Ten protokół pokazuje, jak mierzyć przerażenie wzmocnione lękiem podczas paradygmatu pamięci roboczej Sternberga.
Artykuł metodologiczny
Ten protokół pokazuje, jak mierzyć przerażenie wzmocnione lękiem podczas paradygmatu pamięci roboczej Sternberga.
Celem tego protokołu jest wyjaśnienie, jak badać związek między procesami pamięci roboczej a lękiem poprzez połączenie paradygmatów pamięci roboczej Sternberga (WM) i zagrożenia szokiem. W paradygmacie WM Sternberga badani są zobowiązani do utrzymywania serii liter w WM przez krótki odstęp czasu i odpowiadania poprzez określenie, czy pozycja danej litery w serii pasuje do podpowiedzi numerycznej. W paradygmacie zagrożenia porażeniem prądem badani są narażeni na naprzemienne bloki, w których są narażeni na ryzyko otrzymania nieprzewidywalnych objawów łagodnego porażenia prądem elektrycznym lub są bezpieczni przed wstrząsem. Lęk jest badany w całym bloku bezpieczeństwa i zagrożenia za pomocą akustycznego odruchu przerażenia, który jest wzmacniany w przypadku zagrożenia (Anxiety-Potentiated Startle (APS)). Przeprowadzając paradygmat WM Sternberga w czasie zagrożenia wstrząsem i badając reakcję na przestraszenie zarówno w okresie konserwacji WM, jak i w interwale międzypróbnym, możliwe jest określenie wpływu konserwacji WM na APS.
Zgodnie z Teorią Kontroli Uwagi (ACT), lęk zakłóca przetwarzanie poznawcze, rywalizując o dostęp do ograniczonych zasobów pamięci roboczej (WM)1. Jednak ACT nie odnosi się do odwrotności tej zależności (tj. wpływu przetwarzania poznawczego na lęk). Manipulując lękiem podczas zadań poznawczych przy użyciu paradygmatu zagrożenia szokiem, można ocenić zarówno wpływ lęku na funkcje poznawcze, jak i wpływ funkcji poznawczych na lęk2,3,4,5. Celem tego protokołu jest pokazanie, w jaki sposób stosować paradygmat WM Sternberga podczas paradygmatu zagrożenia wstrząsem, aby zbadać dwukierunkowy związek między lękiem a utrzymaniem WM.
Paradygmat zagrożenia wstrząsem jest szeroko stosowany w laboratorium do manipulowania stanem lękowym6,7,8,9,10,11 i może być zaimplementowany u zdrowych podmiotów2,3,4,5 i patients12,13,14,15 podobnie (patrz Bradford et al.16 dla przykładu). Paradygmat składa się z naprzemiennych bloków zagrożenia i bezpieczeństwa17. Podmioty są narażone na otrzymywanie nieprzewidywalnych stymulacji elektrycznych podczas blokad zagrożeń, ale nie podczas bezpiecznych blokad. Lęk badanych może być okresowo badany za pomocą akustycznego odruchu przerażenia18,19. Badani zazwyczaj wykazują większe reakcje zaskoczenia podczas blokad zagrożeń w porównaniu z bezpiecznymi blokami, a ten Lęk-Wzmocniony Strach (APS) może być używany jako peryferyjny wskaźnik zmian w trwającym lęku podczas testu17,18. Wzmocnione przerażenie w paradygmacie zagrożenia wstrząsem jest uznawane przez Narodowy Instytut Zdrowia Psychicznego (NIMH) za fizjologiczny wskaźnik lęku w ich matrix20. Jednak możliwe jest również zbadanie lęku danej osoby za pomocą samoopisowej skali typu Likerta. Ponieważ zagrożenie wstrząsem jest paradygmatem pasywnym, inne zadania poznawcze mogą być wykonywane jednocześnie21. Łącząc zagrożenie porażeniem prądem z zadaniem WM Sternberga, możliwe jest sondowanie niepokoju podczas konserwacji WM3.
