Angioplastyka plastrów w aorcie szczura lub żyłie głównej dolnej

Podsumowanie

Ustaliliśmy model angioplastyki z plastrem osierdziowym, który może być stosowany zarówno w żyłach o małej średnicy, jak i tętnicach. Model ten można wykorzystać do porównania powstawania przerostu nowozewnętrznego żył i tętnic.

Streszczenie

Łaty osierdziowe są powszechnie używane w chirurgii naczyniowej do zamykania naczyń. Aby ułatwić badania przerostu neoinimalnego, który tworzy się na plastrach, opracowaliśmy szczurzy model angioplastyki plastrowej, który można zastosować zarówno w żyle, jak i tętnicy, tworząc odpowiednio venoplastykę łaty lub arterioplastykę łatową. Omówiono techniczne aspekty tego modelu. IVC lub aorta podnerkowa są preparowane, a następnie zaciskane proksymalnie i dystalnie. Wenotomię lub arterytomię o średnicy 3 mm wykonuje się w żyle głównej lub aorcie podnerkowej dolnej u 6 do 8 tygodniowych szczurów rasy Wistar. Łata osierdziowa bydła (3 mm x 1,5 mm x 0,6 mm) jest następnie używana do zamknięcia miejsca za pomocą nylonowego szwu 10-0. W porównaniu z łatami tętniczymi, łaty żylne wykazują zwiększoną grubość neowewnętrznej części ciała w 7. dobie pooperacyjnej. Ten nowatorski model angioplastyki z plamą osierdziową może być wykorzystany do badania przerostu neointimal na biomateriałach naczyniowych, a także do porównania różnic między środowiskiem tętniczym i żylnym.

Wprowadzenie

Chirurdzy naczyniowi często zamykają naczynia krwionośne łatami osierdziowymi, bydlęcymi lub wieprzowymi, aby zmniejszyć ryzyko restenozy^1,2. W chirurgii tętnic angioplastyka z plastrem osierdziowym zmniejsza częstość restenozy w porównaniu z pierwotnym zamknięciem^3,4. Plastyka żył płatowych jest również wykonywana podobnie w przypadku żył zamkniętych, choć rzadziej w porównaniu z zabiegami tętniczymi^5,6. Plamy zazwyczaj rozwijają przerost neointimy na ich powierzchniach świetlnych; Jednak mechanizm powstawania neointimalu pozostaje niejasny, zwłaszcza w porównaniu różnic w tworzeniu się neointimalu między środowiskiem tętniczym i żylnym. Wcześniej wykazaliśmy, że łaty osierdziowe przyciągają komórki progenitorowe zarówno w środowisku tętniczym, jak i żylnym, a angioplastyka plam żylnych wykazuje bardziej agresywne tworzenie się neointimalu w porównaniu z łatami tętniczymi^7,8.

W tym badaniu opisujemy szczurzy model angioplastyki z plamą osierdziową, który jest powszechny w zamykaniu zarówno żył, jak i tętnic, i który może być używany do badania tworzenia się neointimalu; ta metoda jest małym zwierzęcym modelem techniki operacyjnej powszechnie stosowanej u ludzi. Model szczura ma większą średnicę niż model myszy, co ułatwia techniczne aspekty operacji i poprawia krzywą uczenia się modelu.

Protokół

Musisz uzyskać zgodę odpowiedniej Komisji ds. Opieki nad Zwierzętami i Użytkowania Zwierząt, wskazując, że Twój protokół jest zgodny z wytycznymi komisji etycznej ds. badań na zwierzętach Twojej instytucji.

1. Anestezjologia i zabiegi przedoperacyjne

1. Samce szczurów rasy Wistar o wadze około 200 g należy znieczulić odparowanym 3% izofluranem i tlenem o stężeniu 1 l/min podawanym do akrylowej komory indukcyjnej.
2. Potwierdź odpowiednie znieczulenie poprzez brak reakcji na uszczypnięcie palca u nogi i ogona. Nałóż maść na oczy, aby zapobiec wysuszeniu, gdy zwierzęta są pod narkozą. Umieść każdego szczura na wznak na plastikowej płytce operacyjnej i umieść silikonową maskę, aby dostarczać odparowany 2-3% izofluran w ciągłym wdychaniu. Nie pozostawiaj zwierzęcia bez opieki, dopóki nie odzyska wystarczającej przytomności, aby utrzymać pozycję leżącą na mostku.
3. Nosząc sterylne rękawiczki, usuń włosy z brzusznej części brzucha za pomocą depilatora. W tym momencie często podaje się buprenorfinę, zarówno podskórnie, jak i dootrzewnowo.

