Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Szczurzy model ortotopowego przeszczepu wątroby z wykorzystaniem nowatorskiej techniki zespolenia magnetycznego do rekonstrukcji żyły głównej nadwątrobowej

10K wyświetleń

DOI:

10.3791/56933

19 marca 2018

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

Rekonstrukcja żyły głównej nadwątrobowej (SHVC) pozostaje trudnym krokiem w ortotopowym przeszczepie wątroby u szczurów. W tym artykule przedstawiamy krok po kroku protokół rekonstrukcji SHVC u szczurów przy użyciu nowatorskiej techniki zespolenia magnetycznego.

Streszczenie

Szczurzy model ortotopowego przeszczepu wątroby (OLT) jest niezbędny do badań nad przeszczepami. Jest to bardzo wyrafinowany model zwierzęcy i wymaga stromej krzywej uczenia się. Wprowadzenie techniki mankietowej do zespolenia żyły wrotnej (PV) i żyły podwątrobowej (IHVC) znacznie uprościło procedurę przeszczepu u szczurów. Jednak ze względu na krótką przednią ścianę żyły nadwątrobowej biorcy (SHVC), technika mankietu jest bardzo trudna do zastosowania w rekonstrukcji SHVC. Większość badaczy w tej dziedzinie nadal stosuje technikę szycia ręcznego do rekonstrukcji SHVC, co sprawia, że jest to wąskie gardło w ortotopowym przeszczepie wątroby u szczurów. Technika zespolenia magnetycznego (czyli magnamozy) to metoda łączenia dwóch naczyń za pomocą siły przyciągania między dwoma magnesami. Nasze ostatnie badanie wykazało, że technika zespolenia magnetycznego jest lepsza od techniki szwu ręcznego w rekonstrukcji SHVC u szczurów. W tym artykule przedstawiamy krok po kroku protokół rekonstrukcji SHVC u szczurów przy użyciu nowatorskiej techniki zespolenia magnetycznego. W tym modelu rekonstrukcję PV i IHVC wykonano standardową techniką mankietową, natomiast rekonstrukcję przewodu żółciowego (BD) wykonano techniką stentu. Nie przeprowadzono rearterializacji wątroby. Technika zespolenia magnetycznego znacznie ułatwiła rekonstrukcję SHVC i znacznie skróciła fazę wątrobową. Po rozsądnej krzywej uczenia się, nawet badacze bez zaawansowanych umiejętności mikrochirurgicznych mogą uzyskać wiarygodne i powtarzalne wyniki przy użyciu tego szczurzego modelu OLT.

Wprowadzenie

Szczurzy model ortotopowego przeszczepu wątroby (OLT) jest niezbędny do badań nad przeszczepami1,2. Pierwszy szczurzy OLT został opisany przez Lee et al. w 1973 roku3. W tym modelu wszystkie naczynia zostały zrekonstruowane techniką szwu ręcznego. Technika szycia ręcznego wymaga zaawansowanych umiejętności mikrochirurgicznych, co znacznie ogranicza jej zastosowanie. Od tego czasu zgłoszono różne modyfikacje oryginalnego protokołu OLT u szczurów. Wśród nich technika mankietowa do zespolenia żyły wrotnej (PV) i żyły głównej podwątrobowej (IHVC) opisana przez Kamada i wsp.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Protokół został przeprowadzony zgodnie z Wytycznymi dotyczącymi opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych i został zatwierdzony przez Komitet ds. Etyki Eksperymentów na Zwierzętach Uniwersytetu Xi'an Jiaotong, Xi'an, prowincja Shaanxi, Chiny.

UWAGA: Żadna z procedur w tym protokole nie została wykonana pod mikroskopem chirurgicznym.

