Method Article

Szczurzy model zmęczenia centralnego przy użyciu zmodyfikowanej metody wieloplatformowej

DOI:

10.3791/57362

August 14th, 2018

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tutaj prezentujemy protokół wprowadzający szczurzy model zmęczenia centralnego przy użyciu zmodyfikowanej metody wieloplatformowej (MMPM).

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

W tym artykule przedstawiliśmy szczurzy model zmęczenia centralnego przy użyciu zmodyfikowanej metody wieloplatformowej (MMPM). Skrzynka wieloplatformowa została zaprojektowana jako zbiornik na wodę z wąskimi platformami na dnie. Modelowe szczury umieszczono w zbiorniku i starano na platformach przez 14 godzin (18:00 - 8:00) dziennie przez kolejne 21 dni, z pustą grupą kontrolną ustawioną dla kontrastu. Pod koniec modelowania szczury w grupie modelowej wykazywały wyraźny zmęczony wygląd. Aby ocenić model, przeprowadziliśmy kilka testów behawioralnych, w tym test otwartego pola (OFT), test podwyższonego labiryntu plus (EPM) oraz test wyczerpującego pływania (ES). Wyniki wykazały, że lęk, upośledzenie funkcji poznawczych, słaba wydajność mięśni i zmniejszona dobrowolna aktywność prezentowane u szczurów modelowych potwierdzają diagnozę zmęczenia centralnego. Zmiany w centralnych neuroprzekaźnikach również zweryfikowały wynik. Podsumowując, model z powodzeniem symulował zmęczenie centralne, a przyszłe badania z wykorzystaniem modelu mogą pomóc w ujawnieniu patologicznego mechanizmu choroby.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zmęczenie jest jednym z głównych czynników zagrażających zdrowiu ludzkiemu1. W ostatnich dziesięcioleciach różne badania dowiodły, że zmęczenie jest wywoływane obwodowo, ale centralnie napędzane i zawsze towarzyszą mu zaburzenia emocjonalne i poznawcze. Włoski fizjolog A. Mosso jako pierwszy zaproponował słowo Central Fatigue2. Jest ogólnie definiowany jako ograniczona dobrowolna aktywność i upośledzenie funkcji poznawczych spowodowane dysfunkcją przekazywania impulsów w ośrodkowym układzie nerwowym (OUN)3. W porównaniu ze zmęczeniem mięśni obwodowych, zmęczenie centralne podkreśla zmiany w OUN, a....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie zwierzęta były utrzymywane zgodnie z wytycznymi chińskiego ustawodawstwa dotyczącego etycznego użytkowania i opieki nad zwierzętami laboratoryjnymi.

1. Przygotowanie do wstępnego modelowania

  1. Przygotowanie laboratoryjne
    1. Uruchom lampę UV na co najmniej 30 minut przed eksperymentem.
    2. Kontroluj temperaturę w laboratorium na poziomie 25 ± 3 °C, a wilgotność względną około 30%.
    3. Włącz światło laboratoryjne o 6:00 i wyłącz je o 18:00, aby ustawić cykl 12 h/12 h światło/ciemność.
  2. Konstrukcja skrzynkowa z wieloma platformami
    1. Zb....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Opisujemy szczurzy model centralnego zmęczenia za pomocą MMPM. 24 szczury Wistar są losowo podzielone na grupę kontrolną i grupę modelową, po 12 szczurów w każdej grupie. Model aparatu został zaprojektowany jako zbiornik na wodę z wąskimi platformami na dnie (Rysunek 1). Modelowe Szczury stoją na platformach przez 14 godzin dziennie, wliczając w to częściowy czas snu, przez 21 dni (Rysunek 2).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

