Artykuł metodologiczny

Podejście diagnostyczne z rozdzielczością komponentową w badaniu alergenów pyłków traw u mieszkańców Chin z południa z alergicznym nieżytem nosa i/lub astmą

DOI:

10.3791/55723

⸱

4 czerwca 2017

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1State Key Laboratory of Respiratory Disease, 2National Clinical Research Center of Respiratory Disease, 3Guangzhou Institute of Respiratory Diseases, 4Department of Allergy and Clinical Immunology, First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, 5Department of Respiratory Medicine, Sixth Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ta praca opisuje protokół, który wykorzystuje podejście komponentowe do badania wrażliwości na alergeny pyłków traw w kohorcie pacjentów z południowych Chin z alergicznym nieżytem nosa i/lub astmą.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Uczulenie na pyłki traw stwarza globalne ryzyko alergicznych chorób dróg oddechowych. Chociaż profilaktyka opiera się na lokalnych badaniach alergenów pyłkowych, dane na ten temat są ograniczone w południowych Chinach. Wszelkie dostępne dane uzyskano za pomocą kwestionariuszy samoopisowych, punktowych testów skórnych oraz testów całkowitych lub swoistych IgE z użyciem ekstraktów surowych. Z wielu powodów metody te są zawodne. Reaktywność sIgE w surowicy na alergeny trawy bermudzkiej, tymotki łąkowej i humulusa w kohorcie pacjentów z Greater Guangzhou (największego miasta południowych Chin i jego obrzeży) z alergicznym nieżytem nosa i/lub astmą badano przy użyciu w pełni zautomatyzowanego analizatora immunologicznego jako narzędzia diagnostycznego z rozdzielczością komponentową (CRD).

Po raz pierwszy wykazano znacznie wysoką częstość występowania dodatniego wyniku sIgE trawy bermudzkiej u chińskich południowców z alergicznym nieżytem nosa i/lub astmą. U tych pacjentów odnotowano również subtelne rozpowszechnienie uczulenia na tymotkę łąkową i Humulus scandens, co może wynikać z reaktywności krzyżowej, ponieważ te dwie ostatnie nie są powszechne w tym regionie. Było to również wspierane przez wykrywanie składników alergenowych.

W pełni zautomatyzowane analizatory immunologiczne mogą zapewnić zadowalającą spójność między regionami, laboratoriami i instytucjami oraz w miarę upływu czasu. Automatyzm przyrządu może umożliwić ustandaryzowaną detekcję, która nie byłaby łatwo ujawniona przed pojawieniem się CRD.

To jest badanie, które wykorzystuje podejście CRD do zbadania wrażliwości na alergeny pyłków traw w południowych Chinach. Uzupełnia to aktualne dowody w literaturze. Potrzebne są dalsze badania, aby potwierdzić te ustalenia. Jednakże, chociaż CRD jest użytecznym narzędziem, wyniki uzyskane za pomocą w pełni zautomatyzowanego analizatora testów immunologicznych nie powinny zastępować innych badań laboratoryjnych, ocen klinicznych i wiedzy specjalistycznej lekarzy.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pyłki traw stanowią prawie 50% alergii związanych z immunoglobuliną E (IgE) i, ze względu na swój unoszący się w powietrzu, stwarzają globalne ryzyko alergicznych chorób dróg oddechowych, szczególnie astmy i alergicznego nieżytu nosa1,2,3,4. Zapobieganie alergiom na pyłki traw w regionie opiera się na informacjach na temat lokalnego rozmieszczenia alergenów pyłkowych. Niestety, spektrum alergenów uczulających różni się w zależności od miejsca – obserwacja ta jest ogólnie znana jako specyficzność regionalna.

W Chinach, rozległym terytorium Azji Wschodniej, regionalna specyfika uczulenia na pyłki traw jest dodatkowo komplikowana przez ograniczone dane dostępne obecnie z południowej części tego kraju w ciągu ostatnich dziesięcioleci5. Taki niedostatek danych doprowadził do trudności w przedstawieniu ogólnego uczulenia na pyłki traw w tym dużym kraju6. Ponadto bardzo ograniczone dane dotyczące chińskich mieszkańców południa uzyskano w dużej mierze z kwestionariuszy samoopisowych, punktowych testów skórnych (a nie laboratoryjnych testów surowicy), pomiarów całkowitej IgE (a nie IgE specyficznych dla alergenu (sIgE)) oraz wykrywania sIgE alergenów (a nie cząsteczek składników alergenu).

