Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Analiza 3D tkanki mięśnia sercowego całego serca

8.5K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/54974

⸱

12 kwietnia 2017

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Cardiology, Division Heart and Lungs, University Medical Center Utrecht, 2MIRA Institute, University Twente

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

Ten protokół opisuje nowatorską metodę 3D porównywania tkanki mięśnia sercowego całego serca z MRI. Ma to na celu dokładną ocenę iniekcji domięśniowych w strefie granicznej zawału przewlekłego świńskiego modelu zawału mięśnia sercowego.

Streszczenie

Terapie regeneracyjne serca mają na celu ochronę i naprawę uszkodzonego serca u pacjentów z chorobą niedokrwienną serca. Poprzez wstrzyknięcie komórek macierzystych lub innych środków biologicznych, które nasilają angio- lub waskulogenezę do strefy granicznej zawału (IBZ), poprawia się perfuzja tkanek, a mięsień sercowy może być chroniony przed dalszym uszkodzeniem. Aby uzyskać maksymalny efekt terapeutyczny, przypuszcza się, że substancja regeneracyjna najlepiej jest dostarczana do IBZ. Wymaga to dokładnych iniekcji i doprowadziło do opracowania nowych technik iniekcji. Aby zwalidować te nowe techniki, opracowaliśmy protokół walidacji oparty na analizie tkanki mięśnia sercowego. Protokół ten obejmuje przetwarzanie tkanki mięśnia sercowego w całym sercu, które umożliwia szczegółową dwuwymiarową (2D) i trójwymiarową (3D) analizę anatomii serca oraz iniekcje domięśniowe mięśnia sercowego. U świni zawał mięśnia sercowego powstał w wyniku 90-minutowego zamknięcia lewej przedniej zstępującej tętnicy wieńcowej. Cztery tygodnie później mieszaninę hydrożelu z superparamagnetycznymi cząstkami tlenku żelaza (SPIO) i kulkami fluorescencyjnymi wstrzyknięto do IBZ przy użyciu minimalnie inwazyjnego dostępu wsierdziowego. 1 godzinę po zabiegu iniekcji świnia została poddana eutanazji, a serce wycięto i zatopiono w agarozie (agarze ). Po zestaleniu się agaru wykonano rezonans magnetyczny (MRI), cięcie serca i obrazowanie fluorescencyjne. Po przetworzeniu obrazu przeprowadzono analizę 3D w celu oceny dokładności celowania IBZ. Protokół ten zapewnia ustrukturyzowaną i powtarzalną metodę oceny dokładności celowania wstrzyknięć domięśniowych do IBZ. Protokół może być z łatwością zastosowany, gdy pożądane jest przetwarzanie tkanki bliznowatej i/lub walidacja dokładności wstrzyknięcia całego serca.

Wprowadzenie

Choroba niedokrwienna serca była główną przyczyną zgonów na świecie przez ostatnie dziesięciolecia1. Ostre leczenie po zawale mięśnia sercowego ma na celu przywrócenie przepływu krwi do mięśnia sercowego poprzez przezskórną interwencję wieńcową lub pomostowanie aortalno-wieńcowe. W ciężkich zawałach duży obszar mięśnia sercowego jest zbliznowaciały, a przypadki te często prowadzą do niewydolności niedokrwiennej serca (HF)2. Obecne możliwości leczenia niewydolności serca koncentrują się na profilaktyce i zachowaniu funkcji serca u pacjentów z niewydolnością serca, ale nie na regeneracji.

W ostatnim dziesięcioleciu terapie regeneracyjne serca były badane jako opcja leczenia HF3. Terapia ta ma na celu dostarczenie substancji biologicznych, takich jak komórki macierzyste lub czynniki wzrostu, bezpośrednio do uszkodzonego mięśnia sercowego w celu wywołania rewaskularyzacji, ochrony kardiomiocytów, różnicowania i wzrostu4. Aby uzyskać optymalny efekt terapeutyczny, przypuszcza się, że substancja biologiczna musi zostać wstrzyknięta do strefy granicznej zawału (IBZ), aby ułatwić dobrą perfuzję tkanek dla przeżycia biologicznej i optymalnego efektu dla strefy docelowej5,6. Opracowano wiele technik identyfikacji i wizualizacji IBZ w celu kierowania iniekcjami domięśniowymi mięśnia sercowego7,8,9,10,11. Oprócz identyfikacji i wizualizacji IBZ, dostawa opiera się również na zastosowanych biomateriałach i cewnikach iniekcyjnych. Aby zweryfikować dokładność wstrzykiwania technik podawania, wymagana jest dokładna i odtwarzalna metoda oznaczania ilościowego.

