Niskoenergetyczna frakcja wzbogacona wodą (LEWAF) ropy naftowej jest trudnym systemem do analizy, ponieważ z biegiem czasu ta złożona mieszanina ulega przemianom chemicznym. Protokół ten ilustruje metody przygotowania próbki LEWAF oraz przeprowadzania napromieniowania i analizy chemicznej za pomocą spektrometrii ruchliwości uwięzionych jonów – FT-ICR MS.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Analiza chemiczna frakcji wycieków ropy naftowej znajdujących się w wodzie przy użyciu TIMS-FT-ICR MS
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Wiele procesów chemicznych kontroluje sposób dodawania ropy naftowej do wody morskiej, a także reakcje chemiczne, które zachodzą z biegiem czasu. Badanie tego systemu wymaga starannego przygotowania próbki w celu dokładnego odtworzenia naturalnego tworzenia się frakcji dostosowanej do wody, która występuje w naturze. Niskoenergetyczne frakcje wzbogacone w wodę (LEWAF) są starannie przygotowywane przez zmieszanie ropy naftowej i wody w ustalonych proporcjach. Butelki z aspiratorem są następnie napromieniowywane, a w określonych punktach czasowych pobierane są próbki wody i ekstrahowane przy użyciu standardowych technik. Drugim wyzwaniem jest reprezentatywna charakterystyka próbki, która musi uwzględniać zmiany chemiczne zachodzące w czasie. Ukierunkowaną analizę frakcji aromatycznej LEWAF można przeprowadzić przy użyciu źródła jonizacji laserowej pod ciśnieniem atmosferycznym sprzężonego z niestandardowo skonstruowanym spektrometrem masowym rezonansu cyklotronowego rezonansu cyklotronowego z transformacją Fouriera i transformacją jonową (TIMS-FT-ICR MS). Analiza MS TIMS-FT-ICR zapewnia ruchliwość jonów o wysokiej rozdzielczości i analizę MS o ultrawysokiej rozdzielczości, co dodatkowo umożliwia identyfikację składników izomerycznych na podstawie ich przekrojów zderzeniowych (CCS) i wzoru chemicznego. Wyniki pokazują, że gdy mieszanina olejowo-wodna jest wystawiona na działanie światła, dochodzi do znacznej fotorozpuszczalności oleju powierzchniowego w wodzie. Z biegiem czasu zachodzi przemiana chemiczna rozpuszczonych cząsteczek, przy jednoczesnym spadku liczby identyfikacji gatunków zawierających azot i siarkę na rzecz tych o większej zawartości tlenu niż zwykle obserwowano w oleju bazowym.
Wprowadzenie
Istnieje wiele źródeł narażenia środowiska na ropę naftową, zarówno z przyczyn naturalnych, jak i antropogenicznych. Po uwolnieniu do środowiska, szczególnie w oceanie, ropa naftowa może ulec podziałowi, z powstaniem plamy ropy na powierzchni, utratą lotnych składników do atmosfery i sedymentacją. Jednak niskoenergetyczne mieszanie słabo rozpuszczalnego oleju i wody następuje, a ta mieszanina, która nie jest klasycznie rozpuszczalna, tworzy tak zwaną niskoenergetyczną frakcję dostosowaną do wody (LEWAF). Solubilizacja składników oleju w wodzie jest zwykle zwiększona podczas wystawienia granicy faz olej-woda na promieniowanie słoneczne. Ta fotorozpuszczalność ropy naftowej w oceanie może ulegać znaczącym zmianom chemicznym z powodu ekspozycji na promieniowanie słoneczne i/lub degradacji enzymatycznej1,2. Zrozumienie tych zmian chemicznych i tego, jak zachodzą one w obecności matrycy masowej (tj. ropy naftowej), ma fundamentalne znaczenie dla złagodzenia skutków, jakie to narażenie wywiera na środowisko.
