Artykuł metodologiczny

Właściwości transportowe ibuprofenu zamkniętego w hydrożelach z nanogąbek cyklodekstryny: badanie spektroskopii protonów HR-MAS NMR

DOI:

10.3791/53769

⸱

15 sierpnia 2016

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Chemistry, Materials and Chemical Engineering "G. Natta", Politecnico di Milano, 2Università degli studi e-Campus, 3ICRM, CNR - Consiglio Nazionale delle Ricerche, 4Elettra Sincrotrone Trieste, 5Department of Chemistry, University of Torino

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Reżimy ruchu ibuprofenu zamkniętego w sieci polimerowej nanogąbek β-cyklodekstryny są badane za pomocą techniki NMR z gradientem pola pulsacyjnego (PGSE). Szczegółowo opisano syntezę, oczyszczanie, ładowanie leku, realizację sekwencji impulsów NMR oraz analizę danych w celu obliczenia średniego kwadratu przemieszczenia leku w kilku okresach obserwacji.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Chemiczne sieciowanie β-cyklodekstryny (β-CD) z dwuwodnikiem etylenodiaminotetraoctowym (EDTA) doprowadziło do powstania rozgałęzionych polimerów określanych jako nanogąbki cyklodekstrynowe (CDNSEDTA). Opisano dwa różne preparaty o proporcjach molowych CD-EDTA 1:4 i 1:8. Odpowiednie usieciowane polimery zetknięto z 0,27 M wodnym roztworem soli sodowej ibuprofenu (IP), co doprowadziło do uzyskania jednorodnych, bezbarwnych, naładowanych lekiem hydrożeli.

Systemy charakteryzowały się spektroskopią NMR z wykorzystaniem wysokiej rozdzielczości z wirowaniem magicznego kąta (HR-MAS). Spektroskopia NMR z gradientem pola pulsacyjnego (PGSE) została wykorzystana do wyznaczenia średniego przemieszczenia kwadratowego (MSD) IP wewnątrz żelu polimerowego w różnych czasach obserwacji td. Dane zostały następnie przetworzone w celu zbadania zależności MSD od czasu: MSD = f(td). Proponowana metodologia jest przydatna do scharakteryzowania różnych reżimów dyfuzji, które w zasadzie mogą wystąpić w substancji rozpuszczonej wewnątrz hydrożelu, a mianowicie dyfuzji normalnej lub anomalnej. Przedstawiono i omówiono pełne protokoły, w tym przygotowanie i oczyszczanie polimerów, otrzymywanie hydrożeli zawierających leki, przygotowanie próbki NMR, pomiar MSD za pomocą spektroskopii HR-MAS NMR oraz końcowe przetwarzanie danych w celu osiągnięcia zależności od czasu MSD. Przedstawione eksperymenty stanowią przypadek paradygmatyczny, a uzyskane dane zostały omówione pod kątem innowacyjnego podejścia do charakterystyki właściwości transportowych zamkniętego gościa w obrębie polimerowego hosta o potencjalnym zastosowaniu w dostarczaniu leków.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Rośnie zainteresowanie projektowaniem i formułowaniem systemów polimerowych zdolnych do uwięzienia, poprzez oddziaływania niekowalencyjne, małych cząsteczek o potencjalnej aktywności biochemicznej. Oczekuje się, że takie materiały znajdą zastosowanie w transporcie substancji czynnej do selektywnego celu i uwalniania pod wpływem bodźców zewnętrznych, takich jak zmiany pH, temperatura itp. W tym kontekście hydrożele okazały się wszechstronnymi i potężnymi materiałami dla nanomedycyny w celu kontrolowanego uwalniania leków1. Tworzenie hydrożeli polimerowych można osiągnąć poprzez połączenie łańcuchów makromolekularnych poprzez i) fizyczne, niekowalencyjne oddziaływania, takie jak wiązania wodorowe, ii) kowalencyjne sieciowanie łańcuchów prowadzące do trójwymiarowej sieci zdolnej do pęcznienia w obecności roztworu wodnego lub iii) połączenie dwóch wymienionych metod2-4.