Opracowaliśmy protokół przetwarzania tkanek mięśnia sercowego całego serca, który oferuje obrazowanie dwuwymiarowe (2D) i trójwymiarowe (3D), które może być wykorzystane do celów badań jakościowych i ilościowych. Protokół obejmuje proces osadzania i cyfrowej analizy obrazu. W niniejszej pracy przedstawiono protokół oceny dokładności celowania iniekcji domięśniowych w IBZ w dużym świńskim modelu przewlekłego zawału mięśnia sercowego.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Eksperyment in vivo został przeprowadzony zgodnie z wytycznymi Guide for the Care and Use of Laboratory Animals opracowanymi przez Institute of Laboratory Animal Research. Eksperyment został zatwierdzony przez lokalną Komisję ds. Doświadczeń na Zwierzętach.

1. Przygotowanie roztworu do iniekcji i zatapiania

  1. Przygotowanie żelu do iniekcji.
    1. Przygotować 1 mL żelu ureido-pirymidynowego (UPy) zgodnie z wcześniej opisanymi protokołami12,13.
    2. Dodać do roztworu superparamagnetyczne cząsteczki tlenku żelaza (SPIOs), aby uzyskać stężenie 15 µg/mL, a następnie mieszać mieszaninę przez 5 min w celu zapewnienia jednorodnego rozkładu.
    3. Dodać do roztworu fluorescencyjne mikrokulki, aby uzyskać stężenie 10 000 beads/mL, a następnie mieszać mieszaninę przez 5 min w celu zapewnienia jednorodnego rozkładu.
    4. Przechowywać otrzymaną mieszaninę w temperaturze pokojowej w ciemnym miejscu. Przed procedurą iniekcji roztwór ogrzać i wymieszać za pomocą vortexa lub mieszadła.
  2. Przygotowanie roztworu do zatapiania.
    1. Do wody z kranu w temperaturze pokojowej dodać agarozę (agar) do uzyskania stężenia 4 wt%.
    2. Powoli podgrzewać roztwór do temperatury wrzenia w kuchence mikrofalowej, często mieszając podczas grzania. Po osiągnięciu temperatury wrzenia przechowywać roztwór agaru w temperaturze powyżej 70 °C przez 2 h, aby umożliwić wydostanie się pęcherzyków powietrza na powierzchnię.
    3. Pozostawić agar do ostygnięcia w temperaturze pokojowej do temperatury między 50 a 60 °C do momentu zatapiania.

2. Procedura iniekcji

  1. Przeprowadzić premedykację (leki przeciwarytmiczne, terapię przeciwpłytkową i leki przeciwbólowe), znieczulenie, założenie dostępu żylnego oraz intubację, zgodnie z wcześniejszym opisem14.
  2. Wykonać iniekcje za pomocą cewnika do iniekcji wewnątrzmięśniowych (Tabela materiałów). Przy każdej iniekcji 0,2 mL mieszaniny wstrzykuje się w formie jednego bolusa ze stałą prędkością około 0,3 mL/min przy użyciu urządzenia do iniekcji. Iniekcje należy rozmieścić w różnych punktach wzdłuż IBZ12.
  3. Podać 0,2 mL/kg (1,0 mmol/mL) środka kontrastowego na bazie gadolinu na 15 min przed uśmierceniem zwierzęcia.
  4. Podać dożylnie 20 mL 7,5% chlorku potasu w celu uśmiercenia zwierzęcia.
  5. Uzyskać dostęp do śródpiersia zgodnie z krokami protokołu 8.2 - 8.3, opisanymi przez Koudstaal et al.14. Przeciąć żyłę główną dolną 5 cm od prawego przedsionka i usunąć wypływającą krew za pomocą ssaka. Wyciąć serce i wypłukać je 0,9% solą fizjologiczną w temperaturze pokojowej.