Podczas paradygmatu WM Sternberga, badani są zobowiązani do zakodowania serii liter w WM i udzielenia odpowiedzi po krótkim odstępie czasu3,22. W przeciwieństwie do bardziej złożonych zadań WM (np. zadania N-back)4,5,23, zadanie Sternberga nie wymaga manipulowania informacjami w klasie WM3,22. Ponadto badani kodują, utrzymują i reagują na elementy w różnych odstępach czasu. Razem te cechy umożliwiają oddzielenie utrzymania WM od innych, bardziej złożonych procesów poznawczych24. Sondując APS w okresie konserwacji WM, możliwe jest określenie wpływu konserwacji WM na niepokój. Podobnie, porównując dokładność WM i czas reakcji (RT) między zagrożeniem a bezpiecznymi blokami, możliwe jest określenie wpływu lęku na konserwację WM. Protokół ten szczegółowo opisze kroki proceduralne niezbędne do przeprowadzenia paradygmatu WM Sternberga w czasie zagrożenia wstrząsem, a także kroki analityczne niezbędne do oceny APS, dokładności i czasu reakcji podczas zadania.
Wszyscy uczestnicy wyrazili pisemną zgodę zatwierdzoną przez Narodowy Instytut Zdrowia Psychicznego (NIMH) Combined Neuroscience Institutional Review Board (IRB) i otrzymali wynagrodzenie za uczestnictwo.
1. Konfiguracja sprzętu
UWAGA: Ustaw sprzęt zgodnie z opisem poniżej (zobacz Rysunek 1A)3.
2. Zaprogramuj eksperyment za pomocą dostępnego oprogramowania
UWAGA: Użyto oprogramowania systemów neurobehawioralnych (tutaj nazywanego eksperymentalnym; zobacz Tabelę Materiałów). Można użyć innego równoważnego oprogramowania.
3. Uruchom eksperyment
4. Analizuj wydajność
UWAGA: Przeanalizuj dane dotyczące wydajności pojedynczego uczestnika, korzystając z poniższych instrukcji.
5. Analizuj Zaskoczenie
6. Analizuj dane samoopisowe
Niniejszy protokół pozwala uzyskać trzy główne typy danych: dokładność, RT oraz APS. W przypadku dokładności i RT protokół obejmuje dwie manipulacje eksperymentalne: zagrożenie (threat) oraz obciążenie (load). Dla dokładności typowe wyniki wykazują główny efekt obciążenia, ale brak głównego efektu zagrożenia oraz brak interakcji między obciążeniem a zagrożeniem (próby (F(1,18) = 84.34; p <0.01; patrz Rysunek 5). Badani zazwyczaj wykazują wyższą dokładność w próbach z niskim obciążeniem niż w próbach z wysokim obciążeniem. W przypadku RT typowe wyniki wykazują główny efekt zarówno obciążenia (F(1,18) = 19.49; p <0.01), jak i zagrożenia (F(1,18) = 8.03; p = 0.01), przy braku interakcji między obciążeniem a zagrożeniem (patrz Rysunek 6). Badani zazwyczaj wykazują krótsze RT podczas prób z niskim obciążeniem niż podczas prób z wysokim obciążeniem oraz krótsze RT podczas bloków z zagrożeniem niż podczas bloków bezpiecznych.
Niniejszy protokół obejmuje również dwie manipulacje eksperymentalne dla APS: obciążenie oraz czas wystąpienia reakcji przerażenia. Typowe wyniki wykazują interakcję między obciążeniem a czasem wystąpienia reakcji (F(1,18) = 16,63; p <0,01; patrz Rysunek 7). Badani zazwyczaj wykazują istotnie większe APS podczas prób z niskim obciążeniem w porównaniu do prób z wysokim obciążeniem, ale tylko wtedy, gdy bodziec wywołujący reakcję przerażenia jest podawany w przerwie utrzymania (MNT; okres utrzymania: t(18) = 3,92; p <0,01; ITI: p >0,05; d = 0,72). Należy zauważyć, że ze względu na to, iż statystyka inferencyjna może różnić się w zależności od badania, istotne jest powtórzenie tych efektów. Po tym eksperymencie stwierdzono spójny spadek APS w funkcji trudności zadania. Wynik ten zaobserwowano w werbalnym zadaniu N-back (3-back > 0-back d(25) = 2,2)4, paradygmacie pamięci roboczej Sternberga (patrz wyżej, d(18) = 0,72; w celu replikacji patrz Eksperyment 1 w Balderston et al. 20163; wysokie obciążenie > niskie obciążenie, d(18) = 0,44) oraz w złożonym zadaniu rozpoznawania obrazów (wydobywanie > kodowanie, d(21) = 0,47)2. Należy jednak zaznaczyć, że końcowy wynik może być częściowo spowodowany habituacją.