Poprzednie badania wykazały, że ropa naftowa ulega natlenieniu, szczególnie wielopierścieniowe węglowodory aromatyczne (WWA), które stanowią wysoce toksyczne źródło zanieczyszczeń, które szkodzą organizmom, ulegają bioakumulacji i są bioaktywne3,5,6. Zrozumienie produktów różnych procesów natleniania jest trudne, ponieważ zachodzą one tylko w obecności matrycy masowej. W związku z tym pojedyncza, standardowa analiza może nie być reprezentatywna dla zmian zachodzących w przyrodzie. Przygotowanie LEWAF musi odzwierciedlać naturalne procesy zachodzące w środowisku naturalnym. Szczególnie interesujące jest natlenienie WWA, które zachodzi pod wpływem promieniowania słonecznego.
Drugim wyzwaniem w badaniu frakcji z udziałem wody jest molekularna identyfikacja różnych składników chemicznych w próbce. Ze względu na złożoność próbki, spowodowaną jej dużą masą i stopniem tlenu, produkty natleniania zazwyczaj nie nadają się do tradycyjnej analizy przeprowadzanej za pomocą chromatografii gazowej w połączeniu z analizą MS7,8. Alternatywnym podejściem jest scharakteryzowanie zmian we wzorze chemicznym próbki przy użyciu technik MS o ultrawysokiej rozdzielczości masowej (np. FT-ICR MS). Poprzez sprzężenie TIMS z FT-ICR MS, oprócz separacji izobarycznej w domenie MS, wymiar spektrometrii ruchliwości jonów (IMS) dostarcza informacji o separacji i charakterystyce dla różnych izomerów obecnych w próbce9,10,11. W połączeniu ze źródłem jonizacji laserowej pod ciśnieniem atmosferycznym (APLI), analiza może być selektywna dla sprzężonych cząsteczek znajdujących się w próbce, co pozwala na dokładne scharakteryzowanie zmian, którym podlegają WWA12,13.
W tej pracy opisujemy protokół przygotowania LEWAF wystawionych na promieniowanie foto-naświetlające w celu zbadania procesów przemian składników oleju. Ilustrujemy również zmiany, jakie zachodzą po naświetlaniu światłem, a także procedurę ekstrakcji próbki. Przedstawimy również zastosowanie APLI z TIMS w połączeniu z FT-ICR MS w celu scharakteryzowania WWA w LEWAF w funkcji ekspozycji na światło.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
1. Przygotowanie niskoenergetycznych frakcji dostosowanych do wody (LEWAF)
- Wyczyść butelki z aspiratorem o pojemności 2 litrów, przepłukując je chlorkiem metylenu w celu usunięcia wszelkich potencjalnych zanieczyszczeń.
- Napełnij butelki 50 ml chlorku metylenu, zamknij je i mieszaj przez 30 sekund. Odcedź je do odpowiedniego pojemnika na odpady. Powtórz w sumie trzy prania.
- Do naświetlania należy użyć jednej butelki aspiratora do napromieniowania, a drugiej butelki jako próbki kontrolnej (jeśli to możliwe, należy wykonać zduplikowane zestawy każdej z nich).
- Przygotuj sztuczną wodę morską, mieszając 35 g mieszanki soli morskiej na 1 l użytej wody, aby uzyskać końcowe zasolenie 33 części na tysiąc. Przefiltrować roztwór pod niewielkim lub zerowym podciśnieniem, aby zapobiec utracie lotnych związków za pomocą aparatu filtracyjnego wyposażonego w filtr o wielkości porów 0,45 μm lub mniejszy.
- Napełnij butelki z aspiratorem sztuczną wodą morską, pozostawiając ~20% lub 400 ml przestrzeni nad głową.
- Dodać ropę naftową do odmierzonej wody morskiej za pomocą gazoszczelnej strzykawki o stężeniu nominalnym 1 g oleju/L.
UWAGA: Bardziej lepkie oleje powinny być dostarczane wagowo. - Po dodaniu oleju, mieszać roztwory przez 24 godziny w ciemności (lub przykrywając butelki aspiratora folią aluminiową) za pomocą płytki mieszającej pracującej na niskich obrotach bez wytwarzania wiru (około 100 obr./min), aby umożliwić wszystkim rozpuszczalnym w wodzie składnikom przejście do roztworu i aby uniknąć wtrącenia oleju w postaci cząstek stałych.