3. Procedura zatapiania

  1. Przygotowanie serca.
    1. Usunąć osierdzie z serca, pozostawiając przedsionki i komory nienaruszone. Przeciąć aortę wstępującą w odległości ± 1 cm powyżej zastawki aortalnej za pomocą nożyczek Klinkenberga. Przeciąć żyłę główną dolną w odległości ± 1 cm od przedsionka; analogicznie postąpić z żyłami płucnymi.
    2. Przyszyć wierzchołek serca do dna plastikowego pojemnika do zatapiania (17 x 15 x 15 cm, szer. x gł. x wys.), używając szwu 2-0, aby zapobiec wypływaniu serca podczas zatapiania (Rysunek 1A).
    3. Przyszyć pozostałą część aorty do krawędzi pojemnika za pomocą szwu 2-0, upewniając się, że serce jest wycentrowane i nie dotyka ścianek pojemnika (Rysunek 1B).

Analiza ułożenia serca; A: Schemat 3D serca w komorze. B: Serce w układzie eksperymentalnym.
Rysunek 1: Schematyczny przegląd i zdjęcie pojemnika do zatapiania. (A) Schematyczny przegląd procesu zatapiania. Serce (kolor czerwony) jest mocowane w pojemniku (kolor niebieski) za pomocą szwów. Po wypełnieniu serca roztworem agaru, wypełniana jest przestrzeń wokół serca. Na koniec w pojemniku, obok serca, ale bez dotykania go, umieszcza się dwie sztywne plastikowe rurki (kolor żółty), które służą jako punkt odniesienia podczas rejestracji obrazu. (B) Zdjęcie serca zamocowanego w pojemniku do zatapiania. Szwy są przymocowane do krawędzi pojemnika za pomocą kleszczyków chirurgicznych. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.

  1. Zatop serce w geometrii przypominającej koniec rozkurczu.
    UWAGA: Konieczne jest zapobieganie powstawaniu pęcherzyków powietrza. Jeśli w roztworze agaru występują duże pęcherzyki powietrza, należy utrzymać agar w temperaturze 40 °C, aby pęcherzyki wypłynęły na powierzchnię.
    1. Zaklemuj żyłę główną dolną za pomocą kleszczyków typu mosquito. Powoli wstrzyknij ciekły agar za pomocą strzykawki 50-mL do prawego przedsionka przez żyłę główną górną, aż prawy przedsionek i komora zostaną całkowicie wypełnione.
    2. Zaklemuj żyły płucne za pomocą kleszczyków typu mosquito. Delikatnie wprowadź strzykawkę 50-mL wypełnioną agarem w kierunku wstecznym przez zastawki aortalne. Powoli wstrzykuj roztwór do lewej komory (LV), aż LV i lewy przedsionek zostaną całkowicie wypełnione. Po wypełnieniu LV zaklemuj aortę, aby zatrzymać agar w LV.
    3. Wlej pozostały agar do pojemnika, aż serce zostanie w pełni zakryte. Umieść w pojemniku do zatapiania dwie sztywne plastikowe rurki, które będą służyć jako struktury referencyjne do późniejszej rejestracji obrazów (Rycina 1A). Upewnij się, że rurki nie dotykają ścianek pojemnika ani serca.
    4. Pozostaw agar do stężenia w temperaturze 2 - 7 °C.