Szczególnie wszechstronna klasa trójwymiarowych, pęczniejących polimerów do enkapsulacji organicznych i nieorganicznych gatunków może być uzyskana zaczynając od naturalnej β-cyklodekstryny (β-CD) poprzez kondensację z odpowiednimi, aktywowanymi pochodnymi kwasu tetrakarboksylowego 5-8, co daje początek cyklodekstrynowym nanogąbkom (CDNS). Synteza, charakterystyka i zastosowanie CDNS jest skonsolidowanym tematem badawczym naszej grupy. Wyniki uzyskane w ciągu ostatnich kilku lat wskazują, że CDNS wykazują intrygujące właściwości pęcznienia, wchłaniania/włączania substancji chemicznych i uwalniania małych cząsteczek leków, z zastosowaniem w kontrolowanym uwalnianiu farmaceutycznych składników aktywnych 9-11 i chemii środowiskowej12-14.

Biorąc pod uwagę te przesłanki, dwie główne kwestie, które należy rozwiązać, dotyczą efektywnego ładowania aktywnego związku w żelu polimerowym oraz lepszego zrozumienia ruchliwości substancji rozpuszczonych w matrycach żelowych15. W piśmiennictwie znajdują się zarówno badania eksperymentalne, jak i teorie związane z mechanizmami dyfuzji małych cząsteczek w sieciach makromolekularnych16,17. Spektroskopia NMR z gradientem pola pulsacyjnego (PGSE) NMR jest dobrze znaną metodą strukturalną szeroko stosowaną do badania dyfuzji translacyjnej małych cząsteczek w rozpuszczalnikach18 lub samodyfuzji czystych cieczy. Najnowsze osiągnięcia technologii NMR o wysokiej rozdzielczości z wykorzystaniem magicznego kąta wirowania (HR-MAS) umożliwiły zbieranie danych NMR o wysokiej rozdzielczości ruchomych cząsteczek w heterogenicznych zawiesinach19, żelach i pęczniejących polimerach20,21. Rzeczywiście, układ eksperymentalny łączący spektroskopię HR-MAS NMR i sekwencję impulsów PGSE zapewnia wyjątkową okazję do obserwacji cząsteczek substancji rozpuszczonej w środowisku molekularnym gospodarza. W ten sposób można uzyskać ważne dane na temat właściwości transportowych cząsteczki leku uwięzionej w matrycy żelowej. W ten sposób można uzyskać wysokiej jakości dane eksperymentalne, co pozwala na bardziej racjonalne projektowanie nanostrukturalnych systemów host-gość.

W niniejszej pracy opisujemy szczegółowe protokoły dla następujących kroków: i) synteza i oczyszczanie dwóch różnych formuł CDNS usieciowanych polimerami EDTA (Rysunek 1), określanych jako CDNSEDTA, i charakteryzujących się różnymi stosunkami molowymi CD/linkera: 1:4 (CDNSEDTA 1:4) i 1:8 (CDNSEDTA 1:8); ii) przygotowanie hydrożeli zawierających lek zarówno dla CDNSEDTA 1:4, jak i CDNSEDTA 1:8. W tym etapie wykorzystaliśmy, jako modelową cząsteczkę leku, popularną niesteroidową przeciwzapalną sól sodową ibuprofenu (IP); iii) dokładne zbadanie właściwości transportowych IP w hydrożelach CDNSEDTA za pomocą spektroskopii PGSE-HRMAS NMR. Proponowana przez nas metoda opiera się na pomiarze średniego kwadratowego przemieszczenia (MSD) kapsułkowanego leku w hydrożelu, a następnie analizie zależności MSD od czasu.

Pragniemy podkreślić, że metodologia opisana powyżej - która skupia się na zależności MDS leku w matrycy w czasie - dostarcza szerszego spektrum informacji w porównaniu do skonsolidowanej metodologii opartej wyłącznie na określaniu współczynnika dyfuzji leku. Niedawno wykazaliśmy21, że takie podejście pozwoliło na rozróżnienie normalnych i anomalnych reżimów dyfuzji doświadczanych przez IP zamknięte w hydrożelach CDNS.

