Artykuł metodologiczny

Analiza oddechu w czasie rzeczywistym przy użyciu wtórnej jonizacji nanoelektronizacyjnej sprzężonej ze spektrometrią mas o wysokiej rozdzielczości

DOI:

10.3791/56465

9 marca 2018

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pokazano protokół charakteryzujący skład chemiczny wydychanego powietrza w czasie rzeczywistym za pomocą wtórnej jonizacji nanoelectrospray sprzężonej ze spektrometrią mas o wysokiej rozdzielczości.

Streszczenie

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wydychane lotne związki organiczne (LZO) wzbudziły spore zainteresowanie, ponieważ mogą służyć jako biomarkery do diagnozowania chorób i ekspozycji środowiskowej w nieinwazyjny sposób. W niniejszej pracy przedstawiamy protokół charakteryzujący wydychane LZO w czasie rzeczywistym za pomocą wtórnej jonizacji nanoelektronatrysku sprzężonej ze spektrometrią mas o wysokiej rozdzielczości (Sec-nanoESI-HRMS). Domowe źródło Sec-nanoESI zostało z łatwością skonfigurowane w oparciu o komercyjne źródło nanoESI. Zaobserwowano setki pików w odjętych od tła widmach masowych wydychanego powietrza, a wartości dokładności masy wynoszą -4,0-13,5 ppm i -20,3-1,3 ppm odpowiednio w trybach wykrywania jonów dodatnich i ujemnych. Pikom przypisano dokładny skład pierwiastkowy zgodnie z dokładnym wzorcem masy i izotopowym. Na jeden pomiar wydechu wykorzystuje się mniej niż 30 s, a sześć powtórzonych pomiarów zajmuje około 7 minut.

Wprowadzenie

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dzięki szybkiemu rozwojowi nowoczesnych technik analitycznych, setki lotnych związków organicznych (LZO) zostały zidentyfikowane w ludzkim oddechu wydychanym przez człowieka1. Te LZO pochodzą głównie z powietrza pęcherzykowego (~350 ml dla zdrowej osoby dorosłej) i anatomicznego powietrza z martwej przestrzeni (~150 ml)2, na które wpływa metabolizm organizmu3,4,5,6,7,8 i zanieczyszczenie środowiska9odpowiednio. W rezultacie, jeśli zostaną zidentyfikowane, LZO mogą być wykorzystywane jako biomarkery do diagnozowania chorób i narażenia środowiskowego w sposób nieinwazyjny.

Chociaż spektrometria mas chromatografii gazowej (GC-MS) jest najczęściej używaną techniką do jakościowej i ilościowej analizy wydychanych LZO2, bezpośrednie techniki MS, które zostały opracowane do analizy oddechu w czasie rzeczywistym, mają zalety wysokiej rozdzielczości czasowej i prostego wstępnego przygotowania próbki. Techniki bezpośredniego MS, takie jak reakcja transferu protonów MS (PTR-MS)10, wybrana rurka przepływu jonów MS (SIFT-MS)11, wtórna jonizacja elektroniczna MS (SESI-MS)12,13 (nazywana również ekstrakcyjną jonizacją elektrorozpylającą MS, EESI-MS14,15), śladowy analizator gazów atmosferycznych (TAGA)16 i jonizacja plazmy MS ( PI-MS)17 były badane w ostatnich latach.

Wśród wszystkich bezpośrednich technik MS, SESI jest dobrze znany jako uniwersalna technika miękkiej jonizacji19,20,21; a źródło można łatwo dostosować i połączyć z różnymi typami spektrometrów masowych, np. spektrometr masowy czasu przelotu8,15, spektrometr masowy pułapki jonowej14 oraz spektrometr masowy Orbitrap12,18. Do tej pory SESI-MS był z powodzeniem stosowany w diagnostyce chorób układu oddechowego22, pomiarze rytmu okołodobowego3,6,23, farmakokinetyka7,8, oraz odkrywanie szlaków metabolicznych4, itd. Ostatnio dostępne stało się komercyjne źródło SESI.

