Rozwój gleby tradycyjnie postrzegano przez pryzmat procesów zachodzących w skalach czasowych od stuleci do tysiącleci 1. Monitorowanie gleb, które nie zostały przekształcone przez intensywne użytkowanie, takie jak rolnictwo, zazwyczaj nie było uważane za istotne z punktu widzenia kwestii politycznych czy zarządczych w skali lat lub dekad. Jednakże niedawne badania gleb wykazały, że istotne chemiczne właściwości gleby mogą ulec zmianie w czasie krótszym niż dekada, co często jest wynikiem szerokich zmian środowiskowych spowodowanych następstwami działalności człowieka, takich jak zanieczyszczenie powietrza i zmiany klimatu 2. W wschodniej Ameryce Północnej powtarzalne pobieranie próbek gleby dostarcza cennych informacji na temat skutków depozycji kwaśnej poprzez rejestrację zmian w glebach leśnych. W celu wsparcia i koordynacji tych działań, w 207 roku utworzono Northeastern Soil Monitoring Cooperative (NESMC) 3. Niniejsza praca jest częścią trwającego wysiłku NESMC mającego na celu dostarczenie informacji, które przyczynią się do wykorzystania powtarzalnego pobierania próbek gleb leśnych jako cennego narzędzia do monitorowania zmieniającego się środowiska.
Wielokrotne pobieranie prób stosowano w celu oceny zmian wynikających z manipulacji eksperymentalnych, jednak długoterminowy monitoring gleb leśnych w odpowiedzi na czynniki środowiskowe jest stosunkowo nową praktyką, słabo udokumentowaną w literaturze i dopiero niedawno szeroko przyjętą przez społeczność naukową. Dawny sceptycyzm wynikał w dużej mierze z przekonania, że tempo zmian w glebie jest zbyt powolne, aby można je było wykryć przy wysokiej zmienności przestrzennej (poziomej i pionowej) typowej dla gleb leśnych. Ponieważ pobieranie gleby jest procesem niszczącym, ponowne próbkowanie może być wykonywane jedynie w pobliżu pierwotnego miejsca poboru. Z tego względu zmienność przestrzenna w obrębie trójwymiarowej przestrzeni, z której pobierane są próbki, musi zostać odpowiednio określona ilościowo, aby wykryć rzeczywiste zmiany i uniknąć wyników będących artefaktem metody poboru. Ponadto proces pobierania próbek gleby i analiz chemicznych generuje potencjalne źródła niestabilności pomiarowej, które mogą maskować zmiany lub zniekształcać wyniki 4. Niestabilności pomiarowej nie można całkowicie wyeliminować, ale można ją w wystarczającym stopniu kontrolować za pomocą odpowiednich protokołów, aby uzyskać wyniki o minimalnej niepewności.
Projektowanie badania monitoringu gleby
Monitorowanie gleby wymaga wielokrotnego pobierania próbek gleby w odstępach czasowych określonych przez badacza. Krótsze odstępy czasu zmniejszają czas potrzebny do statystycznego wykrycia zmian, jednak dłuższe interwały stwarzają większą możliwość wystąpienia zmian w glebie 4. Aby zrównoważyć te dwa czynniki, zaleca się 5-letni odstęp między ponownymi próbkowaniami, jednak jeśli monitorowanie jest przeprowadzane w celu oceny konkretnego czynnika sprawczego, interwał powinien zostać ustalony na podstawie oczekiwanej szybkości zmian tego czynnika 2. Skuteczne monitorowanie gleb leśnych wymaga również zdefiniowania jednostki badawczej w obrębie obszaru terenu zalesionego wybranego do monitorowania gleby. Powtarzalne próbkowanie w wielu lokalizacjach w obrębie jednostki badawczej służy do określenia, czy gleba w tej konkretnej jednostce uległa zmianie w czasie. Można wybrać dodatkowe jednostki badawcze, lecz każdą z nich analizuje się statystycznie osobno, aby ocenić, czy wystąpiły zmiany w glebie. Wyniki statystyczne z wielu jednostek badawczych mogą być następnie grupowane w celu przeprowadzenia analizy regionalnej, zgodnie z metodą opisaną przez Lawrence et al. 5. Typ i rozmiar jednostki badawczej będą zależeć od stawianych pytań badawczych oraz następujących rozważań dotyczących projektu badania. Pobieranie próbek gleby w obrębie jednostki badawczej może odbywać się w lokalizacjach losowych lub w układzie siatki w celu uzyskania próbek powtórzonych, pod warunkiem, że próbkowanie zostanie przeprowadzone w wystarczającej liczbie lokalizacji, aby bezstronnie