Analiza stężenia kortyzolu we włosach stanowi alternatywę dla tradycyjnych pomiarów kortyzolu; jednakże, aby pobrać próbki włosów od Afroamerykanów, naukowcy muszą być kulturowo poinformowani i kompetentni. Celem tego protokołu jest zademonstrowanie kulturowo poinformowanej techniki pobierania próbek włosów do analizy kortyzolu od Afroamerykanów.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Pobieranie próbek włosów do analizy kortyzolu we włosach u Afroamerykanów
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Hormon kortyzol jest zazwyczaj oceniany w próbkach śliny, surowicy lub moczu. Ostatnio kortyzol został z powodzeniem wyekstrahowany z włosów, w tym z ludzi. Zaletą stężenia kortyzolu we włosach jest to, że odzwierciedla retrospektywne przedstawienie funkcji osi podwzgórze-przysadka-nadnercza (HPA) w czasie, podobnie jak hemoglobina A1C reprezentuje kontrolę glikemii. Jednak uzyskanie próbek włosów może być trudne ze względu na przekonania kulturowe i praktyki pielęgnacji włosów uczestników mniejszości. Na przykład Afroamerykanie mogą niechętnie dostarczać próbki. Ponadto niewielu badaczy jest przeszkolonych w zbieraniu próbek włosów od Afroamerykanów. Celem tego artykułu jest przedstawienie kulturowo poinformowanego protokołu, który pomoże naukowcom w uzyskaniu próbek włosów od Afroamerykanów. Aby zilustrować reprezentatywne wyniki wdrożenia tego protokołu, przedstawiono zanonimizowane dane od Afroamerykanów, którzy wzięli udział w badaniu społecznościowym dotyczącym przewlekłego stresu. Oceniane są preferencje dotyczące praktyki fryzjerskiej. Uczestnicy czują się komfortowo, pokazując zdjęcia próbek włosów przed strzyżeniem włosów. Metoda pojedynczego szczepu twist and gentle pull służy do zebrania około 30 - 50 pasm włosów z tylnego obszaru wierzchołka skóry głowy. Protokół ten znacznie usprawni pobieranie próbek włosów od Afroamerykanów.
Wprowadzenie
Pobieranie próbek śliny, krwi lub moczu do analizy kortyzolu wiąże się z unikalnymi wyzwaniami proceduralnymi i większym obciążeniem uczestników, ponieważ procedura wymaga wielu próbek śliny, próbek do nakłucia żyły lub 24-godzinnego pobierania moczu. Pozyskiwanie kortyzolu z próbek włosów jest prostą i akceptowalną alternatywą dla używania próbek śliny, surowicy lub moczu1,2. Kortyzol we włosach zapewnia retrospektywną reprezentację funkcji osi podwzgórze-przysadka-nadnercza (HPA) w czasie. Około 3 cm włosów pobranych ze skóry głowy odpowiada średniemu uwalnianiu kortyzolu w ciągu ostatnich 3 miesięcy1. Jednak naukowcy napotykają wyjątkowe wyzwania podczas próby zebrania próbek włosów z różnych populacji. Do takich wyzwań należą przekonania religijne lub duchowe, w tym odsłanianie włosów (np. muzułmanki), włosy jako święte (grupy Indian amerykańskich) lub normy kulturowe, które łączą włosy ze standardami piękna i obrazu siebie.
W kulturze Afroamerykanów, szczególnie wśród kobiet, owłosienie na skórze głowy jest bardzo osobistym i ważnym aspektem wizerunku ich ciała3,4. Co więcej, doświadczenia historyczne (np. eksperymenty w Tuskegee) nadal sprzyjają nieufności do procesu badawczego5. Niektóre afroamerykańskie wierzenia folklorystyczne i kulturowe sugerują również, że próbka włosów może być używana w rytuałach, które mogą wyrządzić krzywdę6,7. Naukowcy powinni zdawać sobie sprawę z potencjalnych wyzwań, z którymi mogą się spotkać w badaniach, gdy afroamerykańscy uczestnicy są proszeni o dostarczenie próbek włosów.