Uważamy zatem, że opis krok po kroku syntezy/oczyszczania polimerów, tworzenia hydrożeli naładowanych lekiem, charakterystyki HR-MAS NMR i przetwarzania danych MDS, jest potężnym zestawem narzędzi dla naukowców zainteresowanych charakteryzacją nanostrukturalnych systemów do zatrzymywania i uwalniania małych cząsteczek.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Synteza polimerów CDNSEDTA

  1. Przed użyciem wysuszyć β-cyklodekstrynę (β-CD) w piekarniku w temperaturze 80 °C przez 4 hr. Przed zastosowaniem w protokole wysuszyć 500 ml dimetylosulfotlenku (DMSO) oraz 100 ml trietyloaminy (Et3N) na sitach molekularnych (4 Å) przez 24 hr.
  2. Wlać 25 ml DMSO do jednoszyjnej kolby okrągłodنnej o pojemności 50 ml. Podczas mieszania magnetycznego dodać 5,675 g β-CD (5 mmol). Aby ograniczyć powstawanie grudek, proszek β-CD dodawać do DMSO małymi porcjami.
  3. Po około 30 min dodać 6 ml Et3N do homogenicznego roztworu, używając pipety pomiarowej o pojemności 10 ml. Mieszać mieszaninę przez 15 min w RT. Umieścić kolbę w łaźni wodnej w RT.
    UWAGA: Reakcja pomiędzy β-CD a EDTA jest egzotermiczna. Dlatego umieszczenie kolby w łaźni wodnej wspomaga wymianę ciepła, zapobiegając przegrzaniu mieszaniny reakcyjnej.
  4. Pod intensywnym mieszaniem dodać 5,124 g (20 mmol, otrzymywanie CDNSEDTA 1:4) lub 10,248 g (40 mmol, otrzymywanie CDNSEDTA 1:8) bezwodnika EDTA.
  5. Po 3 hr usunąć stały materiał (CDNSEDTA 1:4 lub CDNSEDTA 1:8) z kolby za pomocą szpatułki i rozdrobnić go w moździerzu.
  6. Przemyć stały materiał na papierze filtracyjnym w RT acetonem (100 ml × 5 razy), HCl 0,1 M (200 ml × 5 razy) oraz wodą dejonizowaną (200 ml × 3 razy).
  7. Na koniec wysuszyć cały stały materiał na powietrzu w RT przez 48 hr, dokładnie rozetrzeć w moździerzu, a następnie przechowywać w próżni (< 15 mbar) przez 2 hr w temperaturze 45 °C.

figure-protocol-1
Rycina 1: Schematyczne przedstawienie polimerów CDNSEDTA. Schemat ścieżki syntezy. Po lewej: struktura cząsteczkowa monomeru β-cyklodekstryny (β-CD) oraz czynnika sieciującego EDTA-dianhydrydu. Na strzałce ogólne warunki reakcji. Po prawej: szkic sieciowanego polimeru. Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tej ryciny.