Samodzielne zgłaszanie objawów alergicznych może być niewiarygodne, jeśli chodzi o konkretne alergeny. Punktowe testy skórne, choć powszechnie dostępne, polegają na użyciu niestandardowych, surowych ekstraktów alergenowych, które same w sobie mogą zawierać inne składniki uczulające, które zakłócają interpretację wyników. Wiarygodność punktowego testu skórnego zależy również w krytycznym stopniu od umiejętnej manipulacji przez alergologów lub wyspecjalizowane pielęgniarki, niedawnego stosowania histaminy i przestrzegania zaleceń przez pacjentów (czasami bardzo trudnych w przypadku małych dzieci). Całkowite IgE jest przydatne do badań przesiewowych alergii, ale nie określa sensownie szkodliwych alergenów u pacjenta. Co więcej, prawie wszystkie alergeny zawierają szereg cząsteczek składowych alergenów. Uczulenie na główne składniki (tj. Der p 1 i Der p 2 z roztoczy kurzu domowego) może sugerować "prawdziwą" alergię (alergię na określony alergen, a nie fałszywie dodatnią pozytywność spowodowaną reakcjami krzyżowymi z innymi alergenami), ale uczulenie na niektóre z nich (tj. reaktywny krzyżowo Der p 10, tropomiozyna) może nie 7.

Zanim wprowadzono diagnostykę komponentową (CRD), te rozczarowujące niepowodzenia utrudniały badania nad alergenami w Chinach. CRD precyzyjnie wykrywa składniki alergenu za pomocą rekombinowanych lub oczyszczonych cząsteczek alergenu, dzięki czemu pomiar jest łatwo mierzalny i możliwy do scharakteryzowania8. W minionych dziesięcioleciach w badaniach alergologicznych często stosowano surowe ekstrakty alergenów, które nieuchronnie zawierają szereg nieistotnych składników. Wiele z tych składników jest obojętnych, ale czasami niektóre mogą prowadzić do mylących pozytywnych reakcji. Zastosowanie rekombinowanych lub oczyszczonych cząsteczek alergenów w CRD może obejść ten problem, a tym samym zapewnić lepszą dokładność testu. Po przetworzeniu w mikromacierzach, podejście CRD szybko przesiewa lub identyfikuje uczulenie na setki cząsteczek alergenów u poszczególnych osób. Obecnie brakuje dobrze zaprojektowanego badania CRD dotyczącego uczulenia na pyłki traw w południowych Chinach. Idealnie byłoby, gdyby takie badanie obejmowało lokalną populację o znacznym zasięgu geograficznym, uwzględniało pyłki traw powszechnie zgłaszane w Chinach i odnosiło się do aspektów technicznych wymienionych powyżej. Aby osiągnąć praktyczny poziom znaczenia klinicznego i ułatwić rekrutację próbek surowicy, wczesne badania nad uczuleniem na pyłki traw jako alergeny wziewne mogą równie dobrze koncentrować się na pacjentach z alergicznymi zaburzeniami oddychania, a nie na populacji ogólnej.

Ta praca opisuje metodę używaną do badania reaktywności sIgE surowicy na trawę bermudzką, tymotkę łąkę i skany Humulus u pacjentów z Greater Guangzhou (największe miasto południowych Chin i jego obrzeży) z alergicznym nieżytem nosa i/lub astmą przy użyciu podejścia CRD5. Odkrycia dotyczące uczulenia na te subtropikalne i umiarkowane pyłki traw w południowych Chinach dostarczają ważnych dowodów do tego, co obecnie znajduje się w literaturze.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Protokół badania, w tym użycie próbki ludzkiej surowicy, został zatwierdzony przez Komitet Etyki Pierwszego Szpitala Stowarzyszonego Uniwersytetu Medycznego w Kantonie. Wszyscy uczestnicy wyrazili pisemną świadomą zgodę, samodzielnie lub za pośrednictwem rodziców (w przypadku dzieci). Protokół został zarejestrowany online (Chiński Rejestr Badań Klinicznych, nr rej.: ChiCTR-DCC-13004003, patrz http://www.chictr.org/cn/).