MMPM jest pierwotnie zaprojektowany do deprywacji snu9. Szczury są wystrzeliwane do zbiornika na wodę z platformami zamocowanymi na dnie. Kierując się instynktownym strachem przed wodą, szczury nadal stoją na platformach i nie zasypiają. Badanie pokazuje, że różne godziny braku snu prowadzą do różnych zmian w zachowaniu i nastroju szczurów, w tym upośledzenia rozpoznawania10, negatywnych emocji11 i zmęczenia centralnego. Niektórzy badacze udowadniają.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ta praca była wspierana przez Fundację Nauk Przyrodniczych w Pekinie (No.7162124) oraz Fundację Xin-ao dla Pekińskiego Uniwersytetu Medycyny Chińskiej.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
wieloplatformowy zbiornik na wodę do deprywacji snuDostosowywanie, jest dostarczany przez laboratorium neuroimmunologiczne Pekińskiego Uniwersytetu Medycyny Chińskiej 110cm x 60 cm x 40 cm. Na dole znajduje się 15 plastikowych małych platform. Mała platforma ma 6,5 cm średnicy i 8 cm wysokości
Szczury WistarBeijing Weitong Lihua Experimental Animal Technology Companynumer licencji SYXK (Pekin) 2016-0011Użyj 32 zdrowych samców szczurów Wistar, 8 tygodni (200-210 g)
Wysokosprawny chromatograf cieczowy Agilent 1100LC Agilent  G1379A, G1311A, G1313A , G1316A   G1379A, pompa chromatograficzna typu G1311A, automatyczny próbnik G1313A, skrzynka temperatury kolumny G1316A
Detektor elektrochemiczny DECADE II SDCHolenderskaelektroda szklisto-węglowa firmy ANTEC, elektroda referencyjna Ag/AgCl, stacje robocze (Clarity CHS)
Rozwój technologii Phos w skali elektronicznej ACS-ZEAS, Pekin.Waga ważących szczurów może być dokładna do 0,1 g.
Dostosowywanie pudełka Open Field, zapewnia je laboratorium neuroimmunologiczne Beijing University of Chinese Medicinedrewniane pudełko z otwartym polem  100 cm na 100 cm x 40 cm, wewnętrzna ściana i spód jako szary. Dno jest podzielone na 25 kwadratów o równej powierzchni, z których każdy ma wymiary 20 cm x 20 cm, a 16 siatek wzdłuż ściany zewnętrznej to siatki zewnętrzne, a pozostałe 9 siatek jest centralnych. Kamera jest zamontowana powyżej mediany.
Podwyższony labirynt Plus-Beijingzhongshi dechuang technology development co., LTD.Otwarte ramiona i zamknięte ramiona krzyża składają się z 30 cm x 5 cm x 15 cm, a centralna część ma wymiary 5 cm x 5 cm, z kamerą zamontowaną nad środkiem i wysokością 45 cm.
wiadro do pływania dla szczurów.Zhenhua biological instrument equipment co., LTD. Anhui, Chiny.Objętość plastikowego bębna wynosi 70 cm x 30 cm x 110 cm, który służy do pływania u szczurów.
TermometrShiya instrument co., LTD., Changzhou, Chiny.Kontroluj temperaturę wody
Mała pompa wodnaXincheng technology co., LTD., Chengdu, Chiny.Używany do zbiornika na wodę i zachowania podczas pływania.
Oprogramowanie behawioralne Ethovition3.0.Nuldus,HolandiaAnaliza pomiarowa filmów z zachowaniem szczurów.
Wirówka chłodnicza Biofuge Stratos HERAEUS VCX130 ultradźwiękowy instrument do szczelinowania SONICS

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ishii, A., Tanaka, M., Yamano, E., Watanabe, Y. The neural substrates of physical fatigue sensation to evaluate ourselves: a magnetoencephalography study. Neuroscience. 261, 60-67 (2014).
  2. Dalsgaard, M. K., Secher, N. H.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Central Fatigue ModelMultiple Platform MethodRat Model ConstructionOpen Field TestElevated Plus MazeExhaustive Swimming TestNeurotransmitter AnalysisSleep Deprivation ProtocolBehavioral AssessmentWater Tank Setup

Related Articles