2. Pomiary HR-MAS NMR

  1. Przygotowanie próbek do HR-MAS NMR
    1. Przygotować 0,27 M roztwór soli sodowej ibuprofenu (IP) w wodzie deuterowanej (99,8%).
    2. Do szklanej fiolki o pojemności 2 ml dodać 20 mg CDNSEDTA 1:4 oraz 2 mg bezwodnego węglanu sodu (Na2CO3) do 150 µl roztworu przygotowanego w punkcie 2.1.1). Zawartość fiolki wymieszać małą szpatułką w celu homogenizacji. Odczekać 2 hr przed użyciem żelu otrzymanego w tej procedurze. Powtórzyć ten punkt dla polimeru CDNSEDTA 1:8.
    3. Za pomocą małej szpatułki wprowadzić żel do rotora NMR 5mm odpowiedniego do eksperymentów HR-MAS NMR. Całkowita ilość użytego żelu zależy od objętości wewnętrznej rotora (zalecane 12 μl).
  2. Eksperymenty HR-MAS 1H NMR
    1. Ustawić następujące parametry instrumentalne: prędkość wirowania rotora 4 KHz w pneumatycznej jednostce sterowania MAS, temperaturę próbki 305 K w jednostce zmiennej temperatury.
    2. Pozyskać widma 1H HR-MAS NMR ibuprofenu w układach polimerowych CDNSEDTA (1:4) i CDNSEDTA (1:8), stosując konwencjonalną sekwencję jednopulsową na rezonansie protonowym.
      1. Utworzyć nowy zestaw danych. Kliknąć zakładkę „AcquPars”. Wybrać PULPROG: zg.
      2. Wybrać liczbę skanów (NS = 4) oraz opóźnienie czasowe między nimi (D1 = 5 sec). Ustawić szerokość widma (SW = 8 ppm), domenę czasową (TD = 16K) oraz wzmocnienie odbiornika (RG = 32).
      3. Wpisać „zg” na konsoli, aby uzyskać sygnał zanikającej indukcji swobodnej (FID) na ekranie. Aby przetworzyć dane, kliknąć zakładkę „ProcPars”. Ustawić rozmiar widma (SI = 32K), funkcję okna mnożenia wykładniczego (WDW = EM) oraz poszerzenie linii (LB = 1). Wpisać „ft”, aby wykonać transformację Fouriera. Cofazować widmo za pomocą zakładki fazy na ekranie. Uzyskać wysokorozdzielcze, dobrze rozdzielone widmo.

figure-protocol-2
Rycina 2: Sekwencja impulsów Bipolar Pulse Pairs Longitudinal Eddy Current Delay (BPPLED). Schematyczne przedstawienie sekwencji impulsów wykorzystanej do przeprowadzenia eksperymentów PFGSE. Cykl fazowy dla impulsów 90° to: P1: (0)16, P2: (0022)4, P3: (0)4 (2)4 (1)4 (3)4, P4: (0202 2020 1313 3131), P5: (0)4 (2)4 (1)4 (3)4. Impulsy 180° są skierowane w stronę + x. (zmodyfikowano na podstawie ref.18) Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.

