Kliniczny ręczny system obrazowania fotoakustycznego zostanie zademonstrowany do nieinwazyjnego obrazowania małych zwierząt w czasie rzeczywistym.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Kliniczny ręczny system obrazowania fotoakustycznego zostanie zademonstrowany do nieinwazyjnego obrazowania małych zwierząt w czasie rzeczywistym.
Przeniesienie obrazowania fotoakustycznego do praktyki klinicznej jest dużym wyzwaniem. Ręczne kliniczne systemy obrazowania fotoakustycznego w czasie rzeczywistym są bardzo rzadkie. W tym artykule przedstawiamy połączony fotoakustyczny i kliniczny system obrazowania ultrasonograficznego poprzez integrację sondy ultradźwiękowej z dostarczaniem światła do obrazowania małych zwierząt. Pokazujemy to, pokazując obrazowanie wartowniczych węzłów chłonnych u małych zwierząt wraz z minimalnie inwazyjnym prowadzeniem igły w czasie rzeczywistym. Kliniczna platforma ultrasonograficzna z dostępem do surowych danych kanałowych umożliwia integrację obrazowania fotoakustycznego, co prowadzi do powstania ręcznego klinicznego systemu obrazowania fotoakustycznego w czasie rzeczywistym. Błękit metylenowy użyto do obrazowania wartowniczych węzłów chłonnych o długości fali 675 nm. Dodatkowo pokazano prowadzenie igły z podwójnym modalnym obrazowaniem ultrasonograficznym i fotoakustycznym za pomocą systemu obrazowania. Obrazowanie głębi do 1,5 cm zademonstrowano za pomocą lasera 10 Hz przy częstotliwości odświeżania obrazu fotoakustycznego wynoszącej 5 klatek na sekundę.
Do wykrywania i oceny stopnia zaawansowania raka dostępne są różne techniki obrazowania. Niektóre z powszechnie stosowanych metod obrazowania to rezonans magnetyczny (MRI), rentgenowska tomografia komputerowa (CT), promieniowanie rentgenowskie, ultrasonografia (US), pozytonowa tomografia emisyjna (PET), obrazowanie fluorescencyjne itp.1,2,3,4. Jednak niektóre z istniejących technik obrazowania są albo inwazyjne, albo mają szkodliwe promieniowanie, albo są powolne, drogie, nieporęczne lub nieprzyjazne dla pacjentów. W związku z tym istnieje ciągła potrzeba opracowywania nowych, szybkich i opłacalnych technik obrazowania w diagnostyce i terapii5.
Obrazowanie fotoakustyczne (PAI) to nowa technika obrazowania, która łączy bogaty kontrast optyczny z wysoką rozdzielczością ultradźwiękową przy większej głębokości obrazowania5,6,7,8,9. W PAI do naświetlania tkanek stosuje się krótki impuls laserowy. Światło zostaje pochłonięte przez tkankę, co prowadzi do niewielkiego wzrostu temperatury. Ze względu na rozszerzalność termoelastyczną w tkance generowane są fale ciśnienia (w postaci fal akustycznych). Generowane fale akustyczne (znane również jako fale fotoakustyczne (PA)) są pozyskiwane za pomocą szerokopasmowego przetwornika ultradźwiękowego (UST) poza granicą tkanki. Te pozyskane sygnały PA można wykorzystać do rekonstrukcji obrazów PA, ujawniając informacje strukturalne i funkcjonalne wewnątrz tkanki. PAI ma szeroki wachlarz zastosowań, w tym: obrazowanie naczyń krwionośnych, obrazowanie wartowniczych węzłów chłonnych, obrazowanie naczyń krwionośnych mózgu, obrazowanie guza, obrazowanie molekularne itp.10,11,12,13,14,15 PAI ma wiele zastosowań ze względu na swoje zalety, a mianowicie: większą głębokość penetracji, dobrą rozdzielczość przestrzenną i wysoki kontrast tkanek miękkich. Kontrast w PAI może być endogenny od krwi, melaniny itp. Gdy kontrast endogenny nie jest wystarczająco silny, egzogenne środki kontrastowe, takie jak barwniki organiczne, nanocząsteczki, kropki kwantowe itp.16,17,18,19,20,21 mogą być użyte do poprawy kontrastu.