4. Pozyskiwanie obrazów

  1. Wykonać poprzeczne skany MRI ex vivo serca osadzonego w pojemniku.
    1. Umieścić pojemnik z osadzonym sercem w cewce głowowej (Tabela materiałów).
    2. Ustawić kąt nachylenia warstw równolegle do dna pojemnika. Stosować tę samą orientację i kąt nachylenia w każdej sekwencji MRI ex vivo.
    3. W celu wizualizacji mięśnia sercowego wykonać sekwencję z odwróconym odzyskiwaniem z tłumieniem płynu (FLAIR) z następującymi parametrami: czas repetycji [TR]/czas echa [TE] = 10 s/140 ms, kąt odchylenia = 90°, rozmiar piksela = 0.5 x 0.5 mm, pole widzenia [FOV] = 169 x 169 mm, macierz 320 x 320 i grubość warstwy 3 mm.
    4. W celu wizualizacji zawału mięśnia sercowego wykonać sekwencję z późnym wzmocnieniem gadolinem (LGE) z następującymi parametrami: [TR]/[TE] = 5.53 ms/1.69 ms, kąt odchylenia = 25°, rozmiar piksela = 1.0 x 1.0 mm, [FOV] = 169 x 169 mm, macierz 176 x 176 i grubość warstwy 3 mm.
    5. W celu wizualizacji SPIO wykonać sekwencję gradientową T2*-zależną z następującymi parametrami: [TR]/[TE] = 88.7 ms/15 równomiernie rozłożonych TEs w zakresie 1.9 - 24.6 ms, kąt odchylenia = 15°, rozmiar piksela = 0.5 x 0.5 mm, [FOV] = 169 x 169 mm, macierz 320 x 320 i grubość warstwy 3 mm.
  2. Obróbka tkanek
    1. Odwrócić pojemnik do góry dnem i doprowadzić do przedostania się powietrza między agarem a ściankami pojemnika, aby usunąć z niego stałą żel agaru wraz z sercem. Wyjąć plastikowe pręty z agaru.
    2. Pokroić blok agaru zawierający serce na plastry o grubości 5 mm, od wierzchołka do podstawy serca, używając krojaka do mięsa. Zachować ten sam kąt nachylenia cięcia, co w uzyskanych obrazach MR, krojąc równolegle do dna bloku agaru.
    3. Barwić plastry agaru (wraz z sercem) przez 15 min w 1% roztworze chlorku 2,3,5-trifenylotetrazoliu (TTC) rozpuszczonego w 0,9% soli fizjologicznej w temperaturze 37 °C, a następnie sfotografować plastry z obu stron z widoku prostopadłego (Rycina 2A). Następnie ostrożnie wypłukać plastry w 0,9% soli fizjologicznej.
      UWAGA: W niniejszym badaniu zastosowano zestaw dSLR z odpowiednim obiektywem, statyw i jednorodne oświetlenie. Jednakże fotografie służyły jedynie jako kontrola do oceny obszaru blizny, więc można było zastosować inny zestaw.
  3. Obrazowanie fluorescencyjne
    UWAGA: W zależności od długości fal wzbudzenia i emisji fluorescencyjnych mikrokulek, należy dobrać odpowiedni blok filtrów i lasery wzbudzające (np. czerwone mikrokulki użyte w tym badaniu mają długości fal wzbudzenia i emisji odpowiednio 580 nm i 605 nm; w związku z tym wybrany laser wzbudzający i filtry przepustowe ustawiono odpowiednio na 532 nm, 580/30 nm i 610/30 nm).
    1. Wybrać tryb obrazowania fluorescencyjnego w skanerze wielotrybowym. Ustawić lampę fotopowielającą na 430 V lub wartość równoważną, a rozmiar piksela na 100 x 100 µm. Wybrać laser wzbudzający (532 nm) najbliższy długości fali wzbudzenia fluorescencyjnych mikrokulek.
    2. Dla pierwszego bloku filtrów wybrać filtr przepustowy (580/30 nm), który pokrywa się z długością fali emisji wstrzykniętych kulek fluorescencyjnych (kanał 1). Dla drugiego bloku filtrów wybrać filtr przepustowy (610/30) poza zakresem długości fali emisji (kanał 2).
      UWAGA: Drugi blok filtrów służy jako kontrola negatywna i do usuwania autofluorescencji przy jednoczesnym zachowaniu miejsc wstrzyknięcia.
    3. Zeskanować obie strony plastrów agaru w trybie fluorescencyjnym wielotrybowego skanera laserowego, korzystając z dwóch kanałów. Upewnić się, że każdy plaster został zeskanowany w całości, wliczając w to otwory referencyjne.

5. Postprocessing

UWAGA: Pierwszym krokiem w postprocesowaniu obrazów jest ręczna segmentacja mięśnia sercowego przy użyciu opracowanych wewnętrznie skryptów w celu wyznaczenia granic endokardium i epikardium, a także miejsc wstrzyknięcia. Procedura ta jest identyczna zarówno dla obrazowania MRI, jak i skanów fluorescencyjnych.