Choć trudne jest określenie subiektywnego stanu afektywnego jednostki podczas każdej próby, dane z raportów własnych mogą być wykorzystane do oceny skuteczności manipulacji lękiem oraz jako miara różnic indywidualnych. Dlatego ważne jest, aby przed eksperymentem ocenić stan afektywny badanego za pomocą ustandaryzowanych kwestionariuszy oraz badać poziom lęku badanego w trakcie eksperymentu. Typowe wyniki wykazują istotnie wyższe oceny lęku podczas bloków zagrożenia niż podczas bloków bezpiecznych; t(18) = 8.85; p <0.001.

Rysunek 1: Schemat typowej konfiguracji aparatury. (A) Użycie oddzielnych komputerów do przeprowadzania zadania i rejestracji sygnałów fizjologicznych badanego. Synchronizacja zdarzeń z sprzętem do monitorowania psychofizjologicznego i urządzeniem do wywoływania wstrząsów za pośrednictwem portu równoległego komputera eksperymentalnego. Przesyłanie sygnałów fizjologicznych ze sprzętu do monitorowania psychofizjologicznego do komputera akwizycyjnego za pomocą kabla Ethernet. Podawanie wstrząsu badanemu za pomocą urządzenia do wstrząsów, które jest sterowane przez generator sygnałów i wyzwalane przez komputer do zadań. Podawanie białego szumu badanemu przez kartę dźwiękową komputera do zadań i rejestracja przebiegu za pomocą sprzętu do monitorowania psychofizjologicznego. (B) Wymagane ustawienia generatora sygnałów. (C) Wymagane ustawienia urządzenia do wstrząsów. Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję tego rysunku.

Rysunek 2: Schemat typowego ustawienia badanego. Przymocuj elektrody do podawania wstrząsu na niedominujący nadgarstek badanego. Przymocuj elektrody do pomiaru przewodnictwa skóry na niedominującej dłoni badanego. Przymocuj elektrody do pomiaru elektromiografii pod prawym okiem, nad mięśniem okrężnym oka. Przymocuj elektrody do pomiaru elektrokardiografii na lewym bicepsie i prawej obojczyku badanego. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.

Rycina 3: Schemat typowego projektu eksperymentalnego. Przedstaw badanym serię liter, po której następuje krótki okres podtrzymywania i sygnał do odpowiedzi. Podczas sygnału do odpowiedzi przedstaw badanym literę (z serii) oraz liczbę. Poproś badanych o wskazanie, czy liczba odpowiada pozycji litery docelowej w poprzedniej serii. W trakcie każdej próby, albo w okresie podtrzymywania, albo w przerwie między próbami (ITI), zastosuj bodźce wywołujące reakcję przestrachu. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.

Rysunek 4: Przykładowe zapisy EMG po stymulacji białym szumem. (A) Surowy zapis EMG. (B) Zapis EMG po przefiltrowaniu pasmowym w zakresie od 30 do 500 Hz. (C) Zapis EMG po przefiltrowaniu i prostowaniu z wykorzystaniem stałej 20 ms. (D) Surowy zapis EMG z próby zanieczyszczonej szumem linii bazowej. Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję tego rysunku.

Rysunek 5: Typowe wyniki czasu reakcji (RT). Badani zazwyczaj reagują szybciej podczas prób z niskim obciążeniem niż podczas prób z wysokim obciążeniem. Badani zazwyczaj reagują również szybciej pod wpływem zagrożenia wstrząsem. Słupki reprezentują średnią ± SEM. Proszę kliknąć tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.