2. Procedury operacyjne

1. Plastyka żył plastrowych
   1. Przed zabiegiem należy przyciąć plaster osierdziowy bydlęcy za pomocą mikronożyczek do rozmiaru 3 mm x 1,5 mm x 0,6 mm. Namocz plaster w 10 ml wysterylizowanej soli fizjologicznej przez 5 minut w naczyniu do hodowli komórkowych.
   2. Przygotuj miejsce nacięcia za pomocą miejscowego środka antyseptycznego zgodnie z protokołem instytucjonalnym i nałóż obłożę chirurgiczną. Używaj sterylnych rękawiczek i narzędzi, aby zachować aseptyczną technikę przez cały czas trwania zabiegu. Znieczulenie miejscowe może być wstrzyknięte w miejsce planowanego nacięcia skóry.
   3. Za pomocą skalpela wykonaj nacięcie brzucha w linii środkowej rozciągające się od poziomu mieczyka mieczykowatego do tuż nad łonem.
   4. Włóż retraktor i wypatrosz wszystkie jelita od jamy brzusznej w kierunku prawej strony. Zawiń jelita w gazę nasączoną solą fizjologiczną.
   5. Odsłonić żyłę główną podnerkową (IVC). Miejsce implantacji plastra znajduje się około 2 mm poniżej poziomu początku żyły nerkowej; przeanalizuj IVC za darmo na tej stronie. Podwiąż i podziel wszystkie żyły lędźwiowe i dopływowe na tym poziomie za pomocą nylonowych szwów 6-0.
   6. Umieść dwa klipsy mikrochirurgiczne zarówno na bliższej, jak i dystalnej części śródnerkowej IVC. Wykonaj janotomię za pomocą igły 25 G, nakłuwając przednią ścianę IVC, a następnie przedłuż ją do około 3 mm za pomocą nożyczek (ryc. 1A).
   7. Zamknij janotomię plastrem za pomocą biegnących lub przerywanych szwów nylonowych 10-0 (ryc. 1B).
   8. Dokończ zamknięcie wenoplastyki. Najpierw usuń dystalny zacisk, aby odpowietrzyć plaster, a następnie usuń proksymalny zacisk, aby przywrócić przepływ krwi do IVC.
   9. Potwierdź hemostazę, obserwując przez 30 s bez kompresji. Przywróć jelita do ich naturalnej pozycji. Zamknij brzuch za pomocą szwu biegnącego zgodnie z zatwierdzonymi protokołami dla zwierząt.
2. Plastryczna plastyka tętnic
   1. Przed zabiegiem należy przyciąć plaster osierdziowy bydlęcy za pomocą mikronożyczek do rozmiaru 3 mm x 1,5 mm x 0,6 mm. Namocz go w wysterylizowanej soli fizjologicznej.
   2. Przygotuj miejsce nacięcia za pomocą miejscowego środka antyseptycznego i nałóż obłożenie chirurgiczne. Używaj sterylnych rękawiczek i narzędzi, aby zachować aseptyczną technikę przez cały czas trwania zabiegu.
   3. Za pomocą skalpela wykonaj nacięcie brzucha w linii środkowej rozciągające się od poziomu mieczyka mieczykowatego do tuż nad łonem.
   4. Włóż retraktor i wypatrosz wszystkie jelita od jamy brzusznej w kierunku prawej strony. Zawiń jelita w gazę nasączoną solą fizjologiczną.
   5. Odsłoń aortę. Miejsce implantacji plastra znajduje się około 2 mm poniżej poziomu początku tętnic nerkowych; Wypreparuj aortę swobodnie w tym miejscu. Podwiązaj i podziel wszystkie tętnice lędźwiowe na tym poziomie za pomocą nylonowych szwów 6-0.
   6. Zacisnąć aortę podnerkową. Użyj igły 25 G, aby wykonać arteriotomię, nakłuwając przednią ścianę aorty, a następnie przedłuż ją do około 3 mm za pomocą nożyczek (ryc. 1C).
   7. Zamknij arteriotomię za pomocą plastra za pomocą biegnących szwów nylonowych 10-0 (ryc. 1D). Zakończ zamknięcie arterioplastyki. Najpierw usuń dystalny zacisk, aby odpowietrzyć plaster, a następnie usuń proksymalny zacisk, aby przywrócić przepływ krwi do aorty.
   8. Potwierdź hemostazę, obserwując przez 30 s bez kompresji. Przywróć jelita do ich naturalnej pozycji. Zamknij brzuch za pomocą szwu biegnącego zgodnie z zatwierdzonymi protokołami dla zwierząt.

3. Zabiegi pooperacyjne

1. Po zamknięciu jamy brzusznej należy przerwać znieczulenie. Stosuj opiekę pooperacyjną, w tym analgezję i pielęgnację ran, zgodnie z instrukcjami zalecanymi przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt.
2. W przypadku analgezji buprenorfinę należy stosować domięśniowo w dawce 0,1 mg/kg mc. nie rzadziej niż co 12 godzin przez 24 godziny po zabiegach chirurgicznych. Codziennie sprawdzaj stan zwierzęcia w pomieszczeniu dla zwierząt, zapewniając prawidłową rekonwalescencję po okresie okołooperacyjnym, a także odpowiednie leczenie bólu pooperacyjnego. Nie należy zwracać zwierzęcia, które przeszło operację, do towarzystwa innych zwierząt, dopóki w pełni nie wyzdrowieje.

Wyniki

Po angioplastyce z użyciem łaty nie stwierdzono zakrzepicy ani w grupie z łatą żylną (n = 42), ani w grupie z łatą tętniczą (n = 24). Przeżywalność w 7. dniu wyniosła 100% w obu grupach, zarówno w przypadku łaty żylnej, jak i tętniczej.

Łaty pobrano w 7. dniu i zabarwiono hematoksyliną i eozyną, a następnie porównano grubość neointimy zgodnie z wcześniejszym opisem⁷. Ze względu na wyraźną różnicę morfologiczną między ...

Dyskusja

Opisujemy model angioplastyki plastrowej u szczura, który może być stosowany zarówno w żyłach, jak i tętnicach, tworząc odpowiednio venoplastykę łatową lub arterioplastykę łatową. Korzystając z tego modelu łaty osierdziowej, wykazaliśmy agresywny i stabilny przerost neointimalny w żynoplastyce IVC szczura w porównaniu z arterioplastyką aorty (ryc. 2)^7,8.

Na uwagę zasługuje kilka aspektów technicznych. W arterioplastyce...

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Łatka osierdziowa bydlęca	LeMaitre Vascular
Craskular Clamp	Roboz Surgical Instrument Co.	RS-5424
Zacisk nakładający kleszcze	Roboz Surgical Instrument Co	RS-5410
10-0 Szew prolenowy	Arosurgical Co.	T05A10N10-13