1. Identyfikacja badanej populacji

UWAGA: Repozytorium Informacji o Alergiach Państwowego Kluczowego Laboratorium Chorób Układu Oddechowego (AIR-SKLRD) jest głównym źródłem rekrutacji pacjentów, ponieważ AIR jest najlepiej udokumentowaną dużą bazą danych pacjentów do testów alergenowych w południowych Chinach9,10. AIR przechowuje próbki surowicy pacjentów od prawie dekady. Krótko mówiąc, te przechowywane próbki zostały wcześniej przygotowane przez odwirowanie 5 ml krwi żylnej poddanej flebotomii przez 10 minut przy 3000 x g i odzyskanie supernatantu. Próbki surowicy umieszczono w lodówkach o temperaturze -80 °C w celu długotrwałego przechowywania. Próbki, które spełniały kryteria włączenia pacjenta, były gotowe do użycia we wszystkich testach w niniejszym badaniu.

  1. Z bazy danych AIR można pobrać dane o pacjentach z alergicznym nieżytem nosa i/lub astmą, którzy przeszli testy surowicy na obecność alergenu traw sIgE między styczniem 2013 r. a czerwcem 2015 r., czyli wstępnie zaprojektowanym okresem badania.
  2. Wybierz pacjentów z łagodnym lub umiarkowanym alergicznym nieżytem nosa i/lub astmą zgodnie z wytycznymi Alergiczny nieżyt nosa i jego wpływ na astmę (ARIA)11 oraz wytycznymi Globalnej Inicjatywy na rzecz Astmy (GINA)12. Przydziel ich jako "grupę analityczną".
  3. Wykluczenie pacjentów z niekompletną dokumentacją medyczną, tych, którzy zostali utraceni w związku z obserwacją, tych, którzy odmawiają wyrażenia świadomej zgody na wykorzystanie ich próbek surowicy do celów naukowych, pacjentów ze stwierdzonym niedoborem odporności, osób obecnie stosujących immunoterapię lub leki immunomodulujące lub tych, u których stwierdzono infekcje pasożytnicze.
  4. Wybierz współczesną kohortę pacjentów z alergiami nieoddechowymi (tj. egzemą, alergicznym zapaleniem skóry i alergią pokarmową) zgodnie z tymi samymi kryteriami wykluczenia i przypisz ich jako "grupę kontrolną".
  5. Upewnij się, że próbki surowicy zostały pobrane przed wydaniem jakichkolwiek recept lub leczenia, aby zminimalizować mylący wpływ na wyniki laboratoryjne. Wykluczyć wszelkie próbki surowicy, które nie spełniają tego wymogu.
  6. Upewnij się, że wszyscy badani są stałymi mieszkańcami ze wszystkich części Wielkiego Kantonu (tj. urodzili się lub mieszkają tam od ponad 10 lat).

2. Przebieg badania i interesujące pomiary

  1. Pobrać próbki surowicy kwalifikujących się pacjentów z biobanku. Aby przetestować alergen/składnik alergenu, użyj 140 μl surowicy (w tym 100 μl do wypełnienia martwej przestrzeni).
    UWAGA: Maksymalna całkowita objętość surowicy potrzebna dla każdego pacjenta w tym badaniu wynosi: 3 specyficzne alergeny i 8 składników alergenowych, sIgE = 140 μL * 11 = 1,540 μL.
  2. Podczas korzystania z tego przyrządu należy przede wszystkim przetestować próbki surowicy pod kątem sIgE do całych alergenów trawy bermudzkiej, tymotki łąkowej i skandenów kości ramiennej. Postępuj zgodnie z instrukcjami w sekcji 3.
    UWAGA: Te pyłki zostały wybrane do pomiarów, ponieważ trawa bermudzka13,14,15 i Humulus scandens16 były szeroko opisywane w Chinach, podczas gdy Timothy grass17,18,19 to typowy gatunek rośliny, który żyje w środowiskach od stref tropikalnych do umiarkowanych i jest najczęściej badany na całym świecie.
  3. Po drugie, przetestuj próbki surowicy zidentyfikowane w kroku 2.3 pod kątem obecności sIgE do całych alergenów pod kątem obecności sIgE do składników alergenowych Bermudów [Cyn d 1 (g216)], Timothy [Phlp 1 (g205), Phl p 4 (g208), Phl p 5 (g215), Phl p 6 (g209), Phl p 7 (g210), Phl p 11 (g211) i Phl p 12 (g212)], i determinanty węglowodanów reagujących krzyżowo [CCD (o214)]. Postępuj zgodnie z instrukcjami w sekcji 3.