Rysunek 6: Typowe wyniki reakcji przestrachu potęgowanego lękiem (APS). Gdy reakcja przestrachu jest badana w okresie utrzymywania (MNT), u badanych zazwyczaj obserwuje się silniejsze potęgowanie reakcji przestrachu w próbach o niskim obciążeniu w porównaniu do prób o wysokim obciążeniu. Jednak efekt ten nie występuje, gdy reakcja przestrachu jest badana w okresie ITI. Słupki reprezentują średnią ±SEM. Aby wyświetlić większą wersję tego rysunku, kliknij tutaj.

Rycina 7: Typowe wyniki dokładności (procent (%) poprawnych odpowiedzi). Osoby badane zazwyczaj wykazują większą dokładność podczas prób z niskim obciążeniem niż podczas prób z wysokim obciążeniem; jednak wydajność nie wykazuje tendencji do zmian w zależności od zagrożenia wstrząsem. Słupki reprezentują średnią ± SEM. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.
Dodatkowe pliki kodu: Plik wav dla prezentacji białego szumu (40ms_wn.wav.) Kliknij tutaj, aby pobrać ten plik. Kod niezbędny do konfiguracji parametrów sprzętowych dla oprogramowania eksperymentalnego (Sternberg_threat_v5.exp.) Kliknij tutaj, aby pobrać ten plik. Kod niezbędny do przeprowadzenia eksperymentu (Sternberg_threat_v5.sce.). Kliknij tutaj, aby pobrać ten plik.
W artykule pokazano, jak zarządzać zadaniem WM Sternberga w czasie zagrożenia porażeniem. Korzystając z tego protokołu, udało się wykazać, że utrzymanie WM jest wystarczające do zmniejszenia lęku, mierzonego nasileniem akustycznego odruchu przerażenia3. Wyniki te sugerują, że związek między poznaniem a lękiem jest dwukierunkowy 3-5 i że modele lęku (np. teoria kontroli uwagi)1 muszą wyjaśniać wpływ poznania na lęk oprócz wpływu lęku na poznanie. Chociaż obecny protokół opisuje integrację zadania WM Sternberga i paradygmatu zagrożenia wstrząsem, może on również służyć jako ramy do badania związku między poznaniem a lękiem w bardziej ogólnym ujęciu21.
Przeprojektowując istniejące zadania poznawcze tak, aby odbywały się na przemian w okresach bezpieczeństwa i zagrożenia, możliwe jest zbadanie wpływu lęku na określone procesy poznawcze, takie jak WM i trwała uwaga 2,31,32. Na przykład w poprzedniej pracy zadanie pamięci roboczej N-back zostało zintegrowane z paradygmatem zagrożenia wstrząsem, wykazując, że lęk zakłóca WM przy małym, ale nie wysokim obciążeniu 4,5. Wyniki te sugerują, że lęk zakłóca WM, ale także, że zdrowe osoby są w stanie przezwyciężyć lęk, gdy wymagania dotyczące zadań są wysokie. Zadanie Sustained Attention to Response Task (SART) zostało również zintegrowane z paradygmatem zagrożenia wstrząsem; Badani musieli hamować swoje reakcje na rzadkie bodźce docelowe. Wykazano w tym, że zagrożenie wstrząsem zwiększa dokładność prób NoGo podczas zadania31,32. Wraz z badaniami N-back, wyniki te sugerują, że lęk może zarówno pogarszać, jak i ułatwiać wydajność, a kierunek efektu zależy od konkretnych procesów poznawczych zaangażowanych w zadanie.