  1. Eksperymenty HR-MAS 1H NMR PGSE
    UWAGA: Eksperymenty PGSE są przeprowadzane przy użyciu sekwencji impulsów BPPLED18 przedstawionej na Rysunku 2. Jest to eksperyment pseudo dwuwymiarowy z rampą gradientu zwiększającą się liniowo od 2% do 100% w wymiarze pośrednim. Intensywność sygnału jest tłumiona w zależności od czasu dyfuzji Δ oraz impulsu gradientu δ. Przed prawidłowym przeprowadzeniem eksperymentu PGSE wymagana jest optymalizacja tych parametrów. Optymalizację wykonuje się poprzez przeprowadzenie kilku pomiarów 1D, w których Δ pozostaje stałe, podczas gdy δ jest zmieniane.
    1. Optymalizacja parametrów
      1. Utwórz nowy zestaw danych - eksperyment numer 1. Kliknij zakładkę „AcquPars”. Wybierz PULPROG: ledbpgp2s1d, czyli sekwencję impulsów 1D do optymalizacji dyfuzji.
      2. Wybierz liczbę skanów (NS = 16) oraz opóźnienie czasowe między nimi (D1 = 10 s). Ustaw szerokość widma (SW = 8 ppm), domenę czasową (TD = 16K) oraz wzmocnienie odbiornika (RG = 32).
      3. Ustaw Δ (D20 w sekwencji) na wartość stałą, a δ (p30) na wartość próbną. Wartości startowe: Δ = 50 ms, δ = 3 ms (maksymalna dopuszczalna wartość dla aparatury wysokiej rozdzielczości).
      4. Odczytaj wartość częstotliwości widma (SFO1) z eksperymentu 1H i zastosuj ją teraz. Ustaw natężenie gradientu GPZ6 na 2%. Powtórz krok 2.2.2.3. Użyj tego widma jako referencyjnego dla optymalizacji.
      5. W tym samym zestawie danych utwórz eksperyment numer 2. Zachowaj wszystkie parametry eksperymentalne. Zwiększ natężenie gradientu GPZ6 do 95%. Powtórz krok 2.2.2.3. Porównaj to widmo z widmem referencyjnym za pomocą ikony podwójnego wyświetlacza i zaobserwuj zmianę intensywności sygnału.
        UWAGA: Dobrze wytłumione widmo powinno mieć około 5% pozostałej intensywności sygnału w porównaniu z widmem referencyjnym. Jeśli intensywność sygnału zostanie całkowicie utracona, zmniejsz wartość δ i powtórz procedurę z sekcji 2.3.1 od punktu 2.3.1.3, aż zostanie znaleziona właściwa wartość dla δ.
      6. Powtórz procedurę optymalizacji parametrów z sekcji 2.3.1 dla wszystkich pięciu wartości Δ.
        UWAGA: Wybierz pięć wartości dla Δ = 50, 80, 110, 140 i 170 ms i zoptymalizuj odpowiadające im wartości δ na 3, 2,7, 2,4, 2,1, 1,8 ms (dla IP w CDNSEDTA 1:8) oraz δ na 2,7, 2,4, 2, 1,7, 1,4 (dla IP w CDNSEDTA 1:4).
    2. Akwizycja 2D zestawu danych dyfuzyjnych
      1. W tym samym zestawie danych utwórz eksperyment numer 3; wszystkie 1D parametry eksperymentalne zostaną załadowane. Wpisz „eda”. Wybierz PULPROG: ledbpgp2s, czyli sekwencję impulsów 2D, i zmień parmode na 2D.
      2. Ustaw FnMODE=QF. Ustaw domenę czasową TD w wymiarze F2 na 32, co odpowiada liczbie kroków gradientu. Wszystkie pozostałe parametry są ustawione poprawnie. Wpisz „DOSY”, a rampa gradientu zostanie wygenerowana i zapisana w pliku. Wartości początkowa i końcowa rampy (2 - 95) są podawane jako parametry wejściowe. Akwizycja zostaje teraz rozpoczynana.
  2. Przetwarzanie danych
    1. Wpisz „xf2”, aby wykonać transformację Fouriera w wymiarze F2. Wpisz „abs2”, aby przeprowadzić korekcję linii bazowej w wymiarze F2. Wpisz „setdiffparm”, aby przywołać parametry eksperymentalne (Δ, δ i listę gradientów) dla kolejnego etapu przetwarzania.
    2. Kliknij „T1/T2 relaxation module” w zakładce analizy i określ piki do dopasowania, korzystając z pierwszego widma eksperymentu 2D. Zdefiniuj zakresy pików i wykonaj dopasowanie. Uzyskano intensywności sygnałów dla każdego zastosowanego kroku gradientu.
      UWAGA: Intensywności sygnałów I(q, td), dla każdej wartości Δ, zależą od zmiennych eksperymentalnych: zastosowanego gradientu pola impulsowego (g), zmiennej czasowej (δ), stosunku magnetycznego (γ) q= (γgδ) zgodnie z następującym równaniem:
      figure-protocol-3
      gdzie molekularne MSD=z2.
    3. Wyeksportuj intensywności sygnałów do arkusza kalkulacyjnego i wykonaj liniowe dopasowanie danych, aby uzyskać wartość z2 dla każdego obserwowanego czasu dyfuzji td.
      UWAGA: Wartość MSD jest powiązana z czasem obserwacji td zgodnie z: figure-protocol-4
    4. Wykonaj wykres log-log z2 w funkcji td dla każdej eksperymentalnej wartości td. Wartość wykładnika α jest nachyleniem regresji liniowej. Bardziej wyczerpującą dyskusję na temat fizycznych aspektów powyższych równań można znaleźć w ref. 21 oraz w cytowanych tam źródłach.
      UWAGA: W zależności od wartości wykładnika α, reżim dyfuzji definiuje się jako: i) dyfuzja izotropowa nieograniczona dla α = 1, ii) anomalny reżim subdyfuzyjny dla 0 < α < 1, iii) anomalny reżim superdyfuzyjny dla α > 1.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