3. W pełni zautomatyzowana procedura testowa z wykorzystaniem systemu analizy testów immunologicznych

UWAGA: Cała procedura testowania sIgE alergenów, która jest w pełni zautomatyzowana i została opisana gdzie indziej7,8,9,10, jest zgodna z protokołem producenta.

  1. Uruchom w pełni zautomatyzowany analizator testów immunologicznych (np. ImmunoCAP1000) i używaj go do wykonywania testu immunologicznego przez cały czas trwania badania. Włącz wbudowany komputer z systemem zarządzania danymi informacyjnymi (IDM).
    UWAGA: Analizator testów immunologicznych jest rutynowo w trybie czuwania.
  2. Przy włączonym "Zasilaniu podstawowym" włącz "Zasilanie systemowe" i odczekaj 3 minuty, aż uruchomi się wbudowane oprogramowanie. Kliknij "Załaduj roztwór do płukania" i "Załaduj roztwór do mycia".
  3. Dodać 140 μl surowicy do fiolki dla każdego testu na alergen/składnik alergenu. Każdą fiolkę zawierającą 140 μl surowicy należy oznaczyć numerem identyfikacyjnym niepowtarzalnym dla każdego pacjenta.
  4. W interfejsie IDM wykonaj następujące kroki, klikając menu.
    1. Sprawdź okno "Lista żądań" w IDM, aby upewnić się, że "sIgE" jest wybraną metodą testową.
    2. Załaduj probówki z próbkami do stojaków na próbki, a probówki do kontroli jakości do stojaków kontroli jakości, z kodami kreskowymi.
      UWAGA: Dla każdego pacjenta początkowo zaplanowano testy na obecność sIgE na 3 specyficzne alergeny i 8 składników alergenowych, czyli 346*11 (3,806) probówek z próbkami. Dla każdej probówki z próbką dopasowano 3 probówki kontroli jakości, które zawierają niski, średni i wysoki poziom kontroli sIgE (szczegółowe informacje znajdują się w Tabeli materiałów). Ostatecznie tylko 58 pacjentów, którzy uzyskali pozytywny wynik w teście pierwotnym (krok 2.3), zostało dalej przebadanych w teście wtórnym (krok 2.3). Załadunek rur można ustawić automatycznie na konsoli komputera.
    3. Wybierz "Załaduj odczynniki" na ekranie "Przetwarzanie testu". Zakończ ładowanie próbki i stojaków do kontroli jakości, roztworu rozwojowego, koniugatu, kalibratorów, nośnika, końcówek pipet, roztworu zatrzymującego i roztworu myjącego zgodnie z "Listą załadunków" (szczegółowe informacje znajdują się w Tabeli materiałów).
    4. W "Załaduj i uruchom" naciśnij "OK."
      UWAGA: Pod koniec pomiaru wyniki pojawiają się na IDM.
    5. Z interfejsu IDM wybierz dane, które chcesz wyeksportować. Kliknij "Menu", "Zatwierdź" i "Zapisz jako" i wyeksportuj wyniki pomiaru sIgE jako plik arkusza kalkulacyjnego.
    6. Zaimportuj plik arkusza kalkulacyjnego do oprogramowania statystycznego (np. SPSS)10. Korzystając ze specjalnego modułu dla współczynników Spearmana z menu SPSS, przeanalizuj korelacje w uczuleniu między tymi pyłkami traw (dodatnie sIgE do całego alergenu) a składnikami pyłku (dodatnie sIgE do cząsteczek alergenu).

4. Definicja reaktywności sIgE

UWAGA: Dla próbki surowicy nierozcieńczonej, zakres pomiaru specyficznej IgE wynosi od 0,35 do 100 kU/L.