Chociaż PAI ma wiele zalet w porównaniu z innymi technikami obrazowania, translacja kliniczna jest nadal bardzo dużym wyzwaniem. Głównymi ograniczeniami są nieporęczny charakter używanych laserów, większość UST używanych do pozyskiwania danych nie jest kompatybilna z klinicznymi systemami amerykańskimi oraz brak dostępności dostępnych na rynku amerykańskich systemów obrazowania klinicznego, które dają dostęp do surowych danych kanałowych. Dopiero od niedawna dostępne są komercyjne amerykańskie maszyny kliniczne z dostępem do surowych danych22. W tej pracy staramy się zademonstrować wykonalność PAI za pomocą ręcznej konfiguracji przy użyciu klinicznej platformy amerykańskiej. Naszym celem jest pokazanie tego poprzez pokazanie nieinwazyjnego obrazowania wartowniczych węzłów chłonnych (SLN) w modelu małego zwierzęcia.
Inwazyjne nowotwory piersi są jedną z głównych przyczyn zgonów z powodu raka wśród kobiet. Wczesne rozpoznanie i ocena stopnia zaawansowania raka piersi ma kluczowe znaczenie dla podjęcia decyzji o strategiach leczenia, które odgrywają ważną rolę w rokowaniu pacjentki. Do oceny stopnia zaawansowania raka piersi zwykle stosuje się biopsje węzłów wartowniczych wartowniczych (SLNB)23,24. SLN jest pierwotnym węzłem chłonnym, w którym możliwość znalezienia komórek rakowych jest największa ze względu na przerzuty. SLNB polegają na wstrzyknięciu barwnika lub radioaktywnego znacznika, a następnie rozcięciu obszaru za pomocą małego nacięcia, a następnie wizualnym zlokalizowaniu SLN w przypadku barwników lub za pomocą licznika Geigera, w przypadku radioaktywnego znacznika. Po zidentyfikowaniu kilka SLN jest usuwanych do badań histopatologicznych24,25. Dodatni SLNB wskazuje, że guz dał przerzuty do pobliskich węzłów chłonnych i być może do innych narządów. Ujemny SLNB oznacza, że prawdopodobieństwo przerzutów jest znikome26. SLNB wiąże się z licznymi powikłaniami, takimi jak drętwienie ramienia, obrzęk limfatyczny itp.27 Aby wyeliminować powikłania związane z SLNB, potrzebna jest nieinwazyjna technika obrazowania.
Dla mapowania SLN u małych zwierząt i ludzi, obrazowanie PA zostało szeroko zbadane przy pomocy różnych środków kontrastowych15,28,29,30,31,32. Jednak obecnie stosowane systemy nie mogą być stosowane w scenariuszu klinicznym, jak wskazano wcześniej. Kolejnym problemem, którym należy się zająć, jest procedura chirurgiczna związana z SLNB28. Konieczne było dostosowanie minimalnie inwazyjnych procedur do biopsji aspiracyjnej cienkoigłowej (FNAB), aby skrócić czas rekonwalescencji i zmniejszyć skutki uboczne pacjentów. W niniejszej pracy wykorzystano kliniczny system USG do połączonego obrazowania US i PA. Aby ułatwić użytkowanie w warunkach klinicznych, zaprojektowano niestandardowy uchwyt ręczny do obudowy światłowodu i UST. Błękit metylenowy (MB) został wykorzystany do identyfikacji i mapowania SLN. Dodatkowo, w celu wyeliminowania powikłań związanych z operacją SLNB, zademonstrowano również nieinwazyjne śledzenie igły w czasie rzeczywistym.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wszystkie eksperymenty na zwierzętach zostały przeprowadzone zgodnie z zatwierdzonymi wytycznymi i przepisami przez instytucjonalny komitet ds. opieki i użytkowania zwierząt Uniwersytetu Technologicznego Nanyang w Singapurze (numer protokołu dla zwierząt ARF-SBS/NIE-A0263).
1. Ręczny system obrazowania klinicznego PA i US w czasie rzeczywistym
2. Charakterystyka rozdzielczości
3. Przygotowanie zwierząt do obrazowania SLN
UWAGA: Opisany powyżej ręczny system obrazowania klinicznego został zademonstrowany do obrazowania SLN małych zwierząt. Do eksperymentów pozyskano 6- do 8 tygodniowych zdrowych samic szczurów (NTac:Sprague Dawley, 220 ± 30 g). Samice szczurów są używane, ponieważ występowanie raka piersi u samców szczurów jest rzadsze. Jednak samce szczurów mogą być również wykorzystywane do badań. Ponadto w literaturze samice szczurów są szerzej stosowane do obrazowania SLN.