scharakteryzować zmienność przestrzenną jednostki badawczej 4. Jednostka badawcza zlokalizowana w obrębie jednego typu krajobrazu pod względem cech takich jak nachylenie, pozycja na stoku, ekspozycja, roślinność, materiał rodzimy i drenaż będzie wykazywać mniejszą zmienność przestrzenną niż jednostka obejmująca więcej niż jeden typ krajobrazu. Należy unikać błędów systematycznych podczas każdego pobierania próbek, aby wartości uzyskane z wykopów w dowolnej serii pobrań mogły być statystycznie porównywane z wartościami uzyskanymi w seriach wcześniejszych i późniejszych. Wraz ze wzrostem rozmiaru jednostki badawczej, zmienność przestrzenna w jej obrębie może również wzrosnąć ze względu na czynniki takie jak roślinność lub zmiany nachylenia terenu. Jeśli potencjalne przyczyny zmienności, takie jak wspomniane, zostaną objęte jednostką badawczą, konieczne będzie wyznaczenie dodatkowych lokalizacji poboru próbek w celu scharakteryzowania możliwej zmienności gleb. W związku z tym rozmiar jednostki badawczej musi zostać ustalony przez badacza na podstawie zmienności rozważanego obszaru oraz zasobów projektu dostępnych na potrzeby pobierania i ponownego pobierania próbek.
Kluczowym kryterium przy wyborze jednostki badawczej jest potencjał wystąpienia niepożądanych zakłóceń w obrębie terenu w przyszłości. Należy uzyskać pewność, że warunki na danym obszarze pozostaną odpowiednie dla określonych celów monitoringu przez kilka dekad lub dłużej. Przykładowo, jednostka badawcza, której jedynym celem jest monitorowanie skutków zmian klimatycznych, powinna zostać zlokalizowana na obszarze, na którym w dającej się przewidzieć przyszłości nie będą prowadzone prace leśne.
Opisana tutaj metodologia obejmuje pobieranie prób z pojedynczej jednostki badawczej. Jednostki badawcze mogą być powielone w obrębie jednego typu krajobrazu lub mogą zostać dodane w celu scharakteryzowania dodatkowych typów krajobrazu, w zależności od celów i zakresu badania, w tym od tego, czy badanie obejmuje manipulację eksperymentalną. Przykład projektu monitoringu gleby przedstawiono na Rysunku 1. W obszarze zainteresowania (zachodni region Adirondack) zlokalizowano sześć jednostek badawczych. W tym przypadku każda jednostka badawcza została podzielona na siatkę 25 równych działek. Każda działka musi być wystarczająco duża, aby zapewnić przestrzeń odpowiednią do wykopania dołu. W zalesionym terenie wyżynnym północno-wschodnich Stanów Zjednoczonych i wschodniej Kanady odpowiednią przestrzeń do wykopania dołu o głębokości 1,2 m można zazwyczaj znaleźć w obszarze o wymiarach 10 m na 10 m. Zatem w naszym przykładzie całkowita powierzchnia jednostki badawczej wynosi 1,0 ha. Przy każdym pobieraniu próbek z jednostki badawczej losowo wybierana jest określona liczba działek. Jeśli pięć powtórzonych działek zostanie wybranych losowo do poboru prób w odstępach pięcioletnich, jednostka badawcza może być monitorowana przez 25 lat. Powierzchnia wymagana do wykopania i pobrania próbek z jednego dołu będzie się różnić w zależności od krajobrazu i musi zostać uwzględniona w projekcie pobierania próbek.
Stopień powtórzeń w obrębie jednostki badawczej oraz częstotliwość ponownego pobierania próbek będą się różnić w zależności od charakterystyki jednostki badawczej, stawianych pytań oraz rodzaju przewidywanych zaburzeń. Na podstawie badań dotyczących ponownego pobierania próbek gleby, w których wykryto zmiany przy użyciu pomiarów powszechnie stosowanych w glebach leśnych, zaleca się 5-letni odstęp między pobraniami próbek oraz minimum 5 powtórzonych lokalizacji pobierania próbek w obrębie każdej jednostki badawczej. Zmniejszenie częstotliwości ponownego pobierania próbek przy jednoczesnym zwiększeniu liczby powtórzeń wzmocni zdolność do wykrywania zmian.

Rysunek 1: Przykład projektu badania. Uogólniony schemat badania ponownego pobierania prób. Należy zwrócić uwagę, że jednostka badawcza została zlokalizowana w taki sposób, aby uniknąć obszarów nadrzecznych dwóch koryt strumieni. Proszę kliknąć tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.