  1. Rozcieńczyć próbki o wartościach sIgE >100 kU/L 1:5 i ponownie oznaczyć. W przypadku, gdy wartość pozostaje wyższa niż 100 kU/L, należy przystąpić do dalszych rozcieńczeń, aż do osiągnięcia poziomu punktu końcowego do 1 000 kU/L.
  2. Na podstawie wartości progowej 0,35 kU/L należy przyjąć, że poziom sIgE przekraczający 0,35 kU/L jest dodatni5,7,10. Oceń reaktywność testów sIgE jako: klasa 1 (≥0,35 i <0,70 kU/L), klasa 2 (≥0,70 i <3,50 kU/L), klasa 3 (≥3,50 i <17,50 kU/L), klasa 4 (≥17,50 i <50,00 kU/L), klasa 5 (≥50,00 i <100,00 kU/L) oraz klasa 6 (≥100,00 kU/L).

5. Analiza statystyczna

  1. Analizuj dane za pomocą oprogramowania statystycznego (np. SPSS)10. Dane ilościowe należy podawać jako średnią i odchylenie standardowe, dane jakościowe jako medianę i przedziały międzykwartylowe (IQR), a dane jakościowe jako odsetek wyników dodatnich.
  2. Użyj testu chi-kwadrat do porównania proporcji między grupami, testu t bez par dla danych ilościowych i testu sumy rang dla danych jakościowych.
  3. Użyj testu Pearsona do analiz korelacji między danymi parametrycznymi, ze współczynnikami korelacji wyrażonymi jako "r", oraz testu Spearmana dla wartości nieparametrycznych, ze współczynnikami korelacji wyrażonymi jako "rs". Rozważ, że istotność statystyczna ma miejsce, gdy wartości P <0,05.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

W pełni zautomatyzowany analizator immunologiczny używany w tym badaniu ma strukturę fazy stałej pokrytą kowalencyjnie sprzęgającymi alergenami lub składnikami alergenów, które reagują z cząsteczkami będącymi przedmiotem zainteresowania (sIgE) w próbkach surowicy od pacjenta. Dzięki programowi automatycznemu analizator zmywa wszystkie nieswoiste IgE za pomocą 150 μl roztworu płuczącego i powtarza to 5 razy. Następnie dodaje znakowane enzymami przeciwciała anty-IgE (50 μl) w celu wytworzen...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