1. Przygotowanie przedoperacyjne

  1. Konstrukcja i kształt pierścieni magnetycznych (Rysunek 1)
    1. Zmontuj urządzenie do zespolenia magnetycznego, dopasowując parę pierścieni magnetycznych neodymowo-żelazowo-borowych.
    2. Zaproj....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Po około 10 próbach technika magnetycznego zespolenia w celu rekonstrukcji SHVC została z powodzeniem opanowana przez badacza, który nie posiadał wcześniejszego przeszkolenia w zakresie mikrochirurgii. Rekonstrukcja SHVC zajęła mniej niż 2 min. Faza anhepatyczna u szczurów biorców trwała około 10 min. W miejscu zespolenia SHVC nie zaobserwowano zakrzepicy, krwawienia ani angiostenozy w 1., 5. i 30. dniu po reperfuzji. Kawografia żyły głównej dolnej została wykonana 2 tygodnie po transplan.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Wiele postępów klinicznych w transplantacji wątroby można przypisać badaniom na zwierzętach. Szczurzy OLT jest szeroko stosowanym i dobrze akceptowanym modelem w badaniach nad konserwacją narządów, immunologią transplantacyjną, fizjologią i patologią. Jest to jednak również bardzo skomplikowany zabieg i wymaga zaawansowanych umiejętności mikrochirurgicznych. Pomimo wielu ulepszeń w procedurze OLT u szczurów, zespolenie SHVC pozostało trudnym krokiem. W tym artykule opisano nowatorską technikę zespolenia magnetycznego do .......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Ta praca była wspierana przez granty z Programu Rozwoju Zespołu Innowacji Ministerstwa Edukacji Chin (No. IRT16R57), Chińska Narodowa Fundacja Nauk Przyrodniczych (nr 81470896) oraz fundusz badawczy na rzecz planów rekrutacji młodych talentów Uniwersytetu Xi'an Jiaotong (RW).

....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Aparat anestezjologicznyHarvard  stołowyZnieczulenie zwierząt
PLX7000B HF Mobilny cyfrowy system ramienia CPerlong MedicalPLX7000BJest używany głównie do angiografii i fotografii różnych operacji
: Pompa strzykawkowaMindrayBeneFusion SP5infuzji dożylnej
IsofluraneRWD life Science Co.znieczulenie: do indukcji i utrzymania znieczulenia
iohexolShanghai General Pharmaceutical Co  wewnątrznaczyniowe środki kontrastowe   
heparyna sodowa do wstrzykiwańSPH nr 1 Biochemiczne i Pharmaceutical Co., LTD   zapobiegać powstawaniu zakrzepicy 
cefuroksym Glaxo Operations UK Limited antybiotyk
buprenorfina TIPR Pharmaceutical Responsible Co., Ltdprzeciwbólowe zakrzywione
mikrokleszczeShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.W40350narzędzie chirurgiczne
kleszcze hemostatyczne (proste)Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.J31010narzędzie chirurgiczne
kleszcze hemostatyczne (zakrzywione)Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.Narzędzie chirurgiczneJ31020
Zacisk SatinskyShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.do narzędzi chirurgicznychXEC050
Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.J32010uchwyt
na mikroigłęShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.WBA040kleszcze z ząbkiem do narzędzi chirurgicznych
Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.J42010kleszczyki do tkanek narzędzi chirurgicznych
(z hakiem)Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.J41010chirurgiczne
nożyczki do tkanekShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.Y00040narzędzie chirurgiczne
nożyczki chirurgiczneShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.Y00030mikronożyczki do narzędzi chirurgicznych
Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.MR-S121TNarzędzie chirurgiczne
Klipsy do mikronaczyńShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.Narzędzie chirurgiczneXEC240
proste mikrokleszcze (stop tytanu)Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.WCC010narzędzie chirurgiczne
zakrzywione mikrokleszcze  (stop tytanu)Shanghai Medical Instruments (Grupa) Ltd., Corp.Narzędzie chirurgiczneWCC020
do Uchwyt igły narzędzia chirurgicznego narzędzie

Bibliografia

  1. Aller, M. A., et al. A half century (1961-2011) of applying microsurgery to experimental liver research. World journal of hepatology. 4, 199-208 (2012).
  2. Aller, M. A., et al.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

technika mankietowastent przewod w ciowychrearterializacja w trobyfaza anhepatycznaumiej tno ci mikrochirurgiczneprze ywalno pooperacyjna