Podobnie, dodając precyzyjnie wymierzone w czasie sondy przestraszenia do istniejącego zadania poznawczego, które zostało dostosowane do paradygmatu zagrożenia wstrząsem, możliwe jest zbadanie wpływu określonych zadań poznawczych na lęk. Związek między obciążeniem WM a lękiem zaobserwowano początkowo podczas zadań N-back WM, gdzie zwiększenie liczby elementów do utrzymania zmniejszyło APS 4,5. Ponieważ jednak zadanie to wymaga zarówno konserwacji, jak i manipulacji, trudno było określić, które składniki WM są niezbędne do obserwowanego zmniejszenia lęku 23,33. Kontynuując te badania prostszym paradygmatem WM Sternberga, możliwe było wykazanie, że centralne przetwarzanie wykonawcze nie jest konieczne do redukcji lęku3.
Technika ta może być wykorzystana do badania zarówno wpływu lęku na funkcje poznawcze, jak i wpływu poznania na lęk. W związku z tym ważne jest, aby w tym paradygmacie manipulować zarówno lękiem, jak i obciążeniem poznawczym oraz dokonywać wiarygodnych pomiarów każdego z nich. Stosując tę metodę do nowych paradygmatów poznawczych, ważne jest, aby upewnić się, że paradygmat poznawczy ma rozróżnialne poziomy trudności w oparciu o wyniki. Jeśli testy pilotażowe nie wykażą różnic w wydajności w różnych warunkach eksperymentalnych, sprawdź efekty sufitu/podłogi i odpowiednio dostosuj poziom trudności zadania. Podobnie, ważne jest, aby zaprojektować zagrożenie manipulacją wstrząsem w taki sposób, aby możliwe było obserwowanie APS w warunkach niskiego obciążenia poznawczego. Jeśli testy pilotażowe nie wykazują różnic w przerażeniu w warunkach niskiego obciążenia poznawczego, spróbuj sprawdzić stosunek sygnału do szumu w kanale EMG.
Istnieją 3 kluczowe kroki do zapewnienia skuteczności tego protokołu. Po pierwsze, ważne jest, aby upewnić się, że podmiot rozumie realizowane zadanie poznawcze. Jeśli to konieczne, zaprojektuj ćwiczebną wersję zadania, aby upewnić się, że badani rozumieją instrukcje. Po drugie, ważne jest, aby upewnić się, że stosowana stymulacja elektryczna ma wystarczającą intensywność, aby wywołać niepokój u pacjenta. W razie potrzeby należy ponownie skalibrować intensywność stymulacji elektrycznej po każdym biegu. Po trzecie, ważne jest, aby upewnić się, że stosunek sygnału do szumu w kanale EMG jest wystarczający do odzyskania akustycznej odpowiedzi zaskoczenia. Jeśli kanał jest głośny lub impedancja jest zbyt wysoka, dokładnie oczyść skórę pod okiem i ponownie przyłóż elektrody EMG.
Chociaż paradygmat ten ma wiele mocnych stron, istnieją również ograniczenia, którymi należy się zająć. Na przykład zastosowanie awersyjnego porażenia prądem elektrycznym może budzić zaniepokojenie wśród niektórych IRB, zwłaszcza gdy mamy do czynienia z wrażliwymi populacjami. Należy zauważyć, że istnieją alternatywne podejścia do wywoływania lęku poza użyciem wstrząsu elektrycznego. Należą do nich: wdychanie podwyższonego poziomu CO2 (7,5%) przez dłuższy czas (8-20 minut)34, stosowanie groźby awersyjnego bodźca termicznego35, prezentowanie obrazów o negatywnej wartościowości36 itp. Należy jednak zauważyć, że bodźce elektryczne są bezpieczne (jeśli są stosowane prawidłowo), szeroko stosowane i skuteczne. Chociaż protokół ten zaleca podejście standaryzacyjne do analizy wzmocnionego zaskoczenia, surowe wyniki mogą być bardziej wiarygodne w niektórych przypadkach 9,10. Jeśli stosowane są wyniki standaryzowane, zaleca się również zbadanie wyników surowych.