W pełni zautomatyzowane analizatory immunologiczne mogą zapewnić zadowalającą spójność między regionami, laboratoriami i instytucjami oraz w czasie. Stwierdzono, że taka automatyczna procedura w znacznym stopniu wspiera badania laboratoryjne i kliniczne, umożliwia standaryzowane wykrywanie wielu alergenów i/lub składników alergenów oraz identyfikuje prawdopodobną reaktywność krzyżową alergenów, która nie byłaby łatwo ujawniona przed pojawieniem się CRD. Co więcej, cała procedura testowa może być zakończona przy ścisłej k...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dziękujemy Yueming Su za pomoc w przygotowaniu figury. Badanie to zostało sfinansowane przez Fundację Nauki i Technologii Guangdong (nr projektu: 2014A020212352), Biuro Edukacji Guangzhou (1201630044; 1201630393) oraz Chińską Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych (NSFC 81572063; NSFC 81601394).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
ImmunoCAP 1000 InstrumentThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Szwecja)12-3800-01
Pakiet oprogramowania Phadia Information Data ManagerThermo Fisher Scientific Inc. (Phadia AB, Uppsala Szwecja)12-3801-11
Pakiet oprogramowania, ImmunoCAP 1000Thermo Fisher Scientific Inc. (Phadia AB, Uppsala Szwecja)12-3801-12
g2
( Trawa bermudzka)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Szwecja)14-4131-01
g6
(Tymotka trawa)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Szwecja)14-4100-01
w22
(japoński chmiel)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Szwecja)14-4452-01
g216
(nCyn d 1)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Szwecja)14-4972-01
g205
(rPhl p 1)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Szwecja)14-5234-01
g208
(nPhl p 4)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Szwecja)14-5288-01
g215
(rPhl p 5b)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Szwecja)14-5338-01
g209
(rPhl p 6)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Szwecja)14-5289-01
g210
(rPhl p 7)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Szwecja)14-5290-01
g211
(rPhl p 11)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala, Szwecja)14-5291-01
g212
(rPhl p 12)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Szwecja)14-5292-01
o214
Determinanty węglowodanów reagujących krzyżowo (CCD)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Szwecja)14-5339-01
Specyficzny koniugat IgE 400Thermo Fisher Scientific Inc. (Phadia AB, Uppsala Szwecja)10-9310-08
Specyficzny pasek kalibracyjny IgEThermo Fisher Scientific Inc. (Phadia AB, Uppsala Szwecja)10-9459-08
Specyficzny pasek kontrolny krzywej IgEThermo Fisher Scientific Inc. (Phadia AB, Uppsala Szwecja)10-9312-08
Specyficzne IgE anty-IgE ImmunoCAPThermo Fisher Scientific Inc. (Phadia AB, Uppsala Szwecja)14-4417-01
ImmunoCAP Specyficzna kontrola negatywna IgEThermo Fisher Scientific Inc. (Phadia AB, Uppsala Szwecja)10-9445-01
ImmunoCAP Specyficzna kontrola IgE LThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala, Szwecja)10-9528-01
ImmunoCAP Specyficzna kontrola IgE MThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala, Szwecja)10-9529-01
ImmunoCAP Specyficzna kontrola IgE HThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala, Szwecja)10-9530-01
Rozwiązanie rozwojoweThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Szwecja)10-9439-08
Stop SolutionThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Szwecja)34-2271-58
Roztwór myjącyThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Szwecja)10-9202-08
FluoroCThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Szwecja)10-9264-01
Zestaw roztworów do konserwacjiThermo Fisher Scientific Inc. (Phadia AB, Uppsala, Szwecja)10-9476-01

