Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Standaryzowane zapalenie otrzewnej stentu okrężnicy u szczurów - prosty, wykonalny model zwierzęcy do wywoływania septycznego ostrego uszkodzenia nerek

1.4K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/54448

⸱

15 lutego 2022

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

W tym artykule

Podsumowanie

Ostre uszkodzenie nerek (AKI) jest poważnym powikłaniem u krytycznie chorych pacjentów i wiąże się ze zwiększoną śmiertelnością. W tym miejscu przedstawiamy wiarygodny i powtarzalny model in vivo do naśladowania AKI w warunkach zapalnych, który może przyczynić się do zrozumienia patogenezy septycznego AKI.

Streszczenie

AKI u pacjentów z sepsą wiąże się ze zwiększoną śmiertelnością i słabymi wynikami, pomimo znacznych wysiłków zmierzających do lepszego zrozumienia jej patofizjologii. W tym miejscu przedstawiono model in vivo, który łączy standaryzowaną ogniskową septyczną w celu wywołania AKI i konfigurację intensywnej terapii (OIOM) w celu zapewnienia zaawansowanego monitorowania hemodynamicznego i terapii porównywalnej z posocznicą u ludzi. Sepsa jest wywoływana przez standaryzowane zapalenie otrzewnej w stencie okrężnicy (sCASP). AKI bada się funkcjonalnie poprzez pomiar próbek krwi i moczu, a także histologicznie poprzez ocenę wyników histopatologicznych. Ponadto zaawansowane monitorowanie hemodynamiczne i możliwość powtarzalnego pobierania gazometrii krwi umożliwiają zróżnicowaną analizę ciężkości indukowanej sepsy.

Metoda sCASP jest ustandaryzowaną, niezawodną i powtarzalną metodą wywoływania septycznego AKI. Konfiguracja intensywnej terapii, ciągłe monitorowanie hemodynamiki i wymiany gazowej, niska śmiertelność, a także możliwość szczegółowej analizy funkcji nerek i upośledzeń to zalety tej konfiguracji. W związku z tym opisana metoda może stanowić nowy standard dla eksperymentalnych badań septycznego AKI.

Wprowadzenie

Sepsa nadal pozostaje główną przyczyną zgonów na oddziałach intensywnej terapii (OIOM) bez serca, ze śmiertelnością ≈ 30 - 50%1,2,3. Cechą charakterystyczną ciężkiej sepsy i wstrząsu septycznego jest ostre uszkodzenie nerek, które powoduje dalszy wzrost śmiertelności, gdy jest związane z dysfunkcją odległych narządów, taką jak niewydolność serca i niewydolność oddechowa4,5,6. Ogólna częstość występowania AKI u pacjentów OIT waha się od 20 do 50%7. Pomimo klucz....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Wszystkie procedury na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt Laboratoryjnych Powiatu Unterfranken w Niemczech i przeprowadzone zgodnie z Deklaracją Helsińską.

1. Chirurgiczne przygotowanie i instalacja inwazyjnego monitorowania i ciągłego leczenia

  1. Znieczulenie szczurów Sprague-Dawley za pomocą izofluranu dostarczanego przez precyzyjny waporyzator w stężeniu i szybkości przepływu zatwierdzonym przez lokalną instytucję, organ nadzoru nad badaniami na zwierzętach i/lub zespół weterynaryjny. Potwierdź odpowiednią głębokość znieczulenia, obserwując częstość oddechów, która staje się wolniejsza i głębsza, i spraw....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Zgodnie z wcześniejszą publikacją Schicka i wsp.8, przedstawiamy następujące wyniki.

Indukcja sepsy bez śmiertelności
W modelu CASP sepsę indukuje się poprzez ciągły wyciek bakterii znajdujących się w świetle okrężnicy wstępującej do jamy brzusznej, co prowadzi do kałowego zapalenia otrzewnej i bakteremii. Rozmiar wszczepionego cewnika reguluje ilość wydalanych kałowiec, a tym samym s.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Patofizjologia septycznego AKI nadal pozostaje nieznana w swojej złożoności. Badania kliniczne i próby kliniczne z udziałem pacjentów nie umożliwią uzyskania nowych informacji na temat zmian histopatologicznych, zaburzeń mikrokrążenia lub interakcji leków na poziomie komórkowym15. Wcześniej postulowano, że istnieje potrzeba ulepszonych i nowych modeli zwierzęcych do badania ostrego uszkodzenia nerek związanego z sepsą19. Dlatego ustaliliśmy nowy model zwierzęcy dla septyczn.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

M.A. Schick i N. Schlegel otrzymali dofinansowanie od Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) SCHL 1962/2-1 i SCHL 1962/4-1.

....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Szczury Sprague-DawleyJanvier Labs, Francja
  Isoflurane CPcp-pharma, Burgdorf, Niemcy
Cewnik polietylenowy PE 10; 30mA. Hartenstein, Würzburg, Niemcy0,58x0,96 mm
(375/D/20)Instech, Plymouth Meeting, PA, USA(375/D/20)
plastikowe pasy guzikoweInstech, Plymouth Meeting, PA, USALW105S
PerfusorB. Braun; Melsungen, NiemcyPerfusor fm
rozdz. 10B.Braun Melsungen AG, NiemcyCewnik ssący typ " Idealny"; rozdz. 10
szewSynetura; Stany ZjednoczoneSurgipro; Monofilament Polipropylen 4-0
szewEthicon; Szkocja Prolene; Cewnik polipropylenowy 5-0
14G-i.v.BD Insynte; BD Vialon; Madryt; 14GA i.v.
patyczki kosmetyczneNOBA Verbandmittel Danz GmbH u Co KG; Bardziej mokry; Niemcy
półmaska oddechowa dla gryzoniHugo Sachs Elektronik KG, NiemcyPółmaska oddechowa dla gryzoni, Typ: 7025
MidazolamRatiopharm, NiemcyMidazolam
ThermodilutioncatheterADInstruments, Spechbach, Niemcy
kwas p-aminohippurowySigma-Aldrich; St. Louis; USAsól sodowa kwasu p-aminohippurowego; A3759-25G
InulinaSigma-Aldrich; St. Louis; Stany ZjednoczoneInulina-FITC; F3272-1G
FormaldehydOtto Fischar GmbH & Kodeks Postępowania; Saarbrü cken, NiemcyFormaldehyd 3,5%
Cyklopentan,Merck; Darmstadt; NiemcyUvasol: Peeling na bazie alkoholu 2-metylobutanowego
Schü lke & Mayr GmbH, Norderstedt; Niemcykodan Tinktur forte; 45g 2-Propanol, 10g 1-Propanol na 100g
roztworu jodu powidonuB.Braun Melsungen AG, NiemcyBraunol, 7,5g Powidon Jod na 100g
Krętlik Cewnik ssący Hiszpania do cewnika

Bibliografia

  1. Angus, D. C., et al. Epidemiology of severe sepsis in the United States: analysis of incidence, outcome, and associated costs of care. Crit Care Med. 29, 1303-1310 (2001).
  2. Dellinger, R. P., et al.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Przeglądaj więcej artykułów

Monitorowanie hemodynamicznepobieranie gazów krwioceny histopatologicznekonfiguracja opieki intensywnejstandaryzowane ognisko sepsyanaliza funkcji nerekmetoda indukcji sepsyeksperymentalny model AKI

Ten artykuł został opublikowany

Film wkrótce dostępny