Artykuł metodologiczny

Pomiar aktywnego i pasywnego oswajania oddzielnie u myszy

DOI:

10.3791/58048

10 sierpnia 2018

W tym artykule

Podsumowanie

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Oswajanie u zwierząt obejmuje zmniejszenie reakcji unikania wobec ludzi (pasywne oswajanie) i wzrost aktywnych podejść do ludzi (aktywne oswajanie). W tym miejscu opisujemy szczegółowe protokoły dla trzech testów behawioralnych (aktywne oswojenie, pasywne oswojenie i testy pozostania przy ręce), aby oddzielnie zmierzyć aktywną i pasywną oswajalność myszy.

Streszczenie

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Udomowione zwierzęta, takie jak psy i myszy laboratoryjne, wykazują wysoki poziom oswajania, co jest ważne dla ludzi, aby łatwo sobie z nimi poradzić. Oswojenie ma dwa komponenty behawioralne: niechęć do unikania ludzi (pasywne oswojenie) i motywację do zbliżania się do ludzi (aktywne oswajanie). Aby określić ilościowo te składniki u myszy, opracowaliśmy wcześniej testy behawioralne dla aktywnego oswojenia, pasywnego oswojenia i gotowości do pozostania na ludzkiej ręce, z których każdy został zaprojektowany tak, aby można go było ukończyć w ciągu 3 minut. Uzyskane dane wykorzystano do selektywnej hodowli, w której analizowano dużą liczbę myszy na pokolenie. Aktywny test oswajania mierzy ruch myszy w kierunku ludzkiej dłoni i kontakt, w jaki się angażuje. Pasywny test oswajania mierzy czas, w którym mysz toleruje ludzki dotyk. W teście pozostania w dłoni mysz umieszcza się na ludzkiej dłoni i powoli dotyka kciukiem tej ręki; Mierzy się czas, w którym zwierzę pozostaje na ręce. W tym miejscu opisujemy konfigurację testową i aparaturę, wyjaśniamy procedury i omawiamy odpowiednią analizę danych. Na koniec wyjaśniamy, jak interpretować wyniki.

Wprowadzenie

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Selektywna hodowla podczas udomowienia zmieniła cechy udomowionych zwierząt, aby lepiej przystosowały się do życia z ludźmi1,2,3. "Oswojenie" to powszechna cecha behawioralna obserwowana u udomowionych zwierząt. Badania nad selektywną hodowlą w celu oswojenia zwierząt ujawniają, jak zmieniały się ich fenotypy w trakcie udomowienia. W słynnym badaniu lisy były selektywnie hodowane w celu oswojenia i ustalono grupę lisów, które wykazywały wysoki poziom oswajania2. Lisy wykazywały również inne zmiany fenotypowe obejmujące morfologię, rozmnażanie, kolor sierści i cechy fizjologiczne. Selektywna hodowla w celu oswojenia u myszy, popularnego zwierzęcia laboratoryjnego, może pomóc w ujawnieniu mechanizmu leżącego u podstaw zmian w różnych fenotypach podczas udomowienia.

Oswajanie ma dwa składniki behawioralne: aktywne podejście do ludzi (aktywne oswajanie) i zmniejszenie unikania ludzi (pasywne oswajanie)4. W poprzednim badaniu ustaliliśmy trzy testy behawioralne, aby scharakteryzować poziomy oswajania u myszy: aktywne oswojenie, pasywne oswajanie i testy pozostania pod ręką5. Pierwszy test miał na celu ilościowe określenie aktywnej oswajalności myszy poprzez pomiar opóźnienia jej spontanicznego podejścia do człowieka i czasu, jaki spędziła w kontakcie z ludzką ręką. Drugi test miał na celu ilościowe określenie biernego oswojenia poprzez zmierzenie, jak długo mysz toleruje dotyk ludzkiej dłoni. Test "zostań przy ręce" miał na celu ilościowe określenie behawioralnego unikania łagodnego głaskania ludzką ręką. Te trzy oceny wymagają jedynie aparatury do pracy w terenie, aparatu cyfrowego i dużej pęsety. Mogą być one wykonywane sekwencyjnie w ciągu 3 minut, co pozwala na zebranie dużej ilości danych dziennie.