W celu weryfikacji skuteczności tego podejścia zastosowaliśmy tę metodologię najpierw w odniesieniu do cząsteczki leku IP rozpuszczonej w wodzie. Pełny opis reprezentatywnych wyników znajduje się w ref. 21. Tutaj skupimy się natomiast na aspektach metodologicznych oraz praktycznym podejściu do gromadzenia i analizy danych. Rysunek 3 przedstawia w skali półlogarytmicznej znormalizowane spadki sygnału eksperymentalnego I(q, td)/I(0, td) jako funkcję

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Przedstawiamy eksperymentalną metodologię określania reżimu dyfuzji małej cząsteczki leku zamkniętej w dwóch reprezentatywnych preparatach hydrożeli CDNSEDTA. HR-MAS PGSE NMR pozwala na wyznaczenie średniego kwadratu przemieszczenia małych cząsteczek w danym czasie dyfuzji (w zakresie od kilku milisekund do sekundy), a następnie monitorowanie odległości w skalach mikrometrycznych. W obserwowanym zakresie (50 - 170 ms) dla każdego badanego układu obserwuje się tylko jeden rodzaj ruchu. Należy jednak podkreślić, że przy dł...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy dziękują PRIN 2010-2011, NANOMED prot. 2010, FPTBSH i PRIN 2010-2011 PROxy prot. 2010PFLRJR_005 za dofinansowanie.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Sonda HR-MASBRUKERN/ASonda do pomiarów NMR na próbkach półstałych
Spektrometr NMRBRUKERDRX 500FT Spektrometr NMR do stanu ciekłego i półsolisowego
i beta;-cyklodekstryny (β-CD)Alfa-AesarJ63161
Odczynnik Ethylenodiaminetetracetic (EDTA) dwuwodnikSigma-Aldrich332046
Dimetylosulfotlenek (DMSO)Alfa-AesarD0798Rozpuszczalnik
TrietyloaminaSigma-Aldrich471283Baza (odczynnik)
Ibuprofen (IP) Sól sadowaSigma-AldrichI1892Lek przeciwzapalny
Excel 2010MicrosoftN/Aarkusz speadsheet do analizy danych
Origin 8 SR0OriginLab Co.Arkusz speadsheet do analizy danych