  1. Wykonaj segmentację mięśnia sercowego w skanach MRI.
    1. Wysegmentuj granice wsierdzia i osierdzia LV na obrazach z sekwencji MRI FLAIR.
    2. Skopiuj segmentację LV z kroku 5.1.1 do zbioru danych LGE-MRI i wysegmentuj bliznę w sekwencji MRI LGE.
    3. Skopiuj segmentację mięśnia sercowego z kroku 5.1.1 do zbioru danych T2*-weighted i wysegmentuj złogi SPIO w mięśniu sercowym LV.
  2. Przetwórz obrazy fluorescencyjne i wykonaj segmentację.
    1. Wczytaj pliki uzyskane ze skanera w trybie zmiennym i utwórz oddzielny obraz dla każdego przekroju serca.
    2. Obróć lustrzanie przekroje, które zostały zeskanowane w orientacji od podstawy do wierzchołka, a następnie posortuj obrazy fluorescencyjne w stos dla obu kanałów w orientacji od wierzchołka do podstawy.
    3. Wysegmentuj granice wsierdzia i osierdzia LV na obrazach fluorescencyjnych.
    4. Wykonaj ręczną segmentację blizny na obrazach fluorescencyjnych, wykorzystując skany LGE-MRI oraz fotografie do potwierdzenia morfologii blizny.
    5. Odejmij stos obrazów z kanału 2 od stosu obrazów z kanału 1, aby wyeliminować autofluorescencję. Ręcznie wysegmentuj złogi fluorescencyjnych mikrokulek, wykorzystując obrazy T2* do potwierdzenia.
  3. Aby stworzyć anatomicznie poprawną geometrię 3D, wykonaj sztywną rejestrację przekrojów w stosie obrazów w oparciu o struktury referencyjne (otwory utworzone przez sztywne rurki). Oblicz i zapisz zastosowane przesunięcie oraz obrót każdego obrazu.
  4. Zastosuj zapisane transformacje do stosów obrazów i segmentacji. Przeprowadź liniową interpolację segmentacji obu stron przekrojów, aby zrekonstruować oryginalną grubość przekroju i stworzyć model 3D danych.

6. Analiza

  1. Wykonaj pomiary 2D i/lub 3D odległości między centrami miejsc wstrzyknięcia a IBZ w celu oceny dokładności wstrzyknięcia. Odległość należy mierzyć wzdłuż granicy wschołkowej segmentacji LV. Na rysunku 2C i 2F przykład pomiarów 2D i 3D został zaznaczony czerwoną linią.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Zatapianie tkanki

Poprzez proces zatapiania ustalono geometrię odpowiadającą końcowej rozkurczowej fazie cyklu serca. Agar skutecznie przylegał do tkanki serca, co umożliwiło pocięcie tkanki pod pożądanym kątem przy zachowaniu jednakowej grubości plastrów (Rycina 2A oraz 2C).

Ocena blizn oraz miejsca wstrzyknięcia

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Przetwarzanie tkanek mięśnia sercowego 3D całego serca zgodnie z tym protokołem zapewnia ustrukturyzowaną metodę, która umożliwia analizę 3D zawału, IBZ i wykonanych iniekcji w odniesieniu do anatomii serca. Objętość wypełnienia serca zależy od pożądanej analizy. W tym badaniu, aby ocenić dokładność iniekcji, staraliśmy się wypełnić serce tak, aby jak najbardziej przypominało geometrię końcoworozkurczową. Aby to wyegzekwować, wierzchołek lewej komory jest przymocowany do dna pojemnika, a LV jest wypełniany agarem, podcza...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Autorzy chcieliby podziękować Marlijn Jansen, Joyce Visser i Martijnowi van Nieuwburgowi za pomoc w eksperymentach na zwierzętach. Bardzo dziękujemy Martijnowi Froelingowi i Anke Wassink za ich pomoc w obrazowaniu MRI.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
0,9% sól fizjologicznaBraun
AgarozaRoche DiagnosticsWielofunkcyjny agar klasy naukowej
Skaner fluorescencji biomolekularnej Typhoon 9410 GE Healthcare
PojemnikPlastik, wymiary 17 x 14,5 x 14 cm
FluoSpheres Mikrosfery polistyrenoweInvitrogenF8834czerwony, 10 i mikro;
m GadoliniumGadovist1.0 mmol/mL
dS 32-kanałowa cewka głowicyPhilipsLub podobny
MatlabMathworksAby zapewnić kompatybilność 2015a lub nowszy
Krajalnica do mięsaBerkel
MyostarBiosense Webster
Super paramagnetyczne cząstki tlenku żelazaSinerem
Chlorek trifenylotetrazoluMerck
UPy-PEG10k
Vicryl 2-0Ethicon
do zatapiania Cewnik iniekcyjne