Oprócz problemów związanych z obrazem ciała, konkretne techniki pobierania i obchodzenia się z próbkami włosów od Afroamerykanów mogą różnić się od tych stosowanych przez Amerykanów pochodzenia europejskiego6,7. Na przykład Afroamerykanie mogą mieć proste, cienkie, kręcone, perwersyjne, szorstkie lub kombinację tych rodzajów włosów, z których każdy wymaga innych technik zbierania i zabezpieczania odpowiednich próbek włosów do przetworzenia. Ostatnie badania na próbkach afroamerykańskich nastolatków8, a także próbkach wieloetnicznych9, wykazały, że pobieranie włosów do pomiaru poziomu kortyzolu było akceptowalne wśród uczestników afroamerykańskich. Obecnie nie ma procedur treningu wizualnego mających na celu zapewnienie naukowcom umiejętności i wiedzy kulturowej potrzebnych do pobierania próbek włosów od Afroamerykanów. Celem tego artykułu jest przedstawienie protokołu opartego na wiedzy kulturowej, który pomoże naukowcom uzyskać odpowiednie próbki włosów od uczestników afroamerykańskich. Metoda ta została opracowana ze starannym uwzględnieniem fizycznych, psychospołecznych i kulturowych cech istotnych dla pobierania próbek włosów od dorosłych Afroamerykanów. Do tej pory nie ma wizualnych metod pobierania tych próbek, a ten protokół będzie pierwszym przewodnikiem, który szczegółowo opisuje prawidłowe pobieranie próbek włosów od dorosłych Afroamerykanów. Aby zilustrować reprezentatywne wyniki wdrożenia protokołu, przedstawiono zanonimizowane dane pochodzące od Afroamerykanów w wieku 65 lat i starszych, którzy uczestniczyli w badaniu społecznościowym dotyczącym przewlekłego stresu. Zarówno asystenci naukowi płci męskiej, jak i żeńskiej z różnych środowisk rasowych kontaktowali się z potencjalnymi uczestnikami za pomocą listy i ulotek wygenerowanych przez klinikę. Główna badaczka, która jest Afroamerykanką, rozmawiała w domach kultury i subsydiowanych mieszkaniach dla seniorów dla starszych dorosłych Afroamerykanów na temat badania, w tym z opisem metod pobierania włosów.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Badanie zostało zatwierdzone przez Szpitale Uniwersyteckie Cleveland Medical Center Institutional Review Board, a protokół jest zgodny z wytycznymi ochrony uczestników i bezpieczeństwa danych, jak wskazano przez komisję rewizyjną.
1. Przygotuj uczestnika do pytań dotyczących próbki włosów i pobierania próbek włosów
- Wyjaśnij uczestnikowi, że pobrana próbka włosów to mniej włosów niż te, które normalnie są tracone podczas codziennego szczotkowania z tyłu głowy (tylnego wierzchołka). Powiedz uczestnikowi, że miejsce, w którym znajduje się próbka włosów, jest ukryte przez otaczające włosy, a zatem nie jest widoczne po pobraniu. Poinformuj uczestnika, że próbka zostanie wykorzystana do pomiaru hormonu zwanego kortyzolem obecnego w hair10,11.
- Wyjmij przykładowe zdjęcie i pokaż uczestnikowi, ile włosów zostanie zebranych (30 - 50 pasm).
UWAGA: Zobacz Rysunek 1 dla zdjęcia próbki włosów. - Zadaj uczestnikowi praktykę pielęgnacji włosów12 pytań wymienionych w Tabeli 1.
2. Zbierz próbkę włosów
- Powiedz uczestnikowi, że próbka jest pobierana w prywatnym obszarze za przenośną przegrodą, zasłoną lub zamkniętymi drzwiami. Zapewnij uczestników, że jeśli noszą perukę lub treskę, ich włosy nie są obcinane w miejscu, w którym inni mogą widzieć. Zmierz długość włosów od skóry głowy do końcówek, delikatnie i napięto włosy.
- Jeśli włosy są krótkie (mniej niż 3 cm), postępuj zgodnie z protokołem krótkich włosów w kroku 3 (chociaż jeśli włosy mają mniej niż 1 cm długości, nie można pobrać próbki, a najlepiej, aby włosy miały co najmniej 3 cm długości). W przypadku włosów dłuższych niż 6 cm postępuj zgodnie z protokołem dotyczącym długich włosów w kroku 4. W przeciwnym razie przejdź do następnego kroku.
- Upewnij się, że materiały są gotowe, umieszczając materiały do strzyżenia włosów (arkusz folii aluminiowej, kopertę biznesową, nożyczki do salonu fryzjerskiego, grzebień do rozdzielania dużych i małych zębów, preparaty nasączone alkoholem, taśmę malarską, marker permanentny, rękawiczki nielateksowe [opcjonalnie] i spinki do włosów)10 na powierzchni obok uczestnika. Wyczyść nożyczki i przeczesz nasączonym alkoholem wacikiem do przygotowywania przed pobraniem próbki. Wytnij arkusz folii aluminiowej o wymiarach 8 x 10 cali, aby użyć go do próbki.