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Scadding, G. K. BSACI guidelines for the management of allergic and non-allergic rhinitis. Clin Exp Allergy. 38 (1), 19-42 (2007).
  2. Pollart, S. M., Reid, M. J., Fling, J. A., Chapman, M. D., Platts-Mills, T. A. Epidemiology of emergency room asthma in northern California: association with IgE antibody to rye grass pollen. J Allergy Clin Immunol. 82 (2), 224-230 (1988).
  3. Wang, Q. Lower airway inflammation and hyperresponsiveness in non-asthmatic patients with non-allergic rhinitis. J Thorac Dis. 7 (10), 1756-1764 (2015).
  4. Ma, Y. The link between mold sensitivity and asthma severity in a cohort of northern Chinese patients. J Thorac Dis. 7 (4), 585-590 (2015).
  5. Luo, W. Major grass pollen allergens and components detected in a southern Chinese cohort of patients with allergic rhinitis and/or asthma. Mol Immunol. 78, 105-112 (2016).
  6. Zhang, Y., Zhang, L. Prevalence of allergic rhinitis in china. Allergy Asthma Immunol Res. 6 (2), 105-113 (2014).
  7. Zeng, G., Zheng, P., Luo, W., Huang, H., Wei, N., Sun, B. Longitudinal profiles of serum specific IgE and IgG4 to Dermatophagoides pteronyssinus allergen and its major components during allergen immunotherapy in a cohort of southern Chinese children. Mol Immunol. 74, 1-9 (2016).
  8. Kleine-Tebbe, J., Matricardi, P. M., Hamilton, R. G. Allergy work-up including component-resolved diagnosis: how to make allergen-specific immunotherapy more specific. Immunol Allergy Clin North Am. 36 (1), 191-203 (2016).
  9. Sun, B., Zheng, P., Wei, N., Huang, H., Zeng, G. Co-sensitization to silkworm moth (Bombyx mori) and 9 inhalant allergens among allergic patients in Guangzhou, southern China. PLoS One. 9 (5), e94776(2014).
  10. Zeng, G. Component-resolved diagnostic study of Dermatophagoides pteronyssinus major allergen molecules in a southern Chinese cohort. J Investig Allergol Clin Immunol. 25 (5), 343-351 (2015).
  11. Allergic Rhinitis and Its Impact on Asthma (ARIA). Management of Allergic Rhinitis and Its Impact on Asthma Pocket Guide. , Available from: http://www.whiar.org/docs/ARIA_PG_08_View_WM.pdf (2015).
  12. Global Initiative for Asthma (GINA). Pocket Guide for Asthma Management and Prevention. , Available from: http://ginasthma.org/wp-content/uploads/2016/01/GINA_Pocket_2015.pdf (2015).
  13. Liu, J., Guo, A., Guo, H. Morphological variation and types of Cynodon dactylon. Acta Prataculture Sinica. 12 (6), 99-104 (2003).
  14. Zhang, H., Xi, J. Study on the germplasm resource and ecological characteristics of wild carpet grass (Axonopus compressus) in Guangdong. Grassland and Turf. 13 (1), 25-28 (2005).
  15. Kao, S. H., Su, S. N., Huang, S. W. Sub-proteome analysis of novel IgE-binding proteins from Bermuda grass pollen. Proteomics. 5 (14), 3805-3813 (2005).
  16. Ouyang, Y. H., Zhang, D. S., Fan, E. Z., Li, Y., Zhang, L. Correlation between symptoms of pollen allergic rhinitis and pollen grain spreading in summer and autumn. Zhonghua Er Bi Yan Hou Tou Jing Waike Zazhi. 47 (8), 623-627 (2012).
  17. Westritschnig, K. Analysis of the sensitization profile towards allergens in central Africa. Clin Exp Allergy. 33 (1), 22-27 (2003).
  18. Rossi, R. E., Monasterolo, G., Monasterolo, S. Measurement of IgE antibodies against purified grass-pollen allergens (Phl p 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 11, and 12) in sera of patients allergic to grass pollen. Allergy. 52 (12), 1180-1185 (2001).
  19. Zafred, D., Nandy, A., Pump, L., Kahlert, H., Keller, W. Crystal structure and immunologic characterization of the major grass pollen allergen Phl p 4. J Allergy Clin Immunol. 132 (3), 696-703 (2013).
  20. Chabre, H. Molecular variability of group 1 and 5grass pollen allergens between Pooideae species: implications for immunotherapy. Clin Exp Allergy. 40 (3), 505-519 (2010).
  21. Mari, A. Skin test with a timothy grass (Phleum pratense) pollen extract vs.IgE to a timothy extract vs. IgE to rPhl p 1 rPhl p 2, nPhl p 4, rPhl p 5, rPhl p 6, rPhl p 7, rPhl p 11, and rPhl p 12: epidemiological and diagnostic data. Clin Exp Allergy. 33 (1), 43-51 (2003).
  22. Grote, M., Stumvoll, S., Reichelt, R., Lidholm, J., Rudolf, V. Identification of an allergen related to Phl p 4, a major timothy grass pollen allergen, in pollens, vegetables, and fruits by immunogold electron microscopy. Biol Chem. 383 (9), 1441-1445 (2002).
  23. Andersson, K., Lidholm, J. Characteristics and immunobiology of grass pollen allergens. Int Arch Allergy Immunol. 130 (2), 87-107 (2003).
  24. Tripodi, S. Molecular profiles of IgE to Phleum pratense in children with grass pollen allergy: implications for specific immunotherapy. J Allergy Clin Immunol. 129 (3), 834-839 (2012).
  25. Stumvoll, S., et al. Purification, structural and immunological characterization of a timothy grass (Phleum pratense) pollen allergen Phl p 4, with cross-reactive potential. Biol Chem. 383 (9), 1383-1396 (2002).
  26. Wood, R. A., Segall, N., Ahlstedt, S., Williams, P. B. Accuracy of IgE antibody laboratory results. Ann Allergy Asthma Immunol. 99 (1), 34-41 (2007).
  27. Wang, J., Godbold, J. H., Sampson, H. A. Correlation of serum allergy (IgE) tests performed by different assay systems. J Allergy Clin Immunol. 121 (5), 1219-1224 (2008).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Component Resolved DiagnosticsAllergic AsthmaSerum IgE TestingImmunoassay AnalyzerBermuda Grass SensitizationTimothy Grass AllergyCross Reactive CarbohydrateAllergen Component Analysis

Powiązane artykuły