2. Fotonaświetlanie LEWAF, pobieranie próbek i obsługa
- Przygotuj dwa zestawy butelek do każdego eksperymentu z naświetlaniem światłem.
- Przykryj jeden zestaw butelek z aspiratorem folią aluminiową; będzie to ciemna kontrola.
- Umieść butelki z aspiratorem w łaźni wodnej o kontrolowanej temperaturze, tak aby utrzymać butelki z aspiratorem w temperaturze 25 °C wewnątrz promiennika słonecznego wyposażonego w ksenonową lampę łukową o mocy 1 500 W i natężeniu światła 765 W/m2.
- Naświetlać próbki w sposób ciągły przez żądany czas (eksperyment ten trwał 115 godzin); nie ma maksymalnego czasu.
- Po ustalonym czasie (15, 24, 48 i 115 godzin w tym eksperymencie) zbierz 150 ml wody z dna szklanego aspiratora, odkorkowując butelkę aspiratora i otwierając zawór spustowy.
- Korzystając z lejka separatora, przeprowadzić ekstrakcję ciecz-ciecz chlorkiem metylenu, dodając 50 ml podwielokrotności chlorku metylenu, wstrząsając próbką przez 2 minuty, regularnie odpowietrzając lejek, aby uniknąć zdmuchnięcia korka.
- Poczekaj, aż fazy się rozdzielą i usuń dolną fazę organiczną, wyjmując korek z lejka i powoli otwórz zawór spustowy. Odcedzić próbkę do kolby płaskodennej wyposażonej w lejek wypełniony 100 g roztworuNa2SO4. Przepłukać lejek dodatkowym chlorkiem metylenu Przeprowadzić ekstrakcję 3 razy w celu zwiększenia wydajności ekstrakcji.
UWAGA: Wielokrotne ekstrakcje są wykonywane w celu zwiększenia skuteczności ekstrakcji procedury. - Wyjąć lejek, dodać kolumnę Snydera i umieścić kolbę płaskodenną w gorącej łaźni wodnej nastawionej na 58 °C. Odparować do momentu, aż pozostanie 15 ml próbki.
- Przenieść próbkę do probówki zagęszczającej i wysuszyć próbki przy użyciu delikatnego strumienia azotu, uważając, aby uniknąć utraty próbki przez rozpryskiwanie.
3. Przygotowanie próbki do analizy
UWAGA: Przygotowanie próbki do analizy jest kluczowe i należy zachować ostrożność, aby uniknąć wprowadzenia obcych zanieczyszczeń, szczególnie poprzez użycie jakichkolwiek tworzyw sztucznych, które spowodują wypłukiwanie do próbki.
- Przygotować mieszaninę metanolu i toluenu w stosunku 1:1 v:v, stosując rozpuszczalniki LC-MS klasy optima.
- Za pomocą mikropipety wyporowej dodać rozpuszczalnik do szklanych fiolek, a następnie dodać próbki w stosunku 1:100, najpierw dodając 990 μl rozpuszczalnika, a następnie dodając 10 μl próbki.
UWAGA: Mikropipety szklane są używane w celu uniknięcia pijawek spowodowanych chlorkiem metylenu lub toluenem. - Opcjonalnie: Użyj mieszanki strojeniowej, aby skalibrować ruchliwość jonów.
UWAGA: Źródło API często ulega wypłukiwaniu, jeśli jest regularnie używane jako wzorzec kalibracji. Jeśli jony kalibracyjne nie są obecne w widmach, wówczas mieszaninę można przygotować, dodając trochę roztworu wzorcowego do próbki w rozcieńczeniu 1:1 000.
4. Analiza spektrometrii mas rezonansu cyklotronowego z transformacją Fouriera (FT-ICR MS)
- Ustaw przyrząd w tryb "Obsługa", klikając przycisk obsługi.
- Załadować próbkę do strzykawki z próbką.
- Na karcie Źródło API ustaw szybkość infuzji na 200 μl/h.
- Ustaw ciśnienie nebulizatora na 1 bar, a temperaturę parownika na 300 °C.
- Ustawić szybkość suchego gazu na 1,2 l/min i temperaturę na 220 °C.