- Załóż rękawiczki nielateksowe. Weź grzebień i rozłóż włosy poziomo wzdłuż tylnego wierzchołka skóry głowy między końcami uszu.
- Weź spinkę i przesuń włosy od góry części, a następnie umieść kolejną spinkę na dole, aby odsłonić prostokąt o wymiarach 5 x 10 cm między dwoma spinkami luźnych włosów (mniej więcej wielkości talii kart do gry).
- Zapytaj uczestnika, czy woli używać grzebienia z szerokimi czy wąskimi zębami, przeczesując prostokąt włosów o długości 2-3 cali. Zapytaj uczestnika, w jaki sposób chciałby, aby pozostałe włosy z grzebienia zostały wyrzucone. Oddaj włosy z grzebienia uczestnikowi lub, jeśli (i tylko jeśli) uczestnik stwierdzi, że można wyrzucić luźne włosy, wyrzuć pozostałe włosy z grzebienia do kosza na śmieci.
- Chwyć około 30 - 50 pasm włosów po prawej stronie prostokąta 2 - 3 cali i delikatnie pociągnij i odkręć włosy od skóry głowy ruchem toczącym się między palcami.
- Upewnij się, że próbka została pobrana jak najbliżej skóry głowy, ale nie przecinaj skóry głowy. Użyj nożyczek klasy salonowej i wykonaj czyste, proste cięcie.
- Chwyć próbkę włosów i upewnij się, że koniec korzenia jest dokładnie wyrównany wzdłuż cięcia.
- Przymocuj włosy do arkusza folii aluminiowej, oklejając je taśmą malarską. Nie zakrywaj końca skóry głowy i nie używaj taśmy malarskiej na włosach krótszych lub równych 3 cm. Umieść luźno przycięte włosy na środku folii i złóż w kwadrat, upewniając się, że włosy nie wypadną z folii.
- Weź marker i oznacz koniec skóry głowy na folii aluminiowej. Użyj gotowych etykiet z kodami kreskowymi, aby przymocować je do folii i koperty.
- Złóż folię aluminiową bez składania włosów na końcu skóry głowy, aby zapobiec głowie łóżka (pogniecione i zgięte włosy), umieść ją w kopercie wielkości biznesowej i zapieczęć.
- Oznacz zewnętrzną stronę koperty niepowtarzalnym numerem identyfikacyjnym badania uczestnika, datą i nazwiskiem głównego badacza lub użyj etykiety z kodem kreskowym, jeśli jest dostępna.
- Przechowywać próbkę w suchym miejscu, w temperaturze pokojowej.
3. Pobieranie próbek dla krótkich włosów (1 - 3 cm)
- Wykonaj kroki 2.3 i 2.4.
- Po przedziałku poproś uczestnika, aby trzymał przedziałek na włosach blisko skóry głowy. Przytnij włosy wzdłuż przedziałka, trzymając je mocno palcem wskazującym i kciukiem10.
- Umieść luźne włosy w folii i bezpiecznie ją złóż. Nie przyklejaj włosów do folii.
- Wykonaj kroki od 2.11 do 2.14.
4. Pobieranie próbek dla długich włosów (dłuższych niż 6 cm)
- Rozdziel włosy od lewej do prawej na tylnym wierzchołku.
- Użyj spinek do włosów, aby zatrzymać dodatkowe włosy.
- Ułóż skręt włosów i mocno przyciśnij palcem wskazującym i kciukiem, aby nie upuścić sample10.
- Wykonaj czyste, proste cięcie jak najbliżej skóry głowy. Zbierz 30 - 50 pasm włosów.
- Jeśli uczestnik ma cienkie włosy, przytnij 2-3 małe obszary (w odległości 1 cm od siebie) w poprzek tylnego wierzchołka, aby ukryć miejsce cięcia.
- Wykonaj kroki od 2.10 do 2.14.
5. Przetwarzanie próbek
- Opakowania foliowe zawierające próbkę włosów należy przechowywać w temperaturze pokojowej przez czas nieokreślony do czasu analizy.