W tym badaniu, stworzono łatwe i kompaktowe źródło wtórnej jonizacji nanoelektronorozpylania (Sec-nanoESI) i sprzężono je ze spektrometrem masowym o wysokiej rozdzielczości. Przedstawiono pomiary w czasie rzeczywistym wydychanych LZO w wydychanym powietrzu.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Uwaga: Proszę zapoznać się ze wszystkimi odpowiednimi kartami charakterystyki substancji niebezpiecznej (MSDS) przed użyciem. Należy używać odpowiednich środków ochrony osobistej, np. fartucha laboratoryjnego, rękawic, okularów, długich spodni i butów z zakrytymi palcami).

1. Konfiguracja źródła Sec-nanoESI

  1. Ustaw źródło Sec-nanoESI zgodnie z procesem SESI, tj. gaz oddechowy jest wprowadzany do przecięcia pióropusza elektrorozpylonego i jonizowany przez naładowane kropelki (Rysunek 1). Źródła wbudowane w poszczególne laboratoria zależą od interfejsu używanego spektrometru masowego24,25. W tym miejscu należy skonfigurować źródło Sec-nanoESI w oparciu o komercyjne źródło nanoESI (Rysunek 2) i zaimplementować do stacjonarnego kwadrupolowego spektrometru mas orbitrap.
    UWAGA: Głównym korpusem źródła jest sześcienna komora ze stali nierdzewnej (długość 25 mm, średnica wewnętrzna 13 mm) (Rysunek 2b) z wlotem (ID 4 mm) do wprowadzenia kapilary nanoESI do komory. Stąd komora nie jest całkowicie szczelna (Rysunek 2b).
  2. Zamontuj dwie rurki ze stali nierdzewnej (długość 8 mm, średnica zewnętrzna 5 mm, średnica wewnętrzna 3 mm) po każdej stronie komory w celu dostarczania gazu.
  3. Wyposaż się w dwa okienka kwarcowe (średnica wewnętrzna 14 mm) na górze i na dole komory, aby sprawdzić położenie końcówki kapilary nanoESI i sprayu nanoESI za pomocą oczu lub mikroskopu cyfrowego.
  4. Przyspawać komorę do stożka przemiatania spektrometru mas.
    UWAGA: Konstrukcja może ulec zmianie w zależności od konkretnej geometrii interfejsu ciśnienia atmosferycznego spektrometru masowego używanego w poszczególnych laboratoriach.