UWAGA: Procedura ta ma zastosowanie zarówno do aplikacji APPI, jak i APCI. - Ustaw instrument w trybie "Tune", klikając przycisk strojenia. Na ekranie powinno pojawić się widmo.
UWAGA: W razie potrzeby przyrząd można zoptymalizować w celu poprawy transmisji i wykrywania jonów w zakresie m/z analitów poprzez zmianę parametrów instrumentu, takich jak napięcia, częstotliwości RF i amplitudy. Należy pamiętać, że spektrometr mas będzie musiał zostać ponownie skalibrowany. - Zatrzymaj tryb "Tune", klikając przycisk stop.
- Ustaw średnią liczbę skanów, zwykle od 20 do 200 skanów na widmo masowe, i naciśnij przycisk akwizycji, aby uzyskać widmo masowe.
UWAGA: Uśrednianie wielu widm poprawia ogólny stosunek sygnału do szumu poprzez zmniejszenie szumu i zwiększenie sygnału dla gatunków o niskiej liczebności14.
5. Analiza spektrometrii ruchliwości uwięzionych jonów (TIMS)
- Włącz tryb "Chromatografia" w programie akwizycji FT-ICR.
- Włącz tryb "TIMS", przekręcając przełącznik na wyłączniku zewnętrznym na TIMS.
UWAGA: Napięcia używane w TIMS są sterowane zewnętrznie z przyrządu. Drugie oprogramowanie będzie sterować lejkiem wejściowym instrumentu w celu przeprowadzenia analizy IMS. - Włącz dodatkową pompę do obróbki zgrubnej i za pomocą zaworu sterującego TIMS dostosuj ciśnienie wlotowe i wylotowe do żądanych zakresów (w tym eksperymencie P1 ustawiono na 2,8 mbar, a P2 na 1,4 mbar).
UWAGA: Pompę zewnętrzną należy włączyć na kilka godzin przed analizą, aby upewnić się, że pompa jest ciepła i że wydajność jest jednolita podczas analizy IMS, ponieważ zmiany prędkości gazu spowodują błędy w widmach. - Najpierw zidentyfikuj zakres napięcia, który jest wymagany do przeprowadzenia analizy IMS; odbywa się to za pomocą szybkiego, pobieżnego wyszukiwania w szerokim zakresie napięcia (250 V) przy niskiej rozdzielczości IMS (1 V/klatkę).
- Jeśli użyte napięcia są wystarczające do analizy całego spektrum, powtórz eksperyment, dostosowując TIMS do analizy o wyższej rozdzielczości. W tym celu należy zmniejszyć V/klatkę do 0,1 V i zmienić liczbę ramek, aby pokryć całąrampę ΔV.
UWAGA: Użytkownik może być zmuszony do zoptymalizowania liczby eksperymentów TIMS, które są gromadzone w komórce zderzeniowej przed analizą FT-ICR MS.
6. Analiza danych
- Otwórz dane MS w oprogramowaniu do analizy danych.
- Ustaw kryteria wybierania szczytów, aby wybrać te powyżej 6 sygnał do szumu i użyj funkcji "Znajdź szczyty".
UWAGA: Wynikowe widmo jest wewnętrznie ponownie kalibrowane przy użyciu wzorców obecnych w roztworze. Jest on używany do identyfikacji szeregów chemicznych, a następnie jest ponownie kalibrowany w celu poprawy dokładności przypisywania pierwiastków w szerokim zakresie. - Wykonuj przypisanie elementów za pomocą narzędzi lub oprogramowania do przypisywania formuł.
UWAGA: Dopuszczalne są granice wzoru C1-100H1-100N0-2O0-7S0-2, nieparzyste i parzyste konfiguracje elektronowe, a tolerancja masowa 0,5 ppm Formy jonów M+ i [M+H]+ - Zaimportuj dane IMS-MS do oprogramowania do analizy danych i wygeneruj średnie widmo masowe dla całego zakresu analitycznego.