Siłą tego protokołu jest to, że pozwala badaczowi elastycznie manipulować stanem lęku u pacjenta podczas jednej sesji i przetestować związek między lękiem a określonymi procesami poznawczymi. Istnieją trzy potencjalne przyszłe zastosowania tego protokołu. Po pierwsze, ważne jest zrozumienie, w jaki sposób systemy poznawcze i emocjonalne oddziałują na siebie na poziomie procesów neuronalnych. Przyszłe badania powinny zbadać związek między lękiem a aktywnością neuronalną związaną z utrzymaniem WM, wykorzystując ten paradygmat podczas rejestrowania aktywności BOLD. Po drugie, ważne jest, aby uogólnić te odkrycia na inne procesy poznawcze, takie jak trwała uwaga i przetwarzanie nagrody. Przyszłe badania z wykorzystaniem tego protokołu powinny manipulować tymi procesami w okresach zagrożenia i bezpieczeństwa. Po trzecie, ważne jest, aby zrozumieć związek między funkcjami poznawczymi a lękiem, zarówno u osób zdrowych, jak i w populacjach pacjentów. Przyszłe badania z wykorzystaniem tego protokołu powinny obejmować osoby z tych szczególnych populacji.
Podsumowując, w pracy przedstawiono protokół badania związku między obciążeniem WM a indukowanym lękiem. Badania wykorzystujące ten paradygmat wykazały, że utrzymanie WM jest wystarczające do zmniejszenia lęku, ale lęk nie koliduje z samym obciążeniem WM. Chociaż przedstawione tutaj wyniki są specyficzne dla paradygmatu WM Sternberga, protokół ten można dostosować do badania dwukierunkowego związku między poznaniem a lękiem w ogóle.
Autorzy nie zgłaszają konfliktu interesów.
Wsparcie finansowe dla tego badania zostało zapewnione przez Intramural Research Program of the National Institute of Mental Health, ZIAMH002798 (ClinicalTrial.gov Identyfikator: NCT00026559: Identyfikator protokołu 01-M-0185).
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Biopac System | |||
| System | Biopac Systems Inc. | MP150 | 1, Integracja TTL sprzętu do monitorowania psychofizjologii |
| Biopac Systems Inc. | STP100C | 1 | |
| EDA | Biopac Systems Inc. | EDA100C | 1 |
| EKG | Biopac Systems Inc. | ECG100C | 1 |
| EMG | Biopac Systems Inc. | EMG100C | 1 |
| Nazwa | Firma | >Numer katalogowy | Komentarze |
| Other Equipment | |||
| Breakout box | Zobacz alternatywy | Niestandardowy | |
| 1 generator sygnału trawy | Instrumenty do trawy | SD9 | 1 |
| Urządzenie wstrząsowe | Digitimer North America, LLC | DS7A | 1 |
| Nazwa | Firma< | silny>Numer katalogowy | Komentarze |
| Alternatywy | |||
| Alternatywa dla Breakout box | Cortech Solutions | SD-MS-TCPBNC | 1 |
| Alternatywny generator sygnału trawiastego | Digitimer North America, LLC | DG2A | 1 |
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
| Sprzęt audio | |||
| Słuchawki | Sennheiser Electronic GMBH & CO | HD-280 | 1 |
| Wzmacniacz słuchawkowy | Stosowane badania i technologia | AMP4 | 1 |
| Miernik poziomu ciśnienia akustycznego | Hisgadget Inc | MS10 | 1 |
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
| >Elektrody i Prowadzi z Biopac | |||
| EMG | Biopac Systems Inc. | EL254S | 2 |
| naklejki EMG | Biopac Systems Inc. | ADD204 | |
| 2 Żel dla EMG | Biopac Systems Inc. | GEL100 | 1 |
| EKG | Biopac Systems Inc. | LEAD110 | 2 |
| Shock | Biopac Systems Inc. | LEAD110 | 2 |
| EKG | Biopac Systems Inc. | LEAD110S-W | 1 |
| EKG | Biopac Systems Inc. | LEAD110S-R | 1 |
| Elektrody jednorazowe | Biopac Systems Inc. | EL508 | 6 |
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
| Software | |||
| Presentation | Systemy neurobehawioralne | Wersja 18 | Określane tutaj jako oprogramowanie eksperymentalne |
| Potwierdzaj | Biopac Systems Inc. | Wersja 4.2 | Określana tutaj jako oprogramowanie do analizy psychofizjologicznej |