W poprzednim badaniu scharakteryzowaliśmy i porównaliśmy zachowania związane z oswajaniem, używając szeregu szczepów wsobnych myszy: 10 dzikich szczepów, jeden japoński szczep wywodzący się od myszy, oraz sześć szczepów laboratoryjnych5. Większość udomowionych szczepów wykazywała znacznie wyższą pasywną oswajalność niż dzikie odmiany, ale aktywne oswajanie nie różniło się między obiema grupami. Na podstawie tych wyników doszliśmy do wniosku, że udomowione myszy, które są założycielami szczepów laboratoryjnych, były głównie selekcjonowane ze względu na ich pasywne oswojenie, ale nie na aktywne oswajanie, w ich historii hodowlanej.

Następnie przeprowadziliśmy selektywną hodowlę z ośmioma dzikimi szczepami myszy, aby wygenerować genetycznie heterogeniczną populację6. Wybraliśmy zwierzęta, które uzyskały wysokie wyniki w teście aktywnego oswajania i skutecznie zwiększały swoją aktywną oswajalność w kolejnych pokoleniach, w porównaniu z grupą kontrolną. Wynik ten wskazuje, że testy wiarygodnie mierzą oswojenie u myszy.

Tutaj opisujemy kompleksową metodę pomiaru wskaźników behawioralnych za pomocą trzech testów behawioralnych. Najpierw wyjaśniamy konfigurację i niezbędną aparaturę. Następnie szczegółowo opisujemy krok po kroku procedurę przeprowadzania eksperymentów, zbierania danych za pomocą wideo i analizowania tych danych za pomocą opracowanego przez nas darmowego oprogramowania. Na koniec pokazujemy reprezentatywne wyniki porównujące pulę selektywnie hodowanych myszy z grupą kontrolną.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie eksperymenty zostały przeprowadzone zgodnie z wytycznymi dla eksperymentów na zwierzętach z National Institute of Genetics (NIG), a wszystkie procedury zostały zatwierdzone przez Komitet NIG ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt (zatwierdzenie nr 26-9).

1. Zwierzęta

  1. Hodowla selektywna
    1. Stwórz dzikie stado heterogeniczne (WHS)6 myszy, krzyżując 8 szczepów wsobnych (MSM, HMI, BLG2, PGN2, KJR, CHD, NJL i BFM/2), unikając chowu wsobnego (krzyżowania między rodzeństwem lub kuzynami)7. Przeprowadź hodowlę selektywną, zaczynając od trzeciego pokolenia (G3), wybierając myszy, które wykazują dłuższy "czas kontaktu" (wybrana grupa, 16 rodzin par godowych) zgodnie z testem aktywnego oswajania (patrz krok 3.1).
    2. Wygeneruj niewybraną grupę kontrolną (również 16 rodzin par godowych) poprzez losowe krycie od G3 wzwyż. W reprezentatywnym eksperymencie użyj myszy uzyskanych z wybranych (S1) i niewybranych (C1) grup myszy WHS, aby pokazać wzorzec zarówno aktywnego, jak i pasywnego oswojenia za pomocą trzech testów oswajania (patrz kroki 3.1 - 3.3). Do eksperymentów użyj 10 myszy G15 na grupę (S1 i C1).
  2. Reprezentatywne zwierzęta objęte badaniem
    1. Odstaw wszystkie myszy od rodziców w wieku 3 tygodni i trzymaj je w grupach tej samej płci z rodzeństwem z miotu, używając standardowych rozmiarów plastikowych klatek zawierających wióry drzewne, aż do testu. Utrzymuj wszystkie zwierzęta w obiekcie dla zwierząt NIG w 12/12-godzinnym cyklu światła/ciemności (światła włączone od 06:00 do 18:00) i stałej temperaturze (23 ± 2 °C).
    2. Upewnij się, że jedzenie i woda są dostępne ad libitum. Przetestuj myszy w wieku 6 tygodni w okresie świetlnym, aby przeanalizować ich interakcje z ludźmi w tej części dnia, kiedy ludzie są zazwyczaj aktywni.
  3. Protokół postępowania
    1. Użyj dużej pęsety pokrytej silikonowymi rurkami, aby przenieść myszy do nowych klatek, delikatnie podnosząc je za ogony. Użyj pęsety, aby oddzielić je od rodziców podczas odsadzania i przesuwać je podczas eksperymentów. Żadna z myszy nie powinna być traktowana przed testami oswojenia.
    2. Przenieś myszy do pokoju eksperymentalnego tuż przed testami oswajania.
    3. Po teście trzymaj samce myszy oddzielnie od siebie, aby uniknąć agresji między samcami u myszy WHS.