Uwaga: Kortyzol we włosach jest niezwykle stabilny we włosach i może być przechowywany przez lata. W rzeczywistości kortyzol został zmierzony w próbkach włosów ze zmumifikowanych szczątków11. - Przeanalizuj kortyzol we włosach, jak wcześniej opublikowano12. Próbki mogą być wysyłane z dnia na dzień w temperaturze otoczenia.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
W naszym badaniu zgodę na udział wyraźnych dwudziestu jeden osób pochodzenia afroamerykańskiego (średni wiek = 75; SD = 6,9; 85% kobiet). Czterech uczestników (19%) odmówiło przekazania próbki włosa, a dwoje (9,5%) nie mogło dostarczyć próbki ze względu na zbyt krótkie włosy. Łącznie pobrano i przetworzono 15 próbek włosów (Tabela 2). Długość przetworzonych próbek włosów wynosiła od 1 cm do 4,8 cm. Problemy techniczne obejmowały próbki słabo wyrównane na końcach przy skór...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Podstawowe kroki w protokole pobierania włosów obejmują podanie przykładu ilości włosów, które zostaną pobrane, pokazanie miejsca próbki (wir tylny), zastosowanie metody pojedynczego skrętu i delikatnego pociągnięcia oraz zabezpieczenie próbki taśmą malarską z dala od końca skóry głowy. Poprzez delikatne skręcanie i ciągnięcie próbki, kręcone włosy są wydłużane, a wyrównanie końców skóry głowy jest zachowane. Skraca to czas laboratoryjny potrzebny na wyrównanie końców skóry głowy, zmierzenie i wycięcie próbki. Chociaż no...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Laboratorium Immunologii Behawioralnej i Endokrynologii zostało wyznaczone jako Laboratorium Doskonałości przez Salimetrics, LLC.
Podziękowania
Ta publikacja była możliwa dzięki Clinical and Translational Science Collaborative z Cleveland; KL2TR000440 z National Center for Advancing Translational Sciences (NCATS) komponentu National Institutes of Health; oraz Mapa drogowa NIH dla badań medycznych. Praca dr Jodi Ford w tej dziedzinie została sfinansowana przez National Institutes of Health, National Institute on Drug Abuse (1R21DA034960) oraz The Ohio State University Institute for Population Research z National Institute of Child Health and Development (2P2CHD058484). Wyłączną odpowiedzialność za treść ponoszą autorzy i nie muszą one reprezentować oficjalnych poglądów National Institutes of Health. Praca dr Laudenslagera w tej dziedzinie została sfinansowana z umowy z Instytutu Badań nad Wynikami Skoncentrowanymi na Paklecie (CE-1304-6208), grantu z Administracji ds. Dzieci i Rodzin (90YR0058) oraz grantu z Funduszu Wieczystego Grupy Badawczej Psychobiologii Rozwojowej Wydziału Psychiatrii Uniwersytetu Kolorado Denver Anschutz Medical Campus.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Nożyczki klasy salonowej | Cricket | S-3 550 | Zgrzebne profesjonalne nożyce do włosów, 5,5-calowy |
| grzebień z dużymi | zębami Goody | Brak katalogu number__Goody Stylista Grabie Comb | Link do strony internetowej firmy http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_Stylista_Rake_Comb?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780 |
| Grzebień z małymi | zębami Goody | Brak katalogu number_ Goody Start.Style.Finish. Link do strony internetowej firmy http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Combs?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780 | |
| Preparaty alkoholowe | Kendall Webcol Alcohol Preps | Brak numeru katalogowego. Kendall Webcol Alcohol Preps | https://www.buyemp.com/product/kendall-webcol-alcohol-preps |
| Taśma malarska | 3M Scotch | ScotchBlue ORIGINAL Malarz" s Taśma | https://www.scotchblue.com/3M/en_US/scotchblue/products/painters-tape/ |
| Marker permanentny | Sharpie | Black Sharpie Fine Point | http://www.sharpie.com/sharpie/fine/SHFineBlackFine.html |
| Rękawice nielateksowe | Proté gé | 93997 | Protegowany® Nitrylowe bezpudrowe rękawiczki do badań http://aureliagloves.com/product/protege/ |
| spinki do włosów | Goody | Goody Start.Style.Finish. Curl Clips | http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Curl_Clips |
| koperta | Office Depo | 330808 | Office Depot® Koperty z zapięciem marki, 9" x 12", brązowe, pudełko zawierające 100 |
| arkuszy folii | Wybór | 1229105 | Pudełko 500 arkuszy Składane arkusze folii pop-up dla gastronomii |
