., Eibl, D. Single-use Pumpen in der Prozesstechnologie (Single-use pumps in the process technology). Chemie extra. , 30-31 (2013).
  8. Aggarwal, A., et al. Use of a single-circuit CentriMag® for biventricular support in postpartum cardiomyopathy. Perfusion. 28 (2), 156-159 (2012).
  9. Kouretas, P. C., et al. Experience with the Levitronix CentriMag® in the pediatric population as a bridge to decision and recovery. Artif. Organs. 33 (11), 1002-1004 (2009).
  10. Khan, N. U., Al Aloul, M., Shah, R., Yonan, N. Early experience with the Levitronix CentriMag® device for extra corporeal membrane oxygenation following lung transplantation. Eur. J. of Cardio Thorac. 34 (6), 1262-1264 (2008).
  11. Zhang, J., et al. Computational and experimental evaluation of the fluid dynamics and hemocompatibility of the CentriMag blood pump. Artif. Organs. 30 (3), 168-177 (2006).
  12. Maaß, S., Grünig, J., Kraume, M. Measurement techniques for drop size distributions in stirred liquid-liquid systems. Chem. Process Eng. 30 (4), 635-651 (2009).
  13. Maaß, S., Rojahn, J., Hänsch, R., Kraume, M. Automated drop detection using image analysis for online particle size monitoring in multiphase systems. Comput. Chem. Eng. 45, 27-37 (2012).
  14. Maaß, S., Wollny, S., Voigt, A., Kraume, M. Experimental comparison of measurement techniques for drop size distributions in liquid/liquid dispersions. Exp. Fluids. 50 (2), 259-269 (2011).
  15. Henzler, H. J. Particle Stress in Bioreactors. Adv. Biochem. Eng./ Biotechnol. 67, 35-82 (2000).
  16. Sprow, F. B. Drop size distributions in strongly coalescing agitated liquid-liquid systems. AIChE J. 13 (5), 995-998 (1967).
  17. Shinnar, R. On the behaviour of liquid dispersions in mixing vessels. J. Fluid Mech. 10 (2), 259-275 (1961).
  18. Ritter, J., Kraume, M. On-line measurement technique for drop size distributions in liquid/liquid systems at high dispersed phase fractions. Chem. Eng. Technol. 23 (7), 579-581 (2000).
  19. Fries, T. Quantifizierung der mechanischen Beanspruchung von Pumpen auf tierische Zellen mittels des nicht-biologischen Modellsystems Emulsion (Quantification of mechanical stress caused by pumps on mammalian cells using a non-biological emulsion model system). , University of Applied Sciences Berlin. Berlin. (2014).
  20. Maaß, S., Wollny, S., Sperling, R., Kraume, M. Numerical and experimental analysis of particle strain and breakage in turbulent dispersions. Chem. Eng. Res. Des. 87 (4), 565-572 (2009).
  21. Maaß, S., Metz, F., Rehm, T., Kraume, M. Prediction of drop sizes for liquid/liquid systems in stirred slim reactors - Part I: Single stage impellers. Chem. Eng. 162 (2), 792-801 (2010).

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Endoskopia w liniipomiar wielko ci kropliprzewidywanie napr e mechanicznychemulsja olej wodarednica Sauteraoprogramowanie do rozpoznawania obraz wkonfiguracja obwodu pompyprzygotowanie zbiornika magazynowegokontrola nat enia przep ywuprotok analizy danych

Powiązane artykuły