2. Optymalizacja instrumentów

  1. Skalibruj spektrometr mas zarówno w trybie wykrywania jonów dodatnich, jak i ujemnych zgodnie z instrukcjami producenta. Stosując kalibrację, parametry spektrometru masowego, takie jak potencjały soczewek i warunki detekcji, są optymalizowane w celu zapewnienia dobrej czułości i kształtu piku przy określonej wartości rozdzielczości. Używana jest tutaj rozdzielczość masy 70000.
    1. Należy wykonać pełne kalibracje Q Exactive przy użyciu komercyjnego źródła ESI, jednak wzorcowanie masy można przeprowadzić z dowolnymi kompatybilnymi źródłami, w tym z dostosowanymi źródłami.
  2. Ustawić temperaturę rurki jonowej (ITT) spektrometru mas > 100 °C. Chociaż najwyższą temperaturę można ustawić na 350 °C, może to spowodować rozkład niektórych związków. Dlatego w tym eksperymencie stosuje się 150°C.
    UWAGA: W przypadku spektrometrów masowych wyposażonych w kryzę do pobierania próbek zamiast ITT, temperaturę kryzy do pobierania próbek ustawia się > 100 °C.
  3. Dla rozpuszczalnika ESI i natężenia przepływu należy wybrać odpowiedni rozpuszczalnik ESI na podstawie właściwości rozpuszczalnika (np. polarności i lotności) oraz docelowych związków (np. powinowactwa do protonów). Mieszanina wody i metanolu w różnych proporcjach była powszechnie stosowana jako rozpuszczalnik ESI25. W tym eksperymencie użyj wody zawierającej 0,1% (v/v) kwas mrówkowy, w celu uzyskania wysokiej wydajności jonizacji odnotowano ten rozpuszczalnik13,19,23. Ustawić natężenie przepływu rozpuszczalnika ESI w zakresie 0-1,5 μl/min i 200 nL/min.
    UWAGA: Przed użyciem odgazuj rozpuszczalnik ESI przez 30 minut.
  4. Zoptymalizuj parametry źródła Sec-nanoESI, głównie napięcie nanoESI i położenie końcówki kapilarnej nanoESI. Napięcie zwykle waha się od 2,0 do 4,5 kV. Użyj tutaj 2,5 kV.
    UWAGA: Wraz ze wzrostem natężenia przepływu stosowane jest wyższe napięcie ESI. Odległość między końcówką a otworem spektrometru mas można regulować w zakresie od 1 do 5 mm. Po optymalizacji znormalizowany poziom intensywności (NL) obserwowany w widmie masowym powinien wynosić > 1x106, a zmienność chromatogramu jonów całkowitych (TIC) powinna wynosić < 10% zarówno w trybie wykrywania jonów dodatnich, jak i ujemnych. Widmo mas i TIC uzyskuje się w zakresie mas m/z 50-750.
  5. Nałóż czysty gaz na źródło. Jest to opcjonalny krok, mający na celu zmniejszenie wpływu lotnych związków organicznych z powietrza w pomieszczeniach. Można stosować azot gazowy o wysokiej czystości (N2, 99,99%) lub czyste powietrze. Przy obecności czystego gazu, NL obserwowany w widmie masowym powinien wynosić > 1x105, a zmiana TIC powinna wynosić < 10% zarówno w trybie wykrywania jonów dodatnich, jak i ujemnych. Stosowany jest tu azotN 2 o wysokiej czystości, który jest dostarczany w ilości 0,8 l/min.
    UWAGA: Całkowite natężenie przepływu czystego gazu i gazu oddechowego powinno być wyższe niż natężenie przepływu przez otwór spektrometru masowego.

3. Pomiar wydychanego powietrza

  1. Wdychaj powietrze w pomieszczeniu i wykonaj normalny wydech, aby wydychać całe powietrze z płuc ze stałą szybkością przepływu. Monitoruj natężenie przepływu wydechu za pomocą manometru lub przepływomierza widocznego dla obiektu. Użyj rurki teflonowej (PTFE), aby dostarczyć oddech gas23.
    1. Aby zapobiec kondensacji pary wodnej wewnątrz rurki, podgrzej rurkę do temperatury 80-100 oC7,23,27 lub użyj suszarki Nafion28,29. W tym eksperymencie badany wydychał powietrze z prędkością 0,4 l/min kontrolowaną przez przepływomierz.
    2. Podłącz wlot przepływomierza do rurki Nafion (długość 60 cm), aby usunąć parę wodną z wydychanego powietrza i podłącz wylot przepływomierza do rurki PTFE (długość 13 cm, średnica wewnętrzna 4 mm). Jeden pomiar wydechu zajmuje < 30 s.
    3. Wykonaj 4-6 powtórzonych pomiarów28,29.
    4. Aby zminimalizować efekty zakłócające, poproś uczestników, aby nie jedli, nie pili i nie myli zębów co najmniej 30 minut przed pomiarami23.
      UWAGA: Aby zminimalizować wpływ LZO z powietrza w pomieszczeniach, doniesiono, że wdycha czysty gaz zamiast powietrza w pomieszczeniach26. Gdy używana jest rurka Nafion, niektóre związki polarne mogą zostać utracone.
    5. Podczas pomiaru sprawdzaj, czy intensywność jonów przekracza liniową granicę wykrywalności przyrządu, czy nie. Nasycenie sygnału może prowadzić do piku artefaktu, który w praktyce nie wynika ze związku w próbce. Wdychanie przez nos usunęłoby część otaczających LZO i cząstek; Warto jednak zauważyć, że można również wykryć związki w przewodach nosowych.