2. Wyposażenie

  1. Użyć aparatu do pracy w otwartym polu (400 x 400 x 400 mm, szarawy polichlorek winylu).
  2. Oświetl otwarte pole za pomocą lampy zaciskowej z neutralną białą żarówką (100 luksów) zamocowaną na wysokości 450 mm nad otwartym polem (Rysunek 1).
  3. Rejestruj wszystkie zachowania za pomocą dostępnego na rynku kompaktowego aparatu cyfrowego umieszczonego na wysokości 850 mm nad otwartym polem za pomocą statywu (Rysunek 1).
  4. Noś rękawiczki z tkaniny pod rękawiczkami lateksowymi, aby chronić dłonie przed ugryzieniem podczas testu pasywnego oswojenia (rzadka reakcja).
  5. Zmierz okres testowy za pomocą stopera.

3. Testy

Uwaga: Pierwsze dwa testy (aktywne i pasywne oswajanie) były przeprowadzane przez 1 minutę każdy, a test pozostania pod ręką był przeprowadzany przez mniej niż 1 minutę. Wszystkie trzy testy zostały przeprowadzone w aparacie otwartym i zarejestrowane za pomocą kamery cyfrowej. Procedura dezynfekcji jodoforem powinna być wykonana na wszystkich aparatach przed jakimikolwiek badaniami behawioralnymi.