Bibliografia

  1. Nowbar, A. N., Howard, J. P., Ja Finegold,, Asaria, P., Francis, D. P. 2014 global geographic analysis of mortality from ischaemic heart disease by country, age and income: statistics from World Health Organisation and United Nations. Int J Cardiol. 174 (2), 293-298 (2014).
  2. Kannel, W. B., Belanger, A. J. Epidemiology of heart failure. Am Heart J. 121 (3), 951-957 (1991).
  3. Ibáñez, B., Heusch, G., Ovize, M., Van De Werf, F. Evolving therapies for myocardial ischemia/reperfusion injury. J Am Coll Cardiol. 65 (14), 1454-1471 (2015).
  4. Bartunek, J., Vanderheyden, M., Hill, J., Terzic, A. Cells as biologics for cardiac repair in ischaemic heart failure. Heart. 96 (10), 792-800 (2010).
  5. Orlic, D., Kajstura, J., et al. Bone marrow cells regenerate infarcted myocardium. Nature. 410 (6829), 701-705 (2001).
  6. Nguyen, P. K., Lan, F., Wang, Y., Wu, J. C. Imaging: Guiding the Clinical Translation of Cardiac Stem Cell Therapy. Circ Res. 109 (8), 962-979 (2011).
  7. Psaltis, P. J., Worthley, S. G. Endoventricular electromechanical mapping-the diagnostic and therapeutic utility of the NOGA XP Cardiac Navigation System. J Cardiovasc Transl Res. 2 (1), 48-62 (2009).
  8. Tomkowiak, M. T., Klein, A. J., et al. Targeted transendocardial therapeutic delivery guided by MRI-x-ray image fusion. Catheter Cardiovasc Interv. 78 (3), 468-478 (2011).
  9. Dauwe, D. F., Nuyens, D., et al. Three-dimensional rotational angiography fused with multimodal imaging modalities for targeted endomyocardial injections in the ischaemic heart. Eur Heart J Cardiovasc Imaging. 15 (8), 900-907 (2014).
  10. van Slochteren, F. J., van Es, R., et al. Multimodality infarct identification for optimal image-guided intramyocardial cell injections. Neth Heart J. 22 (11), 493-500 (2014).
  11. van Slochteren, F. J., van Es, R., et al. Three dimensional fusion of electromechanical mapping and magnetic resonance imaging for real-time navigation of intramyocardial cell injections in a porcine model of chronic myocardial infarction. Int J Cardiovasc Imaging. 32 (5), 833-843 (2016).
  12. Pape, aC. H., Bakker, M. H., et al. An Injectable and Drug-loaded Supramolecular Hydrogel for Local Catheter Injection into the Pig Heart. J Vis Exp. (100), (2015).
  13. Bastings, M. M. C., Koudstaal, S., et al. A fast pH-switchable and self-healing supramolecular hydrogel carrier for guided, local catheter injection in the infarcted myocardium. Adv Healthc Mater. 3 (1), 70-78 (2014).
  14. Koudstaal, S., Jansen of Lorkeers, S. J., et al. Myocardial infarction and functional outcome assessment in pigs. J. Vis. Exp. (86), (2014).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Trójwymiarowe przetwarzanie tkanek całego sercacelowanie w strefę przyzawałowąobrazowanie rezonansem magnetycznymobrazowanie fluorescencyjnezatapianie w agaroziekrojenie tkanekpostprocesowanie obrazurekonstrukcja modelu 3Docena dokładności wstrzyknięcia
Analiza 3D tkanki mięśnia sercowego całego serca
Skontaktuj się z nami
Poleć bibliotece

Prywatność

Warunki korzystania z usługi

Zasady

Prawa autorskie © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.