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Sharpe, L. A., Daily, A. M., Horava, S. D., Peppas, N. A. Therapeutic applications of hydrogels in oral drug delivery. Expert Opin. Drug Deliv. 11, 901-915 (2014).
  2. Hennik, W. E., van Nostrum, C. F. Novel crosslinking methods to design hydrogels. Adv. Drug Deliv. Rev. 54, 13-36 (2002).
  3. Yu, L., Ding, J. D. Injectable hydrogels as unique biomedical materials. Chem. Soc. Rev. 37, 1473-1481 (2008).
  4. Ma, M., Kuang, Y., Gao, Y., Zhang, Y., Gao, P., Xu, B. Aromatic-Aromatic Interactions Induce the Self-Assembly of Pentapeptidic Derivatives in Water To Form Nanofibers and Supramolecular Hydrogels. J. Am. Chem. Soc. 132, 2719-2728 (2010).
  5. Trotta, F., Tumiatti, W. Patent WO. , 03/085002 (2003).
  6. Trotta, F., Tumiatti, W., Cavalli, R., Zerbinati, O., Roggero, C. M., Vallero, R. Ultrasound-assisted synthesis of cyclodextrinbased nanosponges. Patent WO. , 06/002814 (2006).
  7. Trotta, F., Cavalli, R. Characterization and applications of new hyper-cross-linked cyclodextrins. Compos. Interface. 16, 39-48 (2009).
  8. Cavalli, R., Trotta, F., Tumiatti, W. Cyclodextrin-based nanosponges for drug delivery. J. Incl. Phenom. Macrocycl. Chem. 56, 209-213 (2006).
  9. Trotta, F., et al. Cyclodextrin-based nanosponges as a vehicle for antitumoral drugs. Patent WO. , 09/003656 (2009).
  10. Vyas, A., Shailendra, S., Swarnlata, S. Cyclodextrin based novel drug delivery systems. J. Incl. Phenom. Macrocycl. Chem. 62, 23-42 (2008).
  11. Swaminathan, S., Vavia, P. R., Trotta, F., Torne, S. Formulation of beta-cyclodextrin based nanosponges of itraconazole. J. Incl. Phenom. Macrocycl. Chem. 57, 89-94 (2007).
  12. Mamba, B. B., Krause, R. W., Malefetse, T. J., Gericke, G., Sithole, S. P. Cyclodextrin nanosponges in the removal of organic matter to produce water for power generation. Water SA. 34, 657-660 (2008).
  13. Mamba, B. B., Krause, R. W., Malefetse, T. J., Nxumalo, E. N. Monofunctionalized cyclodextrin polymers for the removal of organic pollutants from water. Environ.Chem. Lett. 5, 79-84 (2007).
  14. Mhlanga, S. D., Mamba, B. B., Krause, R. W., Malefetse, T. J. Removal of organic contaminants from water using nanosponge cyclodextrin polyurethanes. J. Chem. Technol. Biot. 82, 382-388 (2007).
  15. Lehmann, S., Seiffert, S., Richtering, W. Spatially Resolved Tracer Diffusion in Complex Responsive Hydrogels. J. Am. Chem. Soc. 134, 15963-15969 (2012).
  16. Ferrer, G. G., Pradas, M. M., Ribelles, J. L. G., Colomer, F. R., Castilla-Cortazar, I., Vidaurre, A. Influence of the nature of the porous confining network on the sorption, diffusion and mechanical properties of hydrogel IPNs. Eur. Polym. J. 46, 774-782 (2010).
  17. Santoro, M., Marchetti, P., Rossi, F., Perale, G., Castiglione, F., Mele, A., Masi, M. Smart approach to evaluate drug diffusivity in injectable agar-carbomer hydrogels for drug delivery. J. Phys. Chem B. 115, 2503-2510 (2011).
  18. Johnson, C. S. Diffusion ordered nuclear magnetic resonance spectroscopy: principles and applications. Prog. Nucl. Magn. Reson. Spectroscopy. 34, 203-256 (1999).
  19. Viel, S., Ziarelli, F., Caldarelli, S. Enhanced diffusion-edited NMR spectroscopy of mixtures using chromatographic stationary phases. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 100, 9696-9698 (2003).
  20. Alam, T. M., Hibbs, R. M. Characterization of heterogeneous solvent diffusion environments in anion exchange membranes. Macromolecules. 47, 1073-1084 (2014).
  21. Ferro, M., Castiglione, F., Punta, C., Melone, L., Panzeri, W., Rossi, B., Trotta, F., Mele, A. Anomalous diffusion of Ibuprofen in cyclodextrin nanosponges hydrogels: an HR-MAS NMR study. Beilstein J. Org. Chem. 10, 2715-2723 (2014).
  22. Wolf, G., Kleinpeter, E. Pulsed Field Gradient NMR Study of Anomalous Diffusion in a Lecithin-Based Microemulsion. Langmuir. 21, 6742-6752 (2005).
  23. Rossi, F., Castiglione, F., Ferro, M., Marchini, P., Mauri, E., Moioli, M., Mele, A., Masi, M. Drug-Polymer interactions in hydrogel-based drug-delivery systems: an experimental and theoretical study. Chem. Phys. Chem. , (2015).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Enkapsulacja ibuprofenugradient pola impulsowegoredni kwadrat przemieszczeniahydro ele obci one lekiemanaliza re imu dyfuzyjnegoprzygotowanie polimeruprzygotowanie pr bki do NMRprzetwarzanie danych

Powiązane artykuły