- Wybierz piki powyżej 6 sygnał do szumu. Korzystając z serii, która została zidentyfikowana w analizie MS o ultrawysokiej rozdzielczości, wewnętrznie ponownie skalibruj widmo
- Korzystając z identyfikacji formuł z analizy FT-ICR MS, wygeneruj listę wszystkich docelowych m/z i zapisz ją jako "Flist.txt" w folderze danych. Wykaz ten zostanie wykorzystany w pierwszym kroku przetwarzania danych
- Załaduj i uruchom dostarczony skrypt, aby wyodrębnić wyekstrahowany chromatogram jonowy (EIC) dla każdego celu m/z na liście.
- Zmodyfikuj skrypt Pythona, aby wprowadzić katalog plików, napięcie początkowe, rozmiar kroku i liczbę kroków w tym docelowym analysis11.
- Uruchom skrypt dekonwolucji IMS.
UWAGA: Spowoduje to otwarcie każdego EIC i zidentyfikowanie pików za pomocą iteracyjnego dopasowania Gaussa. Wyniki zostaną wyświetlone w formacie pliku Excel13.
UWAGA: Po dopasowaniu piki poniżej określonego kryterium są wykluczane, zwykle na podstawie wysokości, szerokości i powierzchni piku (piki poniżej określonej szerokości są zwykle wykluczane z analizy z powodu losowych skoków hałasu). - Wykorzystując piki strojenia, skalibruj ruchliwość jonów od napięcia do ruchliwości dla jonów11. Można to przekształcić w przekrój kolizyjny za pomocą równania Masona-Schampa.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Analiza LEWAF za pomocą TIMS-FT-ICR MS skutkuje uzyskaniem widma dwuwymiarowego opartego na m/z i napięciu pułapkującym TIMS. Każda z próbek, pobranych w różnych punktach czasowych, może być zatem charakteryzowana na podstawie zmieniającego się składu chemicznego, obserwowanego poprzez rozkład wzorów chemicznych oraz udział izomerów zidentyfikowany przez IMS (patrz Rysunek 1). Typowo informacje o m/z mogą być wykorzystane do przypisania wzorów pierwias...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Kluczowe kroki w ramach protokołu
Złożoność chemiczna LEWAF wymaga dokładnego przygotowania, aby eksperymenty laboratoryjne dokładnie odzwierciedlały to, co dzieje się naturalnie. Prawidłowa ocena danych opiera się na trzech kryteriach: minimalizacji wprowadzania artefaktów podczas obsługi próbki (np. przygotowanie LEWAF, pobieranie próbek, ekstrakcje i przygotowanie próbki do analizy), walidacji protokołu eksperymentalnego (tj. użycie ciemnych kontroli w eksperymencie z promien...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy deklarują brak sprzecznych interesów finansowych.
Podziękowania
Ta praca była wspierana przez Narodowy Instytut Zdrowia (Grant nr R00GM106414 dla FFL). Chcielibyśmy podziękować Ośrodkowi Zaawansowanej Spektrometrii Mas Uniwersytetu Florydy za ich wsparcie.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| odczynniki | |||
| chlorek metylenu, Optima | Fisher Scientific | DS-151-4 | Stosowany jako otrzymany |
| metanol, Optima LC/MS | Fisher Scientific | A456-4 | Używany jako otrzymany |
| toluen, Optima | Fisher Scientific | T291-4 | Używany jako otrzymany |
| Na2SO4, Granulowany, Bezwodny | Fisher Scientific | S415-212 | Spalany w 450 ° C/Przechowywane w 105 ° C |
| Ropa naftowa | Różne źródła | ||
| Instant Ocean® | Systemy akwariowe | SS1200 | zasolenie 33 ppt z 0,45 μ m filtracja porów |
| Nazwa | Company | Numer katalogowy | Komentarze |
| Equipment | |||
| Suntext XLS+ | Atlas Chicalo Ill, USA | Lampa kseonowa łukowa 1 500 W, natężenie światła 765 W/m2 | |
| Ciśnienie atmosferyczne Jonizacja laserowa | Bruker Daltonics Inc, MA | Uwaga: używany jest laser o długości fali 266 nm | |
| TIMS-FT-ICR MS Instrument | Bruker Daltonics Inc, MA | Konfiguracja, którą mieliśmy, składała się z 7 Magnes T z ogniwem nieskończoności | |
| Nazwa | Company | Numer katalogowy | Komentarze |
| Software | |||
| DataAnalysis 4.2 | Bruker Daltonics Inc, MA | ||
| Python 2.7 | wymaga Numpy, Scipy, Pandas, glob, oct2py i os | ||
| Octave 4.0 |
Bibliografia
- King, S. M., Leaf, P. A., Olson, A. C., Ray, P. Z., Tarr, M. A. Photolytic and photocatalytic degradation of surface oil from the Deepwater Horizon spill. Chemosphere. 95 (0), 415-422 (2014).