  1. Procedury aktywnego testu oswajania
    1. Włącz aparat cyfrowy i rozpocznij nagrywanie.
    2. Delikatnie podnieś mysz za ogon za pomocą dużej pęsety (patrz krok 1.3.1) i przenieś ją z klatki domowej do środka aparatu na otwartym polu.
    3. Uruchom stoper.
    4. Połóż lewą rękę w lewym dolnym rogu urządzenia.
    5. Trzymaj dłoń skierowaną do góry i poruszaj palcami powoli i stabilnie, aby upewnić się, że mysz łączy dłoń z człowiekiem. Średni czas poruszania wszystkimi czterema palcami od małego palca do palca wskazującego powinien wynosić około 0,5 s, przy stale powtarzanym cyklu ruchów.
    6. Przesuwaj rękę w kierunku myszy powoli, ze średnią prędkością około 13 cm/s, zatrzymując się w odległości 10 cm od boku ciała myszy.
    7. Zachowaj tę samą odległość, jeśli mysz próbuje się oddalić. Jeśli mysz się zbliży, trzymaj rękę w tej samej pozycji i kontynuuj lekkie poruszanie palcami. Jeśli mysz spróbuje wspiąć się na ramię, przywróć ją na pole za pomocą wolnej ręki.
    8. Zakończ test po 1 minutzie, wycofaj rękę i przejdź do testu pasywnego oswojenia.
  2. Procedury testu pasywnej oswajalności
    1. Postępuj zgodnie z tymi samymi krokami, co w przypadku aktywnego testu oswajania, ale zamiast zatrzymywać się 10 cm od ciała myszy, powoli dotykaj myszy opuszkami palców.
    2. Pozostaw palce w tej samej pozycji, stykając się z myszą, aż mysz się odsunie. Gdy mysz próbuje zerwać kontakt, podążaj za nią, poruszając się ze średnią prędkością około 23 cm/s, i ponownie zainicjuj dotyk.
    3. Zakończ test po 1 minutach. Natychmiast uruchom ponownie stoper, aby rozpocząć test pozostania w ręce.
  3. Procedury dotyczące testu "stay on-hand"
    1. Podnieś mysz za ogon za pomocą dużej pęsety i delikatnie połóż ją na lewej dłoni. Trzymaj rękę blisko podłogi aparatu do pracy w otwartym polu.
    2. Delikatnie przesuwaj mysz ze średnią prędkością 0.5 s/skok lewym kciukiem, aż opuści dłoń.
    3. Powtórz kroki 3.3.1 - 3.3.2 3x.
    4. Po trzeciej próbie przerwij nagrywanie wideo; wszystkie testy oswajania są teraz zakończone.
  4. Procedury poeksperymentalne
    1. Zważ mysz i policz liczbę kału i moczu pozostawionych na otwartym polu.
    2. Oznacz mysz indywidualnie za pomocą dziurkacza do uszu.
    3. Przetrzyj aparat i rękawice eksperymentatora ręcznikiem papierowym nasączonym 0,2% środkiem odkażającym Iodophor.
    4. Wyczyść urządzenie suchym ręcznikiem papierowym.

4. Analizy behawioralne

Uwaga: Nagrania wideo zostały ocenione za pomocą tanaMove w wersji 0.01 (Windows 7), oprogramowania do nagrywania zdarzeń do analiz behawioralnych (Rysunek 2). Oprogramowanie jest dostępne bezpłatnie (Materiały uzupełniające 1) oraz na naszej stronie internetowej (http://www.mgrl-lab.jp/MGRL_software.html). Osoba, która była ślepa na warunki testowe, oceniła cały materiał filmowy. Czas trwania wszystkich wskaźników behawioralnych mierzono w krokach co 0,1 s. Podczas oceniania obserwator naciskał odpowiednią literę na klawiaturze (patrz krok 4.1) po odnotowaniu danego zachowania.