Pobieranie próbek gleby — informacje wstępne
Pobieranie próbek gleby należy przeprowadzić w sezonie, w którym gleby mają tendencję do przesychania, co najczęściej zdarza się w późnej fazie okresu wegetacyjnego. Ponowne pobranie próbek w tym czasie zapewnia również spójność w odniesieniu do fenologii roślin, która może wpływać na chemiczne warunki glebowe. Należy unikać pobierania próbek podczas lub bezpośrednio po intensywnych opadach deszczu lub w przypadku nadmiernego zawilgocenia gleb. Przynajmniej jedna lokalizacja w obrębie jednostki badawczej powinna zostać opisana i udokumentowana zgodnie z publikacją USDA Natural Resource Conservation Service (NRCS) Field Book for Describing Soils 6 lub innymi odpowiednimi protokołami, jeśli stosowany jest system klasyfikacji gleb używany poza USA. Przedstawiony tutaj protokół terenowy opiera się na amerykańskim systemie klasyfikacji i wymaga posiadania kopii NRCS Field Book for Describing Soils w terenie. Osoba pobierająca próbki powinna posiadać odpowiednie przeszkolenie i doświadczenie w opisywaniu oraz pobieraniu próbek badanego typu gleby przed wdrożeniem protokołów monitorowania gleby.
Pobieranie gleby można przeprowadzić na różne sposoby, jednak zastosowanie powtarzalnej techniki jest kluczowe dla monitorowania zmian w glebie. Metodyka terenowa powinna zostać zapisana w standardowej procedurze operacyjnej (SOP). Należy unikać zmian w procedurach pobierania próbek pomiędzy poszczególnymi sesjami, a w przypadku, gdy nie jest to możliwe, wszystkie szczegóły muszą zostać udokumentowane.
Należy również przeprowadzić testy w celu oceny potencjalnego błędu wynikającego ze zmian proceduralnych. Pobieranie próbek może odbywać się według horyzontów, gdy (1) granice można wyraźnie zidentyfikować w terenie i (2) horyzonty są wystarczająco grube, aby usunąć glebę bez zanieczyszczenia horyzontami powyżej lub poniżej. W przypadku niespełnienia tych kryteriów można zastosować pobieranie próbek w interwałach głębokości. Podczas każdego pobierania próbek należy zachować szczególną ostrożność, aby uniknąć zmieszania gleby z powierzchniowego, bogatego w materię organiczną horyzontu (zazwyczaj O lub A) z najwyższym horyzontem mineralnym (zazwyczaj B lub E). W niektórych glebach zmiany tekstury i koloru są łatwo widoczne na granicy organiczno-mineralnej, podczas gdy w innych zmiany koloru mogą być minimalne, dlatego w celu zidentyfikowania położenia tej granicy należy polegać na zmianach teksturalnych odzwierciedlających różnice w stężeniu węgla organicznego (C). Określenie tej granicy na podstawie zmian teksturalnych może być trudne, nawet dla doświadczonych gleboznawców. Weryfikację granicy organiczno-mineralnej można przeprowadzić za pomocą analizy laboratoryjnej stężenia węgla (horyzont organiczny definiuje stężenie węgla organicznego >20% 7). W niektórych glebach horyzont O może mieć grubość mniej niż 1 cm i może być zbyt cienki do pobrania próbek. Pobieranie próbek zarówno według horyzontów, jak i głębokości w obrębie tego samego profilu glebowego może być skuteczne w radzeniu sobie z różnicami w wyraźności grubości horyzontów w tym profilu. Horyzonty lub głębokości, z których pobierane będą próbki, będą również zależały od celów programu monitoringu. Zmiany glebowe w warstwach bliższych powierzchni były identyfikowane częściej niż w warstwach głębszych, jednak uwzględnienie głębszych horyzontów lub interwałów głębokości może dostarczyć informacji pomocnych w zmniejszeniu niepewności wyników. Na przykład podczas wstępnego pobierania próbek gleba zlodowacona, silnie wymywana przez depozycję kwasową, wykazała minimalne nasycenie zasadami w górnym horyzoncie B, które następnie rosło wraz z głębokością. W powtórnym pobieraniu próbek ten wzorzec powinien się powtórzyć, nawet jeśli stężenia w poszczególnych warstwach ulegną zmianie. Jeśli w powtórnym pobieraniu próbek zostanie zaobserwowany inny wzorzec, istnieje duże prawdopodobieństwo, że oba pobrania nie zostały przeprowadzone w porównywalnej glebie. Idealnie próbka powinna być pobierana z całej grubości horyzontu. Jednak w przypadku horyzontów o nadmiernej grubości pionowa integracja poboru próbek z całej grubości może być trudna. W takiej sytuacji można pobrać próbki o równej objętości w równych odstępach od dołu do góry horyzontu. Jeśli pobieranie próbek nie odbywa się z całej grubości horyzontu, należy odnotować interwał głębokości poboru w obrębie tego horyzontu.