- Ray, P. Z., Chen, H., Podgorski, D. C., McKenna, A. M., Tarr, M. A. Sunlight creates oxygenated species in water-soluble fractions of Deepwater Horizon oil. J Hazard Mater. 280 (0), 636-643 (2014).
- Duesterloh, S., Short, J. W., Barron, M. G. Photoenhanced toxicity of weathered Alaska North Slope crude oil to the calanoid copepods Calanus marshallae and Metridia okhotensis. Environ Sci Technol. 36 (18), 3953-3959 (2002).
- Duxbury, C. L., Dixon, D. G., Greenberg, B. M. Effects of simulated solar radiation on the bioaccumulation of polycyclic aromatic hydrocarbons by the duckweed Lemna gibba. Environmental Toxicology and Chemistry. 16 (8), 1739-1748 (1997).
- Faksness, L. G., Altin, D., Nordtug, T., Daling, P. S., Hansen, B. H. Chemical comparison and acute toxicity of water accommodated fraction (WAF) of source and field collected Macondo oils from the Deepwater Horizon spill. Mar Pollut Bull. 91 (1), 222-229 (2015).
- Wang, J., et al. Biodegradation of dispersed Macondo crude oil by indigenous Gulf of Mexico microbial communities. Science of The Total Environment. 557-558, 453-468 (2016).
- McKenna, A. M., et al. Expansion of the analytical window for oil spill characterization by ultrahigh resolution mass spectrometry: beyond gas chromatography. Environ Sci Technol. 47 (13), 7530-7539 (2013).
- Fernandez-Lima, F. A., et al. Petroleum crude oil characterization by IMS-MS and FTICR MS. Anal Chem. 81 (24), 9941-9947 (2009).
- Benigni, P., Marin, R., Fernandez-Lima, F. Towards unsupervised polyaromatic hydrocarbons structural assignment from SA-TIMS-FTMS data. Int J Ion Mobil Spectrom. 18 (3), 151-157 (2015).
- Benigni, P., Thompson, C. J., Ridgeway, M. E., Park, M. A., Fernandez-Lima, F. Targeted high-resolution ion mobility separation coupled to ultrahigh-resolution mass spectrometry of endocrine disruptors in complex mixtures. Anal Chem. 87 (8), 4321-4325 (2015).
- Benigni, P., Fernandez-Lima, F. Oversampling Selective Accumulation Trapped Ion Mobility Spectrometry coupled to FT-ICR MS: Fundamentals and Applications. Analytical Chemistry. , (2016).
- Castellanos, A., et al. Fast Screening of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons using Trapped Ion Mobility Spectrometry Mass Spectrometry. Anal Methods. 6 (23), 9328-9332 (2014).
- Benigni, P., DeBord, J. D., Thompson, C. J., Gardinali, P., Fernandez-Lima, F. Increasing Polyaromatic Hydrocarbon (PAH) Molecular Coverage during Fossil Oil Analysis by Combining Gas Chromatography and Atmospheric-Pressure Laser Ionization Fourier Transform Ion Cyclotron Resonance Mass Spectrometry (FT-ICR MS). Energy & Fuels. 30 (1), 196-203 (2016).
- Qi, Y., et al. Absorption-Mode Fourier Transform Mass Spectrometry: the Effects of Apodization and Phasing on Modified Protein Spectra. Journal of the American Society for Mass Spectrometry. 24 (6), 828-834 (2013).
- Lababidi, S., Schrader, W. Online normal-phase high-performance liquid chromatography/Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry: Effects of different ionization methods on the characterization of highly complex crude oil mixtures. Rapid Communications in Mass Spectrometry. 28 (12), 1345-1352 (2014).
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