  1. Przypisanie kluczy do analizy wideo
    1. Przypisz klucze do każdego indeksu zachowania. Użycie odpowiednich kluczy dla każdego indeksu behawioralnego ma kluczowe znaczenie dla automatycznego podsumowania danych w kroku 4.3.
      Uwaga: Przypisania użyte w tym badaniu są pokazane w Rysunek 3.
  2. Analiza wideo
    1. Przeanalizuj każde nagranie wideo 3x pod kątem różnych wskaźników behawioralnych (Rysunek 3B). Zachowanie związane z samoopieką nie zostało ocenione. Upewnij się, że wbudowany głośnik komputera jest włączony, aby słyszeć dźwięk timera w filmie.
    2. Uruchom tanaMove.
    3. Przeciągnij i upuść plik wideo, który ma zostać przeanalizowany, do okna tanaMove. Upewnij się, że plik został załadowany oraz że ścieżka i nazwa wyjściowego pliku CSV w polu Plik danych [.csv] jest poprawna.
    4. Kliknij przycisk Gotowe. Spowoduje to aktywację nowego okna, w którym można wprowadzić przypisane.
    5. Kliknij przycisk Odtwórz, aby uruchomić plik wideo. Kliknij przycisk Zatrzymaj, aby wstrzymać plik wideo.
    6. Naciśnij A, gdy zauważysz, że mysz "zmierza" w kierunku ręki lub zbliża się do niej, w tym stojąc, aby powąchać. Naciśnij R, gdy zauważysz, że mysz "porusza się" bez kierowania się w stronę ręki podczas aktywnego testu oswajania.
    7. Naciśnij W przez co najmniej 0.3 s (co najmniej trzy interwały w oknie), gdy dźwięk timera będzie słyszalny po 60 s.
    8. Zainicjuj analizę testu pasywnego oswajania po wejściu lewej ręki na wideo. Naciśnij A, gdy zaobserwujesz, że mysz zmierza w kierunku ręki lub zbliża się do niej, a R, gdy zaobserwuje się, że mysz porusza się bez kierowania się w stronę ręki podczas testu pasywnego oswojenia.
    9. Naciśnij W przez co najmniej 0.3 s (co najmniej trzy interwały w oknie), gdy dźwięk timera będzie słyszalny po 60 s.
    10. Naciśnij T, gdy zauważysz, że mysz "pozostaje" na dłoni w teście pozostania przy dłoni.
    11. Po wykonaniu testu "nie trzymaj ręki" kliknij przycisk Zatrzymaj, aby zatrzymać obserwację wideo.
    12. Kliknij przycisk Wstecz i wpisz nową nazwę pliku wyjściowego danych CSV.
    13. Kliknij przycisk Gotowy, aby aktywować nowe okno w celu wprowadzenia przypisanych.
    14. Kliknij przycisk Odtwórz, aby ponownie uruchomić materiał wideo i rozpocząć obserwację aktywnego testu oswajania.
    15. Naciśnij T, gdy zaobserwujesz, że mysz "kontaktuje się" z człowiekiem, co obejmuje wszystkie dobrowolne zachowania związane z kontaktem, ale nie przypadkowe kontakty, takie jak lądowanie na dłoni po skoku, podczas aktywnego testu oswajania.
    16. Naciśnij W przez co najmniej 0.3 s (co najmniej trzy interwały w oknie), gdy dźwięk timera będzie słyszalny po 60 s.
    17. Naciśnij T, gdy mysz pozwoli eksperymentatorowi dotknąć swojego ciała podczas pasywnego testu oswajania.
    18. Naciśnij W przez co najmniej 0.3 s (co najmniej trzy interwały w oknie), gdy dźwięk timera będzie słyszalny po 60 s.
    19. Kliknij przycisk Zatrzymaj, aby zatrzymać wideo.
    20. Kliknij przycisk Wstecz i wpisz nową nazwę pliku wyjściowego danych CSV.
    21. Kliknij przycisk Gotowy, aby aktywować nowe okno w celu wprowadzenia przypisanych.
    22. Kliknij przycisk Odtwórz, aby ponownie uruchomić materiał wideo i rozpocząć obserwację aktywnego testu oswajania.
    23. Naciśnij J, gdy zaobserwujesz, że mysz "skacze" podczas aktywnego testu oswojenia.
    24. Naciśnij W przez co najmniej 0.3 s (co najmniej trzy interwały w oknie), gdy dźwięk timera będzie słyszalny po 60 s. Następnie rozpocznij obserwację testu pasywnego oswojenia.
    25. Naciśnij J, gdy zaobserwujesz, że mysz "skacze" podczas testu pasywnego oswojenia.
    26. Kliknij przycisk Stop, aby zatrzymać obserwację wideo, gdy dźwięk timera będzie słyszalny przez 60 sekund.
    27. Kliknij przycisk Wstecz i wpisz nową nazwę pliku wyjściowego danych CSV.
  3. Podsumowywanie danych
    1. Zapisz wszystkie pliki danych pierwotnych (CSV) w tym samym folderze co plik uzupełniający 2.xlsm (Materiały uzupełniające 2).
    2. Otwórz plik Supplementary 2.xlsm i kliknij przycisk Summarie (Podsumuj).
    3. Zapisz wyniki jako osobny plik i użyj go do dalszej analizy zachowania oswajania.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wcześniej przeprowadziliśmy selektywną hodowlę pod kątem aktywnego oswojenia u myszy i z powodzeniem wyprodukowaliśmy myszy, które wykazały wysoki poziom aktywnego oswojenia6. Reprezentatywne wyniki testów oswajalności dla wybranych i niewybranych grup myszy w 15. generacji (G15) przedstawiono na rysunku Rysunek 4. Myszy z wybranej grupy uzyskały wyższe wyniki w teście aktywnego oswojenia, wykazując znacznie dłuższy czas kon...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Reprezentatywne wyniki obejmują dziewięć wskaźników behawioralnych z testów oswajania aktywnego, oswajania pasywnego i pozostawania w ręce. Porównanie wyników między grupą badaną a grupą kontrolną wykazało wyraźne różnice w łagodzeniu. Wyniki te pokazują, że te trzy testy są ważne do pomiaru oswajalności u myszy.