4. Obrazowanie in vivo SLN szczurów
5. Spektroskopia PA SLN
6. Śledzenie igieł w czasie rzeczywistym za pomocą PAI
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Rysunek 1: Opis systemu. (a) Schematyczna reprezentacja systemu PAI z klinicznym systemem US o trybie dualnym. OPO – oscylator parametryczny, OF – wiązka włókien optycznych, FH – uchwyt włókna, USM – kliniczna maszyna US. Uchwyt włókna...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Obecnie koszty badań przesiewowych, diagnozy i leczenia nowotworów są bardzo wysokie. Istnieją różne metody obrazowania, które są stosowane w badaniach przesiewowych i diagnostyce raka. Jednak wiele z tych technik obrazowania ma ograniczenia, takie jak nieporęczny rozmiar urządzenia, inwazyjna diagnoza, nieprzyjazność dla pacjentów, zbyt drogie, wymóg promieniowania jonizującego lub stosowanie radioaktywnych środków kontrastowych. Dlatego bardzo potrzebny jest wydajny, ekonomiczny system obrazowania i prowadzenia w czasi...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Autorzy nie mają żadnych istotnych interesów finansowych w manuskrypcie ani żadnych innych potencjalnych konfliktów interesów, które mogliby ujawnić.
Autorzy chcieliby podziękować za wsparcie finansowe z grantu badawczego Tier 1 ufundowanego przez Ministerstwo Edukacji w Singapurze (RG48/16: M4011617) oraz grantu badawczego Tier 2 finansowanego przez Ministerstwo Edukacji w Singapurze (ARC2/15: M4020238). Autorzy pragną podziękować dr Rhonnie Austria Dienzo za jego pomoc w obchodzeniu się ze zwierzętami.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Laser Nd:YAG z przełączaniem Q | Continuum | Surelite Laser pompy | |
| Optyczny oscylator parametryczny | Laser Continuum | OPO | |
| Kliniczny system obrazowania ultrasonograficznego | Alpinion | E-CUBE 12R | Dwumodalny system obrazowania ultrasonograficznego i fotoakustycznego |
| Liniowy przetwornik ultradźwiękowy | Alpinion | L3-12 | 128-elementowy przetwornik liniowy o częstotliwości środkowej 8,5 MHz, ułamkowa szerokość pasma 95%, |
| rozwidlone światłowód | CeramOptec | Wykonane na zamówienie | Do sprzężenia światła z lasera do ręcznego uchwytu światłowodu |
| Obiektyw | Thorlabs | LB1869 | Skupienie światła z lasera na światłowodzie |
| Żel ultradźwiękowy | Progress/parker acquasonic gel | PA-GEL-CLEA-5000 | Sprzęgło akustyczne |
| Oprogramowanie do przetwarzania obrazu | Mathworks | Matlab | Domowy program przy użyciu Matlab |
| Anesthetic Machine | medical plus pte ltd | Aparat do znieczulenia bez oddychania z koncentratorem tlenu. | Dostarcza tlen i izofluran zwierzętom |
| Pulsoksymetr przenośny | Medtronic | PM10N z czujnikiem weterynaryjnym | Monitoruje pulsoksymetrię zwierzęcia |
| Dystrybutor zwierząt | In Vivos Pte Ltd, Singapur | Dystrybutor zwierząt, który dostarcza małe zwierzęta do celów badawczych. | |
| Maska oddechowa | Wykonana | Używana wraz z uchwytem na zwierzę do dostarczania mieszaniny znieczulającej do tkanki | |
| piersi kurczaka | zwierzęcia Pasar | Służy do dodawania głębi w celu naśladowania scenariusza obrazowania człowieka | |
| Igła 23G | BD Precisionglide | 23G, 1 i pół cala | Służy do prowadzenia igły w czasie rzeczywistym |
| Uchwyt do światłowodowego | Wykonane | na zamówienieAby przytrzymać końcówkę wejściową rozwidlonego | |
| Sonda ręczna | Wykonane na zamówienie drukowane | Z dwoma gniazdami na dwa końce wyjściowe światłowodu i jednym gniazdem na przetwornik ultradźwiękowy | |
| Błękit metylenowy (10 mg / mL) | Sterop | Środek kontrastowy do obrazowania PA | |
| Oprogramowanie do strojenia laserowego | Surelite OPO PLUS | SLOPO | Oprogramowanie do dostrajania długości fali lasera OPO |
| Fotodioda | Thorlabs | SP05/M | Do wykrywania impulsu laserowego w celu wyzwolenia systemu ultradźwiękowego |
| Moduł polaryzacji fotodiody | Thorlabs | PBM42 | Do wzmacniania sygnału fotodiody do sygnału ultrasonograficznego tygrysa |
| Krem do depilacji | Reckitt Benckiser | Veet | Służy do usuwania włosów z obszaru obrazowania |
| Miernik mocy lasera | Ophir | Starlite, p/n: 7Z01565 | Służy do pomiaru mocy lasera |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.