| Wstępnie zważony 2 ml kriowialny | Wheaton, Millville, NJ, USA | W985902 | |
| 100% izopropanol | Spectrum | I1275 | 67-63-0 | |
| Ciekły azot | Ohio State Unversity Stores | Magazyn butli gazowych | http://osustores.osu.edu/prodservices/liquidnitrogen.aspx |
| Łożysko kulkowe ze stali nierdzewnej | McMasterCarr | 9291K42 | https://www.mcmaster.com/#standard-stainless-steel-balls/=1acqby0 |
| Specjalnie frezowane kasety aluminiowe | FisherScientific | Retsch 20.745.0001 | |
| Metanol klasy HPLC | FisherScientific | A452N1-19 https://www.fishersci.com/shop/products/methanol-hplc-fisher-chemical-6/p-216129 | |
| Probówka do mikrowirówek | Eppendorf Ameryka Północna | 22363352 | https://online-shop.eppendorf.us/US-en/Laboratory-Consumables-44512/Tubes-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html?_ga=2.36544352.1776616592.1511283212-1254533852.1511283212 |
| Zestaw ELISA kortyzolu Salimetrics | LLC, State College, PA, USA | 1-3002 (5PK 1-3002-5) | https://www.salimetrics.com/assay-kit/cortisol-salivary-elisa-eia-kit |
| Centtrifuge do rurki mikorwirówki | Beckman Coulter | Microfuge serii | 20 http://centrifugebybeckman.com/?page_id=727/?pi_ad_id=creative?utm_term=microfuge |
Bibliografia
- Sauve, B. K. G., Walsh, G., Tokmakejian, S., Van Uum, S. H. Measurement of cortisol in human hair as a biomarker of systemic exposure. Clin Invest Med. 30 (5), 183-191 (2007).
- Wright, K. D., Hickman, R., Laudenslager, M. L. Hair cortisol analysis: a promising biomarker of HPA activation in older adults. Gerontologist. 55, Suppl 1 140-145 (2015).
- Awad, G. H., et al. Beauty and body image concerns among African American college women. J Black Psychol. 41 (6), 540-564 (2015).
- Capodilupo, C. M., Kim, S. Gender and race matter: the importance of considering intersections in Black women's body image. J Couns Psychol. 61 (1), 37-49 (2014).
- Miracle, V. A. The Belmont Report: the triple crown of research ethics. Dimens Crit Care Nurs. 35 (4), 223-228 (2016).
- Fishman, B. M., Bobo, L., Kosub, K., Womeodu, R. J. Cultural issues in serving minority populations: emphasis on Mexican Americans and African Americans. Am J Med Sci. 306 (3), 160-166 (1993).
- Webb, J. Y. Louisiana voodoo and superstitions related to health. HSMHA Health Rep. 86 (4), 291-301 (1971).
- Ford, J. L., Boch, S. J., McCarthy, D. O. Feasibility of hair collection for cortisol measurement in population research on adolescent health. Nurs Res. 65 (3), 249-255 (2016).
- Wosu, A. C., et al. Hair cortisol in relation to sociodemographic and lifestyle characteristics in a multiethnic US sample. Ann Epidemiol. 25 (2), 90-95 (2015).
- Laudenslager, M. L. Hair collection and shipping instructions. , Available from: http://www.ucdenver.edu/academics/colleges/medicalschool/departments/psychiatry/Research/biel/Pages/Overview.aspx (2016).
- Webb, E., et al. Assessing individual systemic stress through cortisol analysis of archaeological hair. J Archaeolog Sci. 37 (4), 807-812 (2010).
- Russell, E., et al. Toward standardization of hair cortisol measurement: results of the first international interlaboratory round robin. Ther Drug Monit. 37 (1), 71-75 (2015).
- Bosley, R. E., Daveluy, S. A primer to natural hair care practices in black patients. Cutis. 95 (2), 78-80 (2015).
- Loussouarn, G. African hair growth parameters. Brit J Derm. 145 (2), 294-297 (2001).
- Hoffman, M. C., Karban, L. V., Goodteacher, A., Laudenslager, M. L. Chemical processing and shampooing impact cortisol measured in human hair. Clin Invest Med. 37 (4), 252-257 (2014).
- Ramirez, J., Elmofty, M., Castillo, E., DeRouen, M., Shariff-Marco, S., Allen, L., et al. Evaluation of cortisol and telomere length measurements in ethnically diverse women with breast cancer using culturally sensitive methods. J Community Genet. 8, 75-86 (2017).
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
Tagi
Pobieranie próbek włosów u osób pochodzenia afroamerykańskiegoprotokół uwzględniający uwarunkowania kulturowepobieranie próbek włosówmetoda skręcania i wyciąganiatylna część czubka głowynożyczki fryzjerskiepraktyki pielęgnacji włosówśrodki zapewniające komfort uczestnikapomiar poziomu kortyzolu we włosach