Poziomy oswojenia u zwierząt mogą być trudne do empirycznego określenia. Opracowano kilka metod oceny oswajalności u jeleni, myszy i szczurów 8,9,10...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ta praca była wspierana przez Grants-in-Aid for Scientific Research (KAKENHI) w następujący sposób: 15H05724, 16H01491 i 15H04289.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
aparatura do pracy w otwartym poluO' Hara & Sp. z o.o.OF-3102400 razy; 400 razy; 400 mm, szarawy kompaktowy aparat cyfrowy z polichlorku winylu
Ricoh Company, Ltd.CX-5w firmie to rękawice
lateksoweAS ONEBioLab, stoper IKG-8002
SEIKOSSBJ018
Płyn do dezynfekcji JodoforuEcolab G.K. (CLEA Japan)CL-4123Mikro Klene
Produkcja

Bibliografia

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Albert, F. W., et al. Phenotypic differences in behavior, physiology and neurochemistry between rats selected for tameness and for defensive aggression towards humans. Hormones and Behavior. 53 (3), 413-421 (2008).
  2. Belyaev, D. K. Destabilizing selection as a factor in domestication. Journal of Heredity. 70 (5), 301-308 (1978).
  3. Trut, L. Early canid domestication: the farm-fox experiment. American Scientist. 87 (2), 160-169 (1999).
  4. Price, E. O. Animal Domestication and Behavior. , CABI Publishing. New York, NY. (2002).
  5. Goto, T., Tanave, A., Moriwaki, K., Shiroishi, T., Koide, T. Selection for reluctance to avoid humans during the domestication of mice. Genes, Brain and Behavior. 12 (8), 760-770 (2013).
  6. Matsumoto, Y., et al. Selective breeding and selection mapping using a novel wild-derived heterogeneous stock of mice revealed two closely linked loci for tameness. Scientific Reports. 7, 4607(2017).
  7. Koide, T., Goto, T., Takano-Shimizu, T. Genomic mixing to elucidate the genetic system of complex traits. Experimental Animals. 61 (5), 503-509 (2012).
  8. Albert, F. W., et al. Genetic architecture of tameness in a rat model of animal domestication. Genetics. 182 (2), 541-554 (2009).
  9. Cottle, C. A., Price, E. O. Effects of the nonagouti pelage-color allele on the behavior of captive wild Norway rats (Rattus norvegicus). Journal of Comparative Psychology. 101 (4), 390-394 (1987).
  10. Hayssen, V. Effects of the nonagouti coat-color allele on behavior of deer mice (Peromyscus maniculatus): a comparison with Norway rats (Rattus norvegicus). Journal of Comparative Psychology. 111 (4), 419-423 (1997).
  11. Arakawa, T., et al. A male-specific QTL for social interaction behavior in mice mapped with automated pattern detection by a hidden Markov model incorporated into newly developed freeware. Journal of Neuroscience Methods. 234, 127-134 (2014).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Aktywna oswojeniezachowanie myszybadanie oswojeniaanaliza behawioralnarejestracja wideoanaliza danychselektywna hodowlatest pozostawania na d onioprogramowanie TanaMove

Powiązane artykuły