4. Uzyskaj odcisk palca oddechu i ślad czasowy związku

  1. Uzyskać chromatogramy i widma masowe. Używaj oprogramowania (np. Xcalibur) do rejestrowania chromatogramów i widm masowych. Ponieważ jest to bezpośrednia analiza MS i nie jest wykonywana separacja chromatograficzna, chromatogram jonów całkowitych (TIC) w rzeczywistości wskazuje ślad czasowy wszystkich sygnałów wykrytych w widmach masowych, a chromatogram jonowy wyekstrahowany (EIC) pokazuje ślad czasowy określonego związku.
    UWAGA: W przypadku innych komercyjnych spektrometrów masowych chromatogramy i widma masowe można uzyskać za pomocą odpowiedniego oprogramowania do akwizycji danych.
  2. Uzyskaj odcisk palca wydychanego powietrza, wybierając liczbę skanów w TIC, gdy mierzony jest wydychany oddech. Uzyskaj widmo masowe reprezentujące średnią z tych skanów przez oprogramowanie.
    1. Aby wyeliminować piki tła z odcisku palca oddechu, użyj narzędzia Odejmij tło w oprogramowaniu. Proszę zapoznać się z instrukcją obsługi dostarczoną przez producenta. Krótko mówiąc, wybierz taką samą liczbę skanów, gdy nie zostanie wprowadzona próbka oddechu, i odejmij widmo masy tła od odcisku palca oddechu.
      UWAGA: W tej metodzie próg identyfikacji cech odcisku palca oddechu jest definiowany jako trzykrotność odchylenia standardowego sygnału tła. W przypadku innych komercyjnych spektrometrów masowych odejmowanie tła można wykonać za pomocą odpowiedniego oprogramowania do akwizycji danych.
  3. Uzyskaj ślad czasowy określonego związku. Wybierz pik docelowego związku w odcisku palca oddechu, a następnie oprogramowanie uzyska ślad czasowy związku.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Rysunek 3 pokazuje odciski palców oddechu w zakresie masowym m/z 50-750 zarejestrowane zarówno w trybie wykrywania jonów dodatnich, jak i ujemnych. Zaobserwowano 291 pików (intensywność piku > 5,0x104) i 173 piki (intensywność szczytu > 3,0x104) w odjętych od tła odciskach palców oddechu odpowiednio w trybach wykrywania jonów dodatnich i ujemnych. Aby zidentyfikować piki w widmach masowych, zapoznaj się z wcześniejszymi pu...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Konstruując źródło Sec-nanoESI w oparciu o komercyjne źródło nanoESI, wydajność jonizacji jest wyższa niż w przypadku korzystania ze źródła ESI30. Ponadto wydajność jonizacji jest dodatkowo poprawiona w zamkniętej komorze, ponieważ izoluje proces od otaczającego powietrza tła, a jednocześnie ułatwia mieszanie próbki gazu z pióropuszem rozpylonej cieczy. Dzięki zastosowaniu Sec-nanoESI należy zoptymalizować mniej parametrów w porównaniu ze źródłem ESI, co ułatwia instalację, aplikację i konserwację...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ta praca została finansowo wsparta przez Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Chin (nr 91543117).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Woda ultraczystaMerck Millipore, USAMPGP04001Odporność >18,2 MΩ &środkowa kropka; cm
Kwas mrówkowySigma-Aldrich, USAF0507Działa żrąco na drogi oddechowe.
Gaz azotuGuangzhou Shiyuan Gas Co. Ltd., ChinyN.A.aCzystość >99,99%
Q Eksaktywny hybrydowy spektrometr masowy kwadrupolowo-orbitrapowyThermo Scientific, USA02634L(S/N)Uważaj na źródło NanoESI o wysokim napięciu i wysokiej temperaturze
Thermo Scientific, USAES002373(S/N); ES071(P/N)Uważaj na wysokonapięciową i wysokotemperaturową
pompę Nano LCThermo Scientific, USA5041.0010A(P/N)/
Xcalibur software (wersja 3.0)Thermo Scientific, USABRE0008596/
Dino-Lite Digital MicroscopeTech Video System (SuZhou) Co.Ltd., ChinyCQ401833R(S/N)/
Nafion rurkiPerma Pure LLC, USAME60/
Rurka PTFE (ID 4 mm)Dongguan Hongfu Insulation Material Co., Ltd., Chiny, N.A.Uważaj na możliwą utratę związków polarnych
Regulator przepływu masowegoLine-Tech, KoreaM15122007 (S / N)/
PrzepływomierzYuyao Industrial Automation Meter Factory, Chiny40784/
a< / sup> NA: niedostępny.

Bibliografia

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. De Lacy Costello, B., et al. A review of the volatiles from the healthy human body. J. Breath Res. 8 (1), 014001-014030 (2014).
  2. Phillips, M., Greenberg, J. Ion-trap detection of volatile organic compounds in alveolar breath. Clin. Chem. 38 (1), 60-65 (1992).
  3. Martínez-Lozano Sinues, P., et al. Circadian variation of the human metabolome captured by real-time breath analysis. PLoS One. 9 (12), 0114422-0114438 (2014).
  4. Garcia-Gomez, D., et al. Secondary electrospray ionization coupled to high-resolution mass spectrometry reveals tryptophan pathway metabolites in exhaled human breath. Chem. Common. 52 (55), 8526-8528 (2016).
  5. Garcia-Gomez, D., et al. Real-time quantification of amino acids in the exhalome by secondary electrospray ionization-mass spectrometry: A proof-of-principle Study. Clin. Chem. 62 (9), 1230-1237 (2016).
  6. Martínez-Lozano Sinues, P., Kohler, M., Brown, S. A., Zenobia, R., Dallmann, R. Gauging circadian variation in ketamine metabolism by real-time breath analysis. Chem. Common. 53 (14), 2264-2267 (2017).
  7. Gamez, G., et al. Real-time, in vivo monitoring and pharmacokinetics of valproic acid via a novel biomarker in exhaled breath. Chem. Common. 47 (17), 4884-4886 (2011).
  8. Li, X., et al. Drug pharmacokinetics determined by real-time analysis of mouse breath. Angew. Chem. Int. Ed. 54 (27), 7815-7818 (2015).
  9. Amorim, L. L. A., Cardeal, Z. L. Breath air analysis and its use as a biomarker in biological monitoring of occupational and environmental exposure to chemical agents. J. Chromatogr. B. 853 (1-2), 1-9 (2007).
  10. Bajtarevic, A., et al. Noninvasive detection of lung cancer by analysis of exhaled breath. BMC Cancer. 9, 348(2009).
  11. Smith, D., Wang, T. S., Pysanenko, A., Španěl, P. A selected ion flow tube mass spectrometry study of ammonia in mouth- and nose-exhaled breath and in the oral cavity. Rapid Commun. Mass Spectrom. 22 (6), 783-789 (2008).
  12. Li, X., Huang, L., Zhu, H., Zhou, Z. Direct human breath analysis by secondary nano-electrospray ionization ultrahigh resolution mass spectrometry: Importance of high mass resolution and mass accuracy. Rapid Commun. Mass Spectrom. 31 (3), 301-308 (2017).
  13. Martínez-Lozano, P., Fernandez de la Mora, J. Electrospray ionization of volatiles in breath. Int. J. Mass Spectrom. 265 (1), 68-72 (2007).
  14. Zeng, Q., et al. Detection of creatinine in exhaled breath of humans with chronic kidney disease by extractive electrospray ionization mass spectrometry. J. Breath Res. 10 (1), 016008-016015 (2016).
  15. Chen, H. W., Wortmann, A., Zhang, W. H., Zenobi, R. Rapid in vivo fingerprinting of nonvolatile compounds in breath by extractive electrospray ionization quadrupole time-of-flight mass spectrometry. Angew. Chem. Int. Ed. 46 (4), 580-583 (2007).
  16. Benoi, F. M., Davldson, W. R., Lovett, A. M., Nacson, S., Ngo, A. Breath analysis by atmospheric pressure ionization mass spectrometry. Anal. Chem. 55 (4), 805-807 (1983).
  17. Bregy, L., Martínez-Lozano Sinues, P., Nudnova, M. M., Zenobi, R. Real-time breath analysis with active capillary plasma ionization-ambient mass spectrometry. J. Breath Res. 8 (2), 027102-027110 (2014).
  18. Gaugg, M. T., et al. Expanding metabolite coverage of real-time breath analysis by coupling a universal secondary electrospray ionization source and high resolution mass spectrometry-a pilot study on tobacco smokers. J. Breath Res. 10 (1), 016010-016020 (2016).
  19. Martínez-Lozano, P., Zingaro, L., Finiguerra, A., Cristoni, S. Secondary electrospray ionization-mass spectrometry: breath study on a control group. J. Breath Res. 5 (1), 016002-016012 (2011).
  20. Martínez-Lozano Sinues, P., Zenobi, R., Kohler, M. Analysis of the exhalome a diagnostic tool of the future. Chest. 144 (3), 746-749 (2013).
  21. Martínez-Lozano Sinues, P., Fernandez de la Mora, J. Direct analysis of fatty acid vapors in breath by electrospray ionization and atmospheric pressure Ionization-Mass Spectrometry. Anal. Chem. 80 (21), 8210-8215 (2008).
  22. Martínez-Lozano Sinues, P., et al. Breath analysis in real time by mass spectrometry in chronic obstructive pulmonary disease. Respiration. 87 (4), 301-310 (2014).
  23. Martínez-Lozano Sinues, P., Kohler, M., Zenobi, R. Monitoring diurnal changes in exhaled human breath. Anal. Chem. 85 (1), 369-373 (2013).
  24. Chen, H. W., Zenobi, R. Neutral desorption sampling of biological surfaces for rapid chemical characterization by extractive electropray ionization mass spectrometry. Nat. Protoc. 3 (9), 1467-1475 (2008).
  25. Li, X., Hu, B., Ding, J., Chen, H. W. Rapid characterization of complex viscous samples at molecular levels by neutral desorption extractive electrospray ionization mass spectrometry. Nat. Protoc. 7 (6), 1010-1025 (2011).
  26. Gordon, S. M., Szidon, J. P., Krotoszynski, B. K., Gibbons, R. D., O'Neill, H. J. Volatile organic compounds in exhaled air from patients with lung cancer. Clin. Chem. 31 (8), 1278-1282 (1985).
  27. Ding, J. H., et al. Development of extractive electrospray ionization ion trap mass spectrometry in vivo breath analysis. Analyst. 134 (10), 2040-2050 (2009).
  28. Basum, G., Dahnke, H., Halmer, D., Hering, P., Mürtz, M. Online recording of ethane trances in human breath via infrared laser spectroscopy. J. Appl. Physiol. 95 (6), 2583-2590 (2003).
  29. Tøien, Ø Automated open flow respirometry in continuous and long-term measurements: design and principles. J. Appl. Physiol. 114 (8), 1094-1107 (2013).
  30. Huang, L., Li, X., Xu, M., Huang, Z. X., Zhou, Z. Identification of relatively high molecular weight compounds in human breath using secondary nano electrospray ionization ultrahigh resolution mass spectrometry. Chem. J. Chinese U. 38 (5), 752-757 (2017).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Lotne zwi zki organiczne w powietrzu wydychanymkalibracja spektrometrii mastemperatura rurki transferu jon wszybko przep ywu rozpuszczalnika ESIoptymalizacja napi cia nanoESIsystem podawania gazu z wydychanego powietrzapomiar dok adno ci masy

Powiązane artykuły