Przetwarzanie i analiza próbek gleby — Informacje wstępne
Proces pobierania próbki gleby z profilu modyfikuje tę próbkę poprzez przecinanie korzeni oraz powodowanie zmian w takich czynnikach jak temperatura, wilgotność, zawartość tlenu i innych gazów. W związku z tym niektóre pomiary muszą być wykonane szybko, bez możliwości utrwalenia próbki, co utrudnia ich zastosowanie w długoterminowych programach monitoringu. Jednak w przypadku większości powszechnych pomiarów fizycznych i chemicznych, takich jak tekstura, gęstość objętościowa, całkowita zawartość C i azotu (N) oraz stężenia metali całkowitych i wymiennych, suszenie próbki na powietrzu po pobraniu stanowi stosunkowo spójną metodę stabilizacji składu chemicznego przed analizą. W prawie wszystkich przypadkach pomiary gleby są definiowane operacyjnie, odzwierciedlając zarówno warunki gleby in situ, jak i skutki zastosowanego pobierania, przygotowania i analizy próbki. Artefakty są minimalizowane poprzez wybór najlepszych metod dostosowanych do celów programu oraz zachowanie spójności metodologii w czasie. Po wysuszeniu dalsze zmiany w próbce gleby są ograniczone, a po usunięciu większości wilgoci próbkę można przesiać, aby rozbić grudki i usunąć fragmenty kamieni i korzeni. Kroki te umożliwiają homogenizację próbki przed pobraniem podpróbek do analizy chemicznej. Podobnie jak w przypadku konieczności zachowania spójności metod pobierania i przetwarzania próbek w czasie, należy kontrolować potencjalne błędy systematyczne wynikające z analizy chemicznej. Niezbędne jest dokumentowanie standardowej procedury operacyjnej (SOP) dla analizy chemicznej stosowanej przy każdym pobieraniu i analizowaniu próbek, a idealnie ta sama SOP powinna być stosowana dla wszystkich serii pobrań. Skuteczność analizy chemicznej musi zostać zweryfikowana w ramach programu zapewnienia jakości, który obejmuje wykorzystanie wewnętrznych próbek referencyjnych i próbek wymiany międzylaboratoryjnej, a także standardowych wewnętrznych procedur kontroli jakości. Informacje na temat porównywalności powszechnie stosowanych metod analizy chemicznej znajdują się w pracy Ross et al. 8.
Gdy ponowne pobieranie próbek odbywa się w odstępach od pięciu do dziesięciu lat, prawdopodobne są zmiany w jednym lub kilku aspektach analizy chemicznej, takich jak SOP (standardowe procedury operacyjne), instrumentacja laboratoryjna, personel laboratorium lub samo laboratorium wykonujące analizę. Czynniki te stwarzają możliwość wystąpienia błędu analitycznego między kolekcjami. Aby wyeliminować błąd analityczny, niewykorzystane części próbek z każdej kolekcji powinny zostać zarchiwizowane do przyszłego użytku. Próbki z poprzedniej kolekcji można analizować wraz z nowo pobranymi próbkami, a porównując dane, można odnieść się do kwestii potencjalnego błędu analitycznego. Podejście to opiera się na założeniu, że w zarchiwizowanej próbce nie zachodzą zmiany chemiczne podczas okresu przechowywania. W różnych badaniach trwających do 30 lat wykazano stabilność ubytku po spaleniu oraz stężeń zasad wymiennych, wymiennego Al, całkowitego C i całkowitego N 9-1. Jednak wykazano, że przechowywanie gleb wysuszonych powietrzem obniża pH gleby 12 oraz zawartość tlenków manganu 13. Masa gleby pobrana z każdego horyzontu lub przedziału głębokości powinna być wystarczająca do przeprowadzenia jednego pełnego zestawu zaplanowanych analiz chemicznych oraz dodatkowa masa na co najmniej cztery zestawy analiz w przyszłości. Do archiwizowania próbek gleby stosowano różne metody. Opisana tutaj metoda opiera się na procedurach przechowywania stosowanych przez Muzeum Stanu Nowy